苦豆子总碱的质量检测方法技术

本发明专利技术涉及一种苦豆子总碱的质量检测方法，该方法包括有效成分的含量测定和主要成分的鉴别检测，其中有效成分的含量测定是指采用高效液相色谱法对苦豆子总碱中的氧化苦参碱和苦参碱之和或者氧化槐果碱和槐果碱之和进行测定；主要成分的鉴别检测是指采用高效液相色谱或者薄层色谱法对苦豆子总碱中的槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱及苦参碱进行鉴别。本发明专利技术所建立的方法准确度高、专属性强、重现性良好，有利于苦豆子总碱的质量控制。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药检测
，特别是涉及一种苦豆子总碱质量检测方法。
技术介绍
苦豆子总碱是从豆科槐属植物苦豆子中提取的总生物碱，苦豆子总碱含有20多 种生物碱，槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱是其主要成分。苦豆子植物中 氧化苦参碱、氧化槐果碱的含量高于槐定碱、苦参碱、槐果碱的含量，表明在植物体内氧化 苦参碱、氧化槐果碱应为较稳定的天然存在形式，且提取过程中苦参碱与氧化苦参碱、槐果 碱与氧化槐果碱存在着相互转化，随着提取时间的增加，氧化型生物碱转化为还原型生物 碱的量增加。国家食品药品监督管理局局颁标准苦豆子总碱（WS-10001 (HD-139D-2003) 的质量标准中采用HPLC测定槐定碱的方法，未采用测定苦参碱、氧化苦参碱或氧化槐果 碱、槐果碱的方法，忽略了苦豆子提取过程氧化型生物碱与还原型生物碱相互转化的因素。 仅仅测定单一成分槐定碱的含量难以反映苦豆子中生物碱的实际含量状况，因此建立以苦 参碱和氧化苦参碱之和或以氧化槐果碱和槐果碱之和作为质量控制指标对于苦豆子总碱 质量控制具有非常重要的意义。 中药成分复杂，建立多种指标成份的质量控制，多方面控制产品质量，提高现代中 药的质量控制水平，是发展的方向。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种以建立多种指标成份来进行产品质量控制为目标的苦 豆子总碱的质量检测方法。 本专利技术的目的是按照下述方案实现： 一种，其特征在于包括有效成分的含量测定和主要成 分的鉴别检测，其中有效成分的含量测定是指采用高效液相色谱法对苦豆子总碱中的氧化 苦参碱和苦参碱之和或者氧化槐果碱和槐果碱之和进行测定；主要成分的鉴别检测是指采 用高效液相色谱或者薄层色谱法对苦豆子总碱所含生物碱进行鉴别。 所述采用高效液相色谱法对苦豆子总碱中的氧化苦参碱和苦参碱之和或者氧化 槐果碱和槐果碱之和进行测定中，色谱条件：以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂；以乙腈 为流动相A，以含有2. OmL/L三乙胺的0. 05m〇L/L的磷酸二氢钾溶液为流动相B，按0~ 12min流动相A-流动相B (6:94)，12~60min流动相A-流动相B (10:90)进行梯度洗脱； 检测波长为205nm，理论塔板数按氧化苦参碱峰或氧化槐果碱峰计算应不低于5000。 所述采用高效液相色谱法对苦豆子总碱中的氧化苦参碱和苦参碱之和或者氧化 槐果碱和槐果碱之和进行测定过程中， 对照品溶液的制备：取苦参碱对照品、氧化苦参碱对照品适量，精密称定，加甲醇 制成每ImL含苦参碱0. 10mg、氧化苦参碱0. 15mg的混合溶液或取槐果碱对照品、氧化槐果 碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每ImL含槐果碱0. 10mg、氧化槐果碱0. 15mg的混合溶 液； 供试品溶液的制备：取苦豆子总碱供试品约〇. 2g，精密称定，加甲醇溶解定容至 IOOmL量瓶中，混匀，即得； 测定法：分别精密吸取苦参碱和氧化苦参碱混合对照品溶液或槐果碱和氧化槐果 碱混合对照品溶液〇 μ L，另取供试品溶液10 μ L，注入液相色谱仪，测定，按外标法分别计 算苦参碱和氧化苦参碱的量或槐果碱和氧化槐果碱的量，将两者加和，即得。 所述的高效液相色谱法对有效成分的鉴别检测中，色谱条件为：以十八烷基硅烷 健合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相Α，以含有2. OmL/L三乙胺的0. 05m〇L/L的磷酸二氢 钾溶液为流动相B，按0~12min流动相A-流动相B (6:94)，12~60min流动相A-流动相 B(10:90)进行梯度洗脱；检测波长为205nm，理论板数按氧化苦参碱峰计算应不低于5000。 所述的高效液相色谱法对有效成分的鉴别检测中， 参照物溶液的制备：取槐定碱对照品、氧化苦参碱对照品、氧化槐果碱对照品及苦 参碱对照品适量，分别加甲醇制成每ImL各含0.1 Omg的溶液，作为参照物溶液； 供试品溶液的制备：取苦豆子总碱供试品约0. lg，精密称定，加甲醇溶解，并用甲 醇制成每HiL含4mg的溶液，作为供试品溶液； 测定法：取供试品溶液及参照物溶液各10yL，注入液相色谱仪，测定供试品色谱 图，供试品色谱图应呈现四个与对照特征图谱相对应的特征峰，其保留时间应与参照物峰 保留时间相对应，与氧化苦参碱峰保留时间相对应的峰为S峰；各特征峰的相对保留时间 规定值分别为〇. 72 (峰I)，1. 00 (峰2)，1. 13 (峰3)，1. 57 (峰4)，2. 06 (峰5)，供试品色谱 图中，各特征峰的相对保留时间应在其规定值的±5%之内。 所述薄层色谱法对有效成分的鉴别检测中，将供试品溶液和对照品溶液分别点于 同一硅胶G薄层板上，以体积比为5:0. 6:0. 3的三氯甲烷-甲醇-浓氨水为展开剂，上行展 开一半，取出凉干，再以体积比为7:3:3甲苯-丙酮-乙酸乙酯为展开剂，二次展开，取出， 晾干，喷以改良碘化铋钾试液。 本专利技术通过对色谱条件的优选及供试品、对照品制备方法的试验，建立了苦豆子 总碱中主要成分苦参碱与氧化苦参碱之和或以氧化槐果碱和槐果碱之和作为含量测定指 标的高效液相色谱分析方法；建立以槐定碱对照品、氧化苦参碱对照品、氧化槐果碱对照品 及苦参碱对照品作为参照物溶液，以苦豆子总碱为供试品溶液，计算各特征峰与氧化苦参 碱参照物峰的相对保留时间的鉴别苦豆子总碱的高效液相色谱法；通过对色谱分离系统的 优化，展开剂配比的调整，建立了苦豆子总碱的薄层色谱鉴别方法。通过对方法学试验研宄 表明：所建立的方法准确度高、专属性强、重现性良好，有利于苦豆子总碱的质量控制。【具体实施方式】 苦豆子总碱质量检测方法，包括有效成分的含量测定和主要成分的鉴别检测。其 中有效成分的含量测定是指采用高效液相色谱法对苦豆子总碱中的氧化苦参碱和苦参碱 之和或者氧化槐果碱和槐果碱之和进行测定。主要成分的鉴别检测是指采用高效液相色谱 或者薄层色谱法对苦豆子总碱中的槐定碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱及苦参碱进行鉴别。 实施例1 :有效成分的含量测定 1、色谱条件：以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0. 05m〇L/ L的磷酸二氢钾溶液（内含2. OmL/L三乙胺）为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱； 检测波长为205nm。理论塔板数按氧化苦参碱峰或以氧化槐果碱峰计算应不低于5000。【主权项】1. 一种，其特征在于包括有效成分的含量测定和主要成 分的鉴别检测，其中有效成分的含量测定是指采用高效液相色谱法对苦豆子总碱中的氧化 苦参碱和苦参碱之和或者氧化槐果碱和槐果碱之和进行测定；主要成分的鉴别检测是指采 用高效液相色谱或者薄层色谱法对苦豆子总碱所含生物碱进行鉴别。2. 如权利要求1所述的，其特征在于所述采用高效液相 色谱法对苦豆子总碱中的氧化苦参碱和苦参碱之和或者氧化槐果碱和槐果碱之和进行测 定中，色谱条件：以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以含有2.OmL/L三 乙胺的0. 05m〇L/L的磷酸二氢钾溶液为流动相B，按0~12min流动相A-流动相B(6:94)， 12~60min流动相A-流动相B(10:90)进行梯度洗脱；检测波长为205nm，理论塔板数按 氧化苦参碱峰或氧化槐果碱峰计算应不低于5000。3. 如权利要求2所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种苦豆子总碱的质量检测方法，其特征在于包括有效成分的含量测定和主要成分的鉴别检测，其中有效成分的含量测定是指采用高效液相色谱法对苦豆子总碱中的氧化苦参碱和苦参碱之和或者氧化槐果碱和槐果碱之和进行测定；主要成分的鉴别检测是指采用高效液相色谱或者薄层色谱法对苦豆子总碱所含生物碱进行鉴别。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：冷晓红，陈海燕，王秀芬，郭鸿雁，郭超，
申请(专利权)人：宁夏职业技术学院，
类型：发明
国别省市：宁夏;64