紫茎组织培养快速繁育方法技术

本发明专利技术提供一种紫茎组织培养快速繁育方法，包括外植体选择与消毒、从生芽诱导、丛生芽增殖、生根培养、壮苗培养和苗床培养等步骤。与紫茎传统育苗方法相比，本发明专利技术的方法不受紫茎种子数量和种子发芽率的限制，利用紫茎当年生新梢进行组织培养，获得紫茎幼苗，并将幼苗移栽到苗床中继续培养获得紫茎移栽苗，该繁育方法可有效提高紫茎的繁育系数，保留紫茎的优良遗传特性，幼苗成活率高达95％，移栽苗野外移栽成活率高达80％，可实现紫茎苗木的规模化生产和野外大面积育林生长，并为紫茎这一珍稀濒危植物的有效保护提供技术支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物繁殖
，具体涉及一种紫茎组织培养快速繁育方法。
技术介绍
紫茎(拉丁学名:Stewartia sinensis Rehd.et Wils.)属山茶科紫茎属多年生木本植物。由于植被不断被破坏，天然更新力差，紫茎植株已日益减少，在中国红皮书被列为“渐危种”。紫茎为中国特有的残遗植物，对研究东亚-北美植物区系有科学意义，其树皮片状脱裂，内皮棕黄光洁，斑驳奇丽，花白瓣黄蕊，清秀淡雅，常用于装饰庭院；材质坚重，经久耐用色美丽，为制造家具有优良用材；根皮、茎皮、果可入药；种子油可食用或制肥皂及润滑油，故紫茎具有较高的经济价值，尤其是随着人们生活水平的提升，对物质的追求也不断的提升，用紫茎装饰庭院，以紫茎这一优质而又美观的木材制作的家具，也会得到越来越多的人士的青睐，其市场前景广阔。紫茎在自然状况下以种子进行繁殖，由于受到种子数量和种子发芽率的限制，不能实现苗木规模化生产，且采用种子培育的实生苗木性状差异大，不适合大面积育林生长。组织培养是一种植株快速繁殖技术，其所需植株原材料少，不受生长季节限制，培养周期短，变异低，可保持母本的优良遗传特性，可用于拯救濒危珍稀植物，解决其无法短时大量繁殖的难题，实现模化生产。但目前关于紫茎的组织培养研究还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。本专利技术还有一个目的是提供一种紫茎组织培养快速繁育方法，利用紫茎
当年生新梢进行组织培养，获得紫茎幼苗，并将幼苗移栽到苗床中继续培养获得紫茎移栽苗，该繁育方法不受紫茎种子数量和种子发芽率的限制，可有效提高紫茎的繁育系数，保留紫茎的优良遗传特性，幼苗成活率高达95％，移栽苗野外移栽成活率高达80％，可实现紫茎苗木的规模化生产和野外大面积育林生长，有利于紫茎这一珍稀濒危植物的有效保护。本专利技术还有一个目的是提供一种紫茎组织培养快速繁育方法，包括以下步骤：A、选取性状优异的紫茎植株作母本，剪取其当年生新梢，取其顶端5-10cm的枝条，将所述枝条用质量分数为2％的洗洁精水溶液浸泡20min，取出，用线状自来水冲洗15-20min，再放入天然消毒液中浸泡30min，最后将所述枝条用无菌水冲洗3-5次并用消毒滤纸除去其表面水分，得外植体，其中，所述天然消毒液的制备方法为：将10-12重量份代代、7-9重量份白千层、7-9重量份蓝桉、6-8重量份大蒜、5-7重量份柠檬草和4-6重量份丁香粉碎至50-100目，加入500重量份的水室温下浸泡1h，再于60℃下真空回流提取2-4h，过滤，所得滤液即为所述天然消毒液；B、将步骤A中得到的所述外植体用无菌解剖刀切割成0.5-0.8cm的小段并转接到丛生芽诱导培养基中，于22-26℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养28-30天，得第一丛生芽，其中，所述丛生芽诱导培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.0-2.5mg/L ZT(玉米素)，1.0-1.5mg/L 6-KT(激动素)，1.0-1.5mg/L 2.4.5-T(2.4.5-三氯苯氧乙酸)，15-20g/L蛋黄液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和5g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；第一光照条件下培养时，光照强度为2000-2200lux，光照时间为14-16h/天；所述蛋黄液是取新鲜蛋黄，经充分搅拌后，用80目滤布过滤制得；C、将步骤B中得到的所述第一丛生芽用无菌解剖刀切割成带有1-2个芽的小块并分别转接到增殖培养基中，于22-26℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养28-30天，得第二丛生芽，其中，所述增殖培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.0-2.5mg/L ZT，1.5-2.0mg/L 6-KT，1.2-1.5mg/L NAA(α-萘乙酸)，15-20g/L蛋黄液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；D、将步骤C中得到的所述第二丛生芽转接到生根养基中，于22-26℃，黑暗条件下培养6天后，转入第二光照条件下培养18-20天，得完整植株，其中，所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，还包括1.2-1.5mg/L NAA，0.8-1.0mg/L IBA(吲哚丁酸)，0.8-1.0mg/L多效唑，1-3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；第二光照条件下培养时，光照强度2200-2400lux，光照时间为14-16h/天；E、向所述生根培养基中加入0.5cm厚的无菌水，敞口培养7天后，将所述完整植株取出，转入壮苗培养基中，第三光照条件下培养28-30天，得幼苗，其中，所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.0-2.5mg/L IBA，1.5-1.8mg/L ZT，0.8-1.0mg/L 6-BA(6-苄氨基嘌呤)，0.8-1.0mg/L多效唑，20-25g/L蛋黄液，3-5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；第三光照条件下培养时，光照强度2200-2400lux，光照时间为14-16h/天，光照时培养温度为22-26℃，非光照时培养温度为16-20℃；F、将步骤E中得到的所述幼苗移栽到苗床中继续培养5-6个月，得紫茎移栽苗，最后将所述紫茎移栽苗进行野外移栽。优选的是，所述的紫茎组织培养快速繁育方法，苗床中培养时，培养温度为16-20℃、湿度为70-80％、阴蔽度为20-30％。优选的是，所述的紫茎组织培养快速繁育方法，所述苗床由床体和基质组成，其中，所述床体，其包括：床架，其为上表面开口的中空长方体，其长为3-9m、宽为1-1.8m、高为20-25cm；所述床架的平行于长度方向的右侧面和与其相邻的前侧面、后侧面及底面可拆卸连接；所述右侧面的下方设有与竖直方向呈30-60°的向下倾斜的滑槽，所述滑槽与所述底面边缘固定连接；喷雾装置，其包括间隔设置在所述床架的内部上方并与所述床架的长度方向平行的多个进水管和间隔设置在所述进水管上的多个旋转喷头；温控装置，其为设置在所述床架的内部下方的呈波浪形排列的热交换管；自动控制系统，其包括设置在所述床架的内部的多个温湿度传感器和设置在所述前侧面的外表面上的控制面板。优选的是，所述的紫茎组织培养快速繁育方法，所述基质，其包括：第一基质层，其由15-20重量份稻壳、15-20重量份珍珠岩和10-12重量份锯末经高温灭菌制得，其厚度为6-8cm；第二基质层，其位于所述第一基质层上方，其由20-30重量份厩肥、15-20重量份废蜜液、15-20份蛋壳、10-15重量份豆渣、10-15重量份秸秆和0.8-1份酵素菌经发酵后再加入40-50重量份黄壤土混合制得，其厚度为13-15cm；第三基质层，其位于所述第二基质层上方，其为厚度为1-2cm的表层腐殖土。优选的是，所述的紫茎组织培养快速繁育方法，所述丛生芽诱导培养基中ZT浓度为2.2mg/L，6-KT浓度为1.2mg/L，2.4.5-T浓度为1.2mg/L，蛋黄液浓度为18g/L，大豆肽浓度为5g/L，pH值为5.8。优选的是，所述的紫茎本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种紫茎组织培养快速繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：A、选取性状优异的紫茎植株作母本，剪取其当年生新梢，取其顶端5‑10cm的枝条，将所述枝条用质量分数为2％的洗洁精水溶液浸泡20min，取出，用线状自来水冲洗15‑20min，再放入天然消毒液中浸泡30min，最后将所述枝条用无菌水冲洗3‑5次并用消毒滤纸除去其表面水分，得外植体，其中，所述天然消毒液的制备方法为：将10‑12重量份代代、7‑9重量份白千层、7‑9重量份蓝桉、6‑8重量份大蒜、5‑7重量份柠檬草和4‑6重量份丁香粉碎至50‑100目，加入500重量份的水室温下浸泡1h，再于60℃下真空回流提取2‑4h，过滤，所得滤液即为所述天然消毒液；B、将步骤A中得到的所述外植体用无菌解剖刀切割成0.5‑0.8cm的小段并转接到丛生芽诱导培养基中，于22‑26℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养28‑30天，得第一丛生芽，其中，所述丛生芽诱导培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.0‑2.5mg/L ZT，1.0‑1.5mg/L 6‑KT，1.0‑1.5mg/L 2.4.5‑T，15‑20g/L蛋黄液，4‑6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和5g/L琼脂，pH值为5.5‑5.8；第一光照条件下培养时，光照强度为2000‑2200lux，光照时间为14‑16h/天；C、将步骤B中得到的所述第一丛生芽用无菌解剖刀切割成带有1‑2个芽的小块并分别转接到增殖培养基中，于22‑26℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养28‑30天，得第二丛生芽，其中，所述增殖培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.0‑2.5mg/L ZT，1.5‑2.0mg/L 6‑KT，1.2‑1.5mg/L NAA，15‑20g/L蛋黄液，4‑6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.5‑5.8；D、将步骤C中得到的所述第二丛生芽转接到生根养基中，于22‑26℃，黑暗条件下培养6天后，转入第二光照条件下培养18‑20天，得完整植株，其中，所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，还包括1.2‑1.5mg/L NAA，0.8‑1.0mg/L IBA，0.8‑1.0mg/L多效唑，1‑3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.5‑5.8；第二光照条件下培养时，光照强度2200‑2400lux，光照时间为14‑16h/天；E、向所述生根培养基中加入0.5cm厚的无菌水，敞口培养7天后，将所述完整植株取出，转入壮苗培养基中，第三光照条件下培养28‑30天，得幼苗，其中，所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.0‑2.5mg/L IBA，1.5‑1.8mg/L ZT，0.8‑1.0mg/L 6‑BA，0.8‑1.0mg/L多效唑，20‑25g/L蛋黄液，3‑5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L琼脂，pH值为5.5‑5.8；第三光照条件下培养时，光照强度2200‑2400lux，光照时间为14‑16h/天，光照时培养温度为22‑26℃，非光照时培养温度为16‑20℃；F、将步骤E中得到的所述幼苗移栽到苗床中继续培养5‑6个月，得紫茎移栽苗，最后将所述紫茎移栽苗进行野外移栽。...

【技术特征摘要】
1.一种紫茎组织培养快速繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：A、选取性状优异的紫茎植株作母本，剪取其当年生新梢，取其顶端5-10cm的枝条，将所述枝条用质量分数为2％的洗洁精水溶液浸泡20min，取出，用线状自来水冲洗15-20min，再放入天然消毒液中浸泡30min，最后将所述枝条用无菌水冲洗3-5次并用消毒滤纸除去其表面水分，得外植体，其中，所述天然消毒液的制备方法为：将10-12重量份代代、7-9重量份白千层、7-9重量份蓝桉、6-8重量份大蒜、5-7重量份柠檬草和4-6重量份丁香粉碎至50-100目，加入500重量份的水室温下浸泡1h，再于60℃下真空回流提取2-4h，过滤，所得滤液即为所述天然消毒液；B、将步骤A中得到的所述外植体用无菌解剖刀切割成0.5-0.8cm的小段并转接到丛生芽诱导培养基中，于22-26℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养28-30天，得第一丛生芽，其中，所述丛生芽诱导培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.0-2.5mg/L ZT，1.0-1.5mg/L 6-KT，1.0-1.5mg/L 2.4.5-T，15-20g/L蛋黄液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和5g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；第一光照条件下培养时，光照强度为2000-2200lux，光照时间为14-16h/天；C、将步骤B中得到的所述第一丛生芽用无菌解剖刀切割成带有1-2个芽的小块并分别转接到增殖培养基中，于22-26℃，黑暗条件下培养2天后，转入第一光照条件下培养28-30天，得第二丛生芽，其中，所述增殖培养基是以3/4MS培养基为基本培养基，还包括2.0-2.5mg/L ZT，1.5-2.0mg/L 6-KT，1.2-1.5mg/L NAA，15-20g/L蛋黄液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；D、将步骤C中得到的所述第二丛生芽转接到生根养基中，于22-26℃，黑暗条件下培养6天后，转入第二光照条件下培养18-20天，得完整植株，其中，所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，还包括1.2-1.5mg/L NAA，0.8-1.0mg/L IBA，0.8-1.0mg/L多效唑，1-3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L琼脂，pH值为5.5-5.8；第二光照条件下培养时，光照强度2200-2400lux，光照时间为14-16h/天；E、向所述生根培养基中加入0.5cm厚的无菌水，敞口培养7天后，将所述完整植株取出，转入壮苗培养基中，第三光照条件下培养28-30天，得幼苗，其中，所述壮苗培养基是以MS培养基为基本培养基，还包括2.0-2.5mg/L IBA，1.5-1.8mg/L ZT，0.8-1.0mg/L 6-BA，0.8-1.0mg/L多效唑，20-25g/L蛋黄液，3-5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L琼脂，pH值为...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈思，
申请(专利权)人：陈思，
类型：发明
国别省市：广西;45