一种异体外周血单个核细胞体外分离试剂盒及使用方法技术

本发明专利技术涉及一种异体外周血单个核细胞高纯度、高回收率体外分离试剂盒及使用方法，采用本试剂盒分离的异体单个核细胞可用于免疫治疗不明原因习惯性流产。所述试剂盒包括试剂Ⅰ：外周血稀释液，试剂Ⅱ：红细胞沉淀液，试剂Ⅲ：单个核细胞分层液，试剂Ⅳ：单个核细胞洗涤液。采用所述试剂盒进行异体外周血单个核细胞分离的步骤包括：抗凝血预离心、红细胞初反应、红细胞沉淀、单个核细胞分层液两步分离、单个核细胞二次纯化、检菌、单个核细胞冻存。采用本发明专利技术技术可使单个核细胞回收率可达到90%以上，纯度可达到95%以上，存活率达到98%以上，大大提高了外周血单个核细胞使用效率；通过抗凝血预离心步骤，去除血浆，与常规分离技术相比，降低了分离试剂的使用剂量，有效降低分离成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体涉及一种异体外周血单个核细胞高纯度、高回收 率体外分离试剂盒及使用方法，采用本试剂盒分离的异体单个核细胞可用于免疫治疗不明 原因习惯性流产。本专利技术所述的试剂盒包括试剂I:外周血稀释液，试剂II:红细胞沉淀 液，试剂III:单个核细胞分层液，试剂IV:单个核细胞洗涤液。采用本专利技术的试剂盒进行异 体外周血单个核细胞体外分离可达到如下效果：①单个核细胞回收率可达到90%以上，存 活率达到98%以上，大大提高了外周血单个核细胞使用效率；②分离获得的外周血单个核 细胞纯度可达到95%以上，红细胞和血小板残留率小，极大地避免了由于上述组分导致的 过敏风险；③通过分离前抗凝血预离心步骤，去除血浆，与常规分离技术相比，降低了分离 试剂的使用剂量，有效降低分离成本。
技术介绍
所谓习惯性流产是指连续两次怀孕在同一妊娠周发生自然流产的现象，40%-70% 左右的习惯性流产原因不明，这其中大多数疑为免疫因素所引起。免疫因素造成习惯性流 产的原因是：胎儿是一个既带有母系遗传基因又带有父系遗传基因的新的个体，在母体子 宫内生长发育直至分娩，胎儿与母体存在着本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种异体外周血单个核细胞体外分离试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如下试剂，试剂Ⅰ：外周血稀释液、试剂Ⅱ：红细胞沉淀液、试剂Ⅲ：单个核细胞分层液、试剂Ⅳ：单个核细胞洗涤液和试剂Ⅴ：单个核细胞冻存液，以及使用该试剂盒的指导说明书。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王盛，齐湘杰，王丽，
申请(专利权)人：王盛，
类型：发明
国别省市：山东;37