本发明专利技术公开了一种甘草总黄酮的含量测定方法，包括以下步骤：采用紫外可见分光光度计测定；柚皮苷对照品溶液的制备，取柚皮苷对照品10mg，精密称定，置10ml容量瓶中，用甲醇溶解，定容即得；甘草中药材样品液的制备，称取甘草中粉0.1g，精密称定，至100ml容量瓶中，加甲醇80ml超声处理90min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过即得；甘草酮提取物样品液的制备；确定检测波长；确定对照品溶液的显色时间；取甘草中药材5份，精密称定，以甲醇作为对照溶液，测定吸收度。该含量测定方法稳定，可靠，且操作简单。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中草药检测
，具体是指。
技术介绍
目前国内外学者对甘草的化学和药理作用进行了许多研究，主要有效成分有三萜 皂苷和黄酮类化合物。其中，黄酮类成分具有明显的抗溃疡、解痉、抗炎、降血脂、镇痛和雌 性激素样作用。近年来还发现甘草黄酮对艾滋病毒有很强的抑制增殖作用，对甘草黄酮的 研究应用已引起了人们的重视，甘草总黄酮主要以二氢黄酮类化合物为主。 由于目前测定甘草总黄酮含量的主要方法是采用碱性比色法，但是该方法不稳 定，操作复杂，影响因素较多，造成测定出来的含量结果不准确。 基于以上研究并设计了。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：提供，该含量测定方法稳定， 可靠，操作简单。 本专利技术通过下述技术方案实现：，包括以下步骤： 1)采用紫外可见分光光度计测定； 2) 制备柚皮苷对照品溶液，取柚皮苷对照品约10mg，精密称定，置IOml容量瓶中，用甲 醇溶解，定容即得； 3) 制备甘草中药材样品液，称取甘草中粉0. lg，精密称定，至100mL容量瓶中，加甲醇 80ml超声处理90min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过即得； 4) 制备甘草酮提取物样品液，取甘草酮提取物0. 10g，精密称定，至100mL量瓶中，加甲 醇80ml，超声处理90min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过即得； 5) 确定检测波长，分别取上述柚皮苷对照品溶液、甘草中药材样品液、甘草酮提取物样 品液各0. 05、1. 00、0. lml，置IOml容量瓶中，加入甲醇至lml，准确加入KOH溶液0. 5ml，甲 醇定容，摇勾，放置1小时，以甲醇为参比液，于200-600mm波长处扫描； 6) 确定对照品溶液的显色时间； 7) 取甘草中药材5份，精密称定，于50ml容量瓶中，分别加入柚皮苷对照品2. Omg，分 别加入加甲醇lml，准确加入KOH溶液0. 5ml，甲醇定容至10ml，放置，以甲醇作为对照溶液， 测定吸收度。 进一步地，为了更好的实现本专利技术，还包括以下技术特征，所述步骤（5)中甘草中 药材样品液、甘草酮提取物样品液与对照品溶液UV最大吸收为420- 430nm。 进一步地，为了更好的实现本专利技术，还包括以技术特征，所述步骤（5)中确定的检 测波长为422nm〇 进一步地，为了更好的实现本专利技术，还包括以下技术特征，所述步骤6)确定对照品 溶液的显色时间步骤为，精密量取柚皮苷对照品溶液〇. 〇2ml，置IOml容量瓶中，准确加入 KOH溶液0. 5ml，甲醇定容，摇匀，以甲醇作为空白对照，分别放置IO、20、30、40、50、60、90、 120、150、180min，测定吸收度。 进一步地，为了更好的实现本专利技术，还包括以下技术特征，所述对照品溶液显色时 间为lh。 具体实验方法为： 仪器与试剂FA2004N电子天平，生产厂家：上海精密科学科技有限公司；SB2200超声 波清洗器，生产厂家：上海科导超声仪器有限公司，DZF型真空干燥箱，生产厂家：上海精密 实验设备有限公司，Angilent (8453型紫外分光光度计），Buchi R-200型旋转蒸发器(瑞士 Buchi公司），柚皮苷对照品，生产厂家：中国药品生物制品检定所，甘草药材，生产厂家：上 海华宇药业有限公司。 实验步骤： 对照品溶液的制备取柚皮苷对照品l〇mg，精密称定，置IOml容量瓶中，用甲醇溶解， 定容即得。 供试品溶液的制备1)药材样品液的制备：取甘草中粉0. lg，精密称定，至100mL 容量瓶中，加甲醇80ml，超声处理90min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过滤即得；2)甘草黄 酮提取物样品液的制备取甘草黄酮提取物约〇. l〇g，精密成定，至100mL容量瓶中，加甲醇 80ml，超声处理90min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过即得。 确定检测波长分别取上述柚皮苷对照品溶液、甘草中药材溶液、甘草黄酮提取物 样品液各0. 05ml、l. 00ml、0. 10ml，置IOml容量瓶中，加入甲醇至lml，准确加入10%K0H溶 液0. 5ml，甲醇定容，摇匀，放置，以甲醇为参比液，于200- 600nm波长处扫描，紫外光谱图 如图1。结果表明，甘草中药材供试品溶液、甘草黄酮提取物样品液与对照品显色溶液UV最 大吸收为422nm〇 其中图1、图2、图3、图4中：A为空白对照，B为对照品溶液，C为甘草中药材甲醇 提取液，D为甘草黄酮提取物样品液。 确定显色时间准确量取对照品溶液0. 02ml，置IOml容量瓶中，加入甲醇至约 lml，准确加入10%K0H溶液0. 5ml，甲醇定容，摇匀，以甲醇作为空白对照，分别于10、20、30、 40、50、60、90、120、150、180min，在 422nm 处测定吸光度。 结果表明：显色溶液室温放置时间在50min后，吸光度趋于稳定，60 -ISOminRK 收值RSD为1. 01，确定显色时间为lh。 以下从线性关系、重现性、回收率验证含量测定方法的准确度； 测定线性关系 精密量取上述对照品溶液〇. 02，0. 04，0. 08，0. 12，0. 20ml，分别加甲醇至约Iml，准 确加入10%K0H溶液的0. 5ml，甲醇定容至10ml，放置lh，以甲醇为空白对照溶液，在波长 422nm处测吸收度，得线性回归方程c=258. 9A-1. 6864 (r=l，线性范围：2. 252- 22. 52ug/ ml) 〇 重现性试验 取6份甘草中粉，精密称定，每份取甘草中粉月0. lg，精密称定，至100mL容量瓶中， 加甲醇80ml，超声处理90min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过即得，准确量取甘草中药 材样品液1.0 ml，加10%K0H溶液0. 5ml，甲醇定容至IOml，放置lh，以甲醇为空白对照 溶液，在422nm处测定吸收度，以外标两点法计算含量，甘草中药材中总黄酮含量为4. O (RSD=2. 16)。 回收率试验 取甘草药材5份，精密称定，于50ml容量瓶中，分别加入柚皮苷对照品约2. Omg，分别加 甲醇lml，准确加入10%K0H溶液的0. 5ml，用甲醇定容，放置1小时，以甲醇作为空白对照溶 液，在波长422nm处测定吸收度。测定结果见下表通过以上验证实验可知，该方法测得的平均加样回收率98. 81%，RSD2. 00。 本专利技术当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种甘草总黄酮的含量测定方法，其特征在于，步骤如下：1) 采用紫外可见分光光度计测定；2) 制备柚皮苷对照品溶液，取柚皮苷对照品10mg，精密称定，置10ml容量瓶中，用甲醇溶解，定容即得；3) 制备甘草中药材样品液，称取甘草中粉0.1g，精密称定，至100ml 容量瓶中，加甲醇80ml超声处理90min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过即得；4) 制备甘草酮提取物样品液，取甘草酮提取物0.10g，精密称定，至100ml量瓶中，加甲醇80ml，超声处理90min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过即得；5) 确定检测波长，分别取上述柚皮苷对照品溶液、甘草中药材样品液、甘草酮提取物样品液各0.05、1.00、0.1ml，置10ml容量瓶中，加入甲醇至1ml，准确加入KOH溶液0.5ml，甲醇定容，摇匀，放置1小时，以甲醇为参比液，于200—600mm波长处扫描；6) 确定对照品溶液的显色时间；7) 取甘草中药材5份，精密称定，于50ml容量瓶中，分别加入柚皮苷对照品2.0mg，分别加入加甲醇1ml，准确加入KOH溶液0.5ml，甲醇定容至10ml，放置，以甲醇作为对照溶液，测定吸收度。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：周洁，
申请(专利权)人：成都易创思生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51
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