一种荭草提取物中总黄酮含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种荭草提取物中总黄酮含量测定方法，采用紫外分光光度法，以荭草素为对照品，对荭草提取物中总黄酮进行含量测定,本研究以荭草素为对照品，采用紫外分光光度法对荭草提取物中总黄酮进行了含量测定究，以提高其质量控制水平，为荭草药材进一步的开发研究提供依据。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，采用紫外分光光度法，以荭草素为对照品，对荭草提取物中总黄酮进行含量测定,本研究以荭草素为对照品，采用紫外分光光度法对荭草提取物中总黄酮进行了含量测定究，以提高其质量控制水平，为荭草药材进一步的开发研究提供依据。【专利说明】
本专利技术涉及，属于生物医药检测
。
技术介绍
IE草为寥科植物IE草(P olygonumori ental eL )的干燥果穗及带叶茎枝，具有清热解毒，祛风除湿，活血止痛的功效，常用于治疗风湿性关节炎、冠心病、疝气等，是贵州少数民族用药，荭草中含有丰富的黄酮类成分，如荭草素、异荭草素、荭草苷、叶绿醌、牡荆素等，据文献报道，黄酮类化合物具有抗急性心肌缺血、抗衰老、抗肿瘤、增强机体免疫力、抑制高血压及止痛镇痛等多种药理活性，然而对荭草中总黄酮的含量测定却未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是:提供，:建立的分析方法操作简便、准确可靠，可作为荭草提取物的质量检测方法，以克服现有技术的不足。 本专利技术的技术方案，采用紫外分光光度法，以荭草素为对照品，对荭草提取物中总黄酮进行含量测定。 前述的一种IE草提取物中总黄酮含量测定方法中，建立紫外分光光度法测定IE草提取物中的总黄酮，荭草素对照品浓度在0.0033?0.0530g / L范围。 由于采用上述技术方案，与现有技术相比，目前对于荭草的研究主要是对其化学成分以及药理学的研究，荭草中含有丰富的黄酮类成分，黄酮类化合物具有抗急性心肌缺血、抗衰老等药理活性，目前对总黄酮的含量测定主要有比色法和紫外分光光度法，因紫外分光光度法对于本研究更为简便、快速、准确，因此，本研究以荭草素为对照品，采用紫外分光光度法对荭草提取物中总黄酮进行了含量测定究，以提高其质量控制水平，为荭草药材进一步的开发研究提供依据。 【专利附图】【附图说明】 附图1为荭草素对照品紫外光谱图；附图2为荭草提取物供试品紫外光谱图；附图3为回收率试验结果统计图；附图4为各批次荭草提取物中总黄酮含量测定结果统计图。 【具体实施方式】 下面结合附图对本专利技术作进一步的详细说明，但不作为对本专利技术的任何限制。 本专利技术的实施例: 1材料与方法 1.1 材料 1.1.1 仪器紫外分光光度计(日本岛津公司，U V 2 4 0 1 )，超声波清洗器(2 5 0 W，频率2 7?3 4 k Η ζ，北京医疗设备二厂)，A Ε 2 4 0电子天平(梅特勒一托利多仪器上海有限公司)，超纯水机(四川沃特尔科技发展有限公司)。 1.1.2 试药荭草素(贵州省药物制剂重点实验室提供，从荭草药材中提取分离制备所得，经理化分析和波谱鉴定，含量> 9 8 %)，试验用荭草提取物由贵州省药物制剂重点实验室提供，荭草药材由贵阳医学院药学院药用植物与生药学教研室龙庆德副教授鉴定为寥科植物荭草(Po 1 ygonumOr i en taleL )的干燥果穗及带叶莖枝，甲醇、乙醇、乙酸乙酯、盐酸、正丁醇均为分析纯。 1.2 方法1.2.1溶液的制备(1 )供试品溶液的制备:精密称取荭草提取物1 5mg，置1 0 OmL瓶中，加5 0 %甲醇溶液适量，超声处理5 m i η使完全溶解，加5 0 %甲醇溶液稀释至刻度；(2 )对照品储备液的制备:称取荭草素对照品5 3 Omg，置5 OmL瓶中，加5 0%甲醇溶液适量，超声处理5 m i η使完全溶解，加5 0 %甲醇溶液稀释至刻度。 1.2.2 检测波长以5 0 %甲醇溶液为参比，分别于紫外分光光度计上对荭草素对照品溶液和供试品溶液进行全扫描，荭草素对照品溶液最大吸收波长为3 5 2 n m，荭草提取物供试品溶液最大吸收波长为3 4 8 n m，二者紫外光谱和最大吸收波长基本一致，故确定荭草中总黄酮含量的测定波长为3 5 0 nm。 2 结果2.1方法学考察结果 2.1.1线性关系考察精密量取荭草素对照品溶液5 m L置1 0 m L量瓶中，加5 0 %甲醇溶液稀释到刻度，依次用5 0 %甲醇溶液等比稀释成浓度为0.0530、0.0 2 6 5 , 0.0132、0.0 0 6 6 , 0.0 0 3 3 g / L的对照品工作液，分别取对照品工作液，以5 0 %甲醇溶液为参比溶液，在3 5 0 n m波长处测定吸光度，以浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程为A= 0.0 2 3 3 3 C - 0.0 0 0 6 1 , r =0.9 9 9 9，结果表明荭草素对照品浓度在0.0033?0.0530g/L范围内与溶液的吸光度之间呈良好的线性关系。 2.1.2 精密度试验取同一浓度的荭草素对照品溶液(0.0 2 6 5 g / L)，按上述建立的紫外分光光度法连续测定6次吸光度值，结果6次测定值的R S D为0.2 5%,说明仪器精密度良好。 2.1.3 重复性试验取同一批号荭草提取物(批号为:H C— 6 8) 9份，分为3组，分别精密称取7.5、15.0及2 2.5 1118，每组3份，按“1.2.1 ”项下方法制备供试品溶液，分别测定吸光度值并计算含量，结果总黄酮平均含量为5 2.5 6 %，RSDSl.9%，说明此方法的重复性良好。 2.1.4 稳定性试验精密称取重复性试验项下荭草提取物1 5 m g，按“ 1.2.1 ”项下方法制备供试品溶液，按上述建立的紫外分光光度法，分别于Q、l、2、4、6、8、24 h测定吸光度值，结果供试品溶液中总黄酮含量的R S D为1.9 %，表明供试品溶液在2 4 h内稳定性良好。 2.1.5 回收率试验精密称取重复性试验项下荭草提取物9份，每份8 m g，分别精密加入荭草对照品溶液适量，按“1.2.1 ”项下方法制备供试品溶液，按上述建立的紫外分光光度法测定吸光度值并计算总黄酮的含量，结果表明:9份供试品加样回收率结果在9 8.1 %?10 4.6%之间，RSD为2.0 %，说明此方法具有良好的回收率，见附图3。 2.2 样品测定精密称取1 0批荭草提取物1 5 1118，按“1.2.1 ”项下方法制备供试品溶液，以5 0 %甲醇溶液为空白对照，按上述建立的紫外分光光度法测定吸光度值，分别计算供试品溶液中总黄酮含量，结果见附图4。 3 讨论目前对于荭草的研究主要是对其化学成分以及药理学的研究，荭草中含有丰富的黄酮类成分，黄酮类化合物具有抗急性心肌缺血、抗衰老等药理活性，目前对总黄酮的含量测定主要有比色法和紫外分光光度法，因紫外分光光度法对于本研究更为简便、快速、准确，因此，本研究以荭草素为对照品，采用紫外分光光度法对荭草提取物中总黄酮进行了含量测定研究，以提高其质量控制水平，为荭草药材进一步的开发研究提供依据。 本研究以5 0 %的甲醇溶液为提取溶剂，首次建立了采用紫外分光光度法测定荭草提取物中的总黄酮，平均加样回收率为101.3 %, R S D为2.0 %，总黄酮的平均含量为5 1.9 0 %，试验结果表明本法精密度良好，稳定可行，重复性较好，具有良好的回收率，因此本法可作为测定荭草提取物中总黄酮含量的检测方法；以5 0 %甲醇溶液为提取溶剂，于紫外分光光度计上对荭草素对照品溶液和供试品本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种荭草提取物中总黄酮含量测定方法，其特征在于：采用紫外分光光度法，以荭草素为对照品，对荭草提取物中总黄酮进行含量测定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：敖云霞，
申请(专利权)人：敖云霞，
类型：发明
国别省市：贵州;52