一种油用牡丹组织培养方法及改良的基本培养基技术

本发明专利技术公开了一种油用牡丹组织培养方法，其特征在于，其包括如下步骤：S1、建立无菌培养环境；选条：选取生长健壮的当年生油用牡丹枝条，用饱满而未萌发的侧芽作为外植体；配置培养基：包括分化培养基和生根培养基；清洗外植体；消毒与接种；培养无菌芽；S2、继代增殖S21、将上述无菌芽从原茎段上切下，转接到分化培养基上，促使嫩茎长出更多的侧芽，将原茎段去除；继代增殖培养基每升用蔗糖25-27克；S22、每28-49天重复做一次继代增殖，继代前先制备好生根培养基，然后在无菌操作条件下，将月季嫩茎切成1～2节一段，投入新鲜的增殖培养基上；S23、生根与移栽。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种油用牡丹组织培养方法，其特征在于，其包括如下步骤：S1、建立无菌培养环境；选条：选取生长健壮的当年生油用牡丹枝条，用饱满而未萌发的侧芽作为外植体；配置培养基：包括分化培养基和生根培养基，上述两种培养基都以MS为基本培养基，分化培养基是由BA即苄氨基腺嘌呤、NAA即a‑萘乙酸、L‑脯氨酸、L‑谷氨酰胺、水解酪蛋白、蔗糖以及琼脂粉溶解于基本培养基MS中而成的，其各组分的用量：MS为1L，BA为1mg，NAA为0.05mg，L‑脯氨酸为500mg、L‑谷氨酰胺为500MG、水解酪蛋白为200MG、蔗糖为3000mg，琼脂粉为5500mg；生根培养基是由NAA即a‑萘乙酸、L‑脯氨酸、L‑谷氨酰胺、水解酪蛋白、蔗糖以及琼脂粉溶解于基本培养基MS中而成的，其各组分的用量：MS为1L，NAA为0.2mg，L‑脯氨酸为500MG、L‑谷氨酰胺为500MG、水解酪蛋白为200MG、蔗糖为3000mg，琼脂粉为550mg；分化培养基和生根培养基还包括一水硫酸锰22.3mg、七水硫酸锌8.6mg、硼酸6.2mg、二水钼酸钠0.025mg、五水硫酸铜0.025mg、六水氯化钴0.025mg、钠盐37.3mg、七水硫酸亚铁27.8mg、碘化钾0.83mg；植物生长调节剂：苄基腺嘌呤0.35mg、萘乙酸0.25mg；清洗外植体：采回的油用牡丹枝条切去叶，再剥去附在茎上的叶柄及皮刺，先整段用洗手刷沾浓洗衣粉水仔细刷洗，再用自来水冲洗，毛巾擦干，放置在小木板上，用利刀切成2‑3cm一段，每段至少一个侧芽，装入消毒过的培养皿，放在超净工作台上，打开紫外灯，做表面灭菌25‑30分钟；消毒与接种：在超净工作台上，用饱和漂白粉上清液作表面灭菌25‑30分钟，灭菌时间快到时，即倾去灭菌溶液，用无菌水涮洗3‑5次，并通过无菌纱布吸干茎段外表水分，按无菌操作要求，接种到直径为5‑7cm的试管里，从芽萌发到芽长到1厘米左右需要2～3周；培养无菌芽：在20‑25℃的条件下，光照14‑21天，每天光照时间为11‑14小时，光照强度为1300‑1500LX；S2、继代增殖S21、将上述无菌芽从原茎段上切下，转接到分化培养基上，促使嫩茎长出更多的侧芽，将原茎段去除；继代增殖培养基每升用蔗糖25‑27克；S22、每28‑49天重复做一次继代增殖，继代前先制备好生根培养基，然后在无菌操作条件下，将月季嫩茎切成1～2节一段，投入新鲜的增殖培养基上；S23、生根与移栽游泳牡丹嫩芽生长到4‑7cm时，就应切割下来，转入生根培养基；切下的嫩芽长度为2‑3厘米，让幼苗基部伤口愈合，已长出根原基，幼根尚未长出，即出瓶种植。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李会合，陈泽雄，唐建民，
申请(专利权)人：重庆文理学院，
类型：发明
国别省市：重庆;85