本发明专利技术一种醋酸去氨加压素的固相制备工艺，包括以下步骤：以替代度为1.6~2.0mmol/g的Am Resin树脂，溶胀、抽干为起始原料，偶联Fmoc Rink Amide AM-Linker；根据肽序，从C端到N端开始再依次偶联，直至完成线肽树脂的合成；在线肽树脂中加入I2溶液，从而将线性肽树脂氧化成氧化型肽树脂，I2溶液为将I2溶解于由DMF、MeOH按照1：1体积比形成的溶剂中；将氧化型肽树脂缓缓加入裂解液中，待全部加完后，再在室温裂解2h，待裂解时间结束后，将树脂滤掉得到含多肽的裂解液；将含多肽的裂解液缓缓加入到的冰乙醚中，析出白色的固体粗肽，从而得到干燥后的粗肽。本发明专利技术产品纯度可达到99%以上，总收率可超过45%，生产效率较高，对设备要求低，并且可以实现规模化生产，有较好的经济社会价值和广泛的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及多肽药物化学合成领域，具体涉及一种醋酸去氨加压素的固相制备工 〇
技术介绍
去氨加压素的氨基酸序列为：3_疏基丙氨酰-L-酪氨酰-L-苯丙氨酰-L-谷氨酰 胺氨酰-L-天冬酰胺氨酰-L-半胱氨酰-L-脯氨酰-D-精氨酰-甘氨酰胺（1 - 6)环二硫 化物，其结构如下?【主权项】1. 一种醋酸去氨加压素的固相制备工艺，其特征在于：包括以下步骤： 步骤一、以替代度为I. 6~2.Ommol/g的AmResin树脂，溶胀、抽干为起始原料，偶联FmocRinkAmideAM-Linker，制得功能基载体； 步骤二、采用固相多肽逐步缩合法，根据肽序从C端至N端，首先将Fmoc-Gly-OH与步 骤一RinkAmide-AMResin偶联反应获得Fmoc-Gly-功能基载体； 步骤三、去除步骤二Fmoc-Gly-功能基载体的保护基Fmoc，从而获得H-Gly-功能基载 体； 步骤四、根据肽序，按照Fmoc/tBu固相逐步合成策略，重复以上脱Fmoc保护和 偶联操作步骤，从C端到N端开始再依次偶联Fmoc-D-Arg(pbf) -OH、Fmoc-Pro-OH、 Fmoc-Cys(Trt) -OH、Fmoc-Asn(Trt) -OH、Fmoc-Gln(Trt) -OH、Fmoc-Phe-OH、 Fmoc-Tyr(tBu) -〇H、Mpr(Trt) -0H，期间依次脱去Fmoc-保护基团，直至完成线肽树脂的合 成； 步骤五、在所述线肽树脂中加入I2溶液，从而将线性肽树脂氧化成氧化型肽树脂，所述 12溶液为将12溶解于由DMF、MeOH按照1 :1体积比形成的溶剂中，所述12的量为线肽树脂 的摩尔数的4~8倍； 步骤六、将所述氧化型肽树脂缓缓加入裂解液中，待全部加完后，再在室温裂解2h，待 裂解时间结束后，将树脂滤掉得到含多肽的裂解液，所述裂解液由TFA、TIS、H2O按照95 : 2~3 :2~3体积份比例混合形成； 步骤七、将含多肽的裂解液缓缓加入到的冰乙醚中，析出白色的固体粗肽，静置后离 心，并用冰的无水乙醚交替研磨洗涤、离心，所述粗品经真空干燥至恒重，得到干燥后的粗 肽； 步骤八、将所述干燥后的粗肽采用乙腈：纯水=2 :8的溶液溶解，借助制备型反相HPLC纯化，收集目的产物，旋蒸，冻干得到醋酸去氨加压素成品。2. 根据权利要求1所述的醋酸去氨加压素的固相制备工艺，其特性在于：所述步骤二 和步骤四中Fmoc保护的氨基酸的投料量为与其进行的偶联的树脂的摩尔数的2~4倍。3. 根据权利要求1所述的醋酸去氨加压素的固相制备工艺，其特征在于：所述步骤六 中裂解液由TFA、TIS、H2O按照95 :2. 5 :2. 5体积份比例混合形成。4. 根据权利要求1所述的醋酸去氨加压素的固相制备工艺，其特征在于：所述步骤八 中A相选择磷酸盐缓冲液，B相为磷酸盐缓冲液-乙腈。5. 根据权利要求1所述的醋酸去氨加压素的固相制备工艺，其特征在于：所述步骤二 和步骤四中采用DIC/HOBt缩合体系。6. 根据权利要求1所述的醋酸去氨加压素的固相制备工艺，其特征在于：所述干燥后 的粗肽的溶解浓度2. 5~3. 5mmol/L。【专利摘要】本专利技术一种醋酸去氨加压素的固相制备工艺，包括以下步骤：以替代度为1.6~2.0mmol/g的Am Resin树脂，溶胀、抽干为起始原料，偶联Fmoc Rink Amide AM-Linker；根据肽序，从C端到N端开始再依次偶联，直至完成线肽树脂的合成；在线肽树脂中加入I2溶液，从而将线性肽树脂氧化成氧化型肽树脂，I2溶液为将I2溶解于由DMF、MeOH按照1：1体积比形成的溶剂中；将氧化型肽树脂缓缓加入裂解液中，待全部加完后，再在室温裂解2h，待裂解时间结束后，将树脂滤掉得到含多肽的裂解液；将含多肽的裂解液缓缓加入到的冰乙醚中，析出白色的固体粗肽，从而得到干燥后的粗肽。本专利技术产品纯度可达到99%以上，总收率可超过45%，生产效率较高，对设备要求低，并且可以实现规模化生产，有较好的经济社会价值和广泛的应用前景。【IPC分类】C07K1-20, C07K7-16, C07K1-06, C07K1-04【公开号】CN104761619【申请号】CN201510004651【专利技术人】高鲁, 胡影莉, 陈逸民, 王良友 【申请人】苏州天马医药集团天吉生物制药有限公司【公开日】2015年7月8日【申请日】2015年1月6日本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种醋酸去氨加压素的固相制备工艺，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、以替代度为1.6~2.0mmol/g的Am Resin树脂，溶胀、抽干为起始原料，偶联Fmoc Rink Amide AM‑Linker，制得功能基载体；步骤二、采用固相多肽逐步缩合法，根据肽序从C端至N端，首先将Fmoc‑Gly‑OH与步骤一Rink Amide‑AM Resin偶联反应获得Fmoc‑Gly‑功能基载体；步骤三、去除步骤二Fmoc‑Gly‑功能基载体的保护基Fmoc，从而获得H ‑Gly‑功能基载体；步骤四、根据肽序，按照Fmoc/tBu固相逐步合成策略，重复以上脱Fmoc保护和偶联操作步骤，从C端到N端开始再依次偶联Fmoc‑D‑Arg(pbf) ‑OH、 Fmoc‑Pro‑OH、 Fmoc‑Cys(Trt) ‑OH、 Fmoc‑Asn(Trt) ‑OH、 Fmoc‑Gln(Trt) ‑OH、 Fmoc‑Phe‑OH、 Fmoc‑Tyr(tBu) ‑OH、Mpr(Trt) ‑OH，期间依次脱去Fmoc‑保护基团，直至完成线肽树脂的合成；步骤五、在所述线肽树脂中加入I2溶液，从而将线性肽树脂氧化成氧化型肽树脂，所述I2溶液为将I2溶解于由DMF、MeOH按照1：1体积比形成的溶剂中，所述I2的量为线肽树脂的摩尔数的4~8倍；步骤六、将所述氧化型肽树脂缓缓加入裂解液中，待全部加完后，再在室温裂解2h，待裂解时间结束后，将树脂滤掉得到含多肽的裂解液，所述裂解液由TFA、TIS、H2O按照95：2~3：2~3体积份比例混合形成；步骤七、将含多肽的裂解液缓缓加入到的冰乙醚中，析出白色的固体粗肽，静置后离心，并用冰的无水乙醚交替研磨洗涤、离心，所述粗品经真空干燥至恒重，得到干燥后的粗肽；步骤八、将所述干燥后的粗肽采用乙腈：纯水=2：8的溶液溶解，借助制备型反相HPLC 纯化，收集目的产物，旋蒸，冻干得到醋酸去氨加压素成品。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：高鲁，胡影莉，陈逸民，王良友，
申请(专利权)人：苏州天马医药集团天吉生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。