热稳定性增强的甲酸脱氢酶突变体及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种热稳定性增强的甲酸脱氢酶突变体及其制备方法，该突变体源于博伊丁假丝酵母(Candida boidinii)的野生型甲酸脱氢酶，能够催化辅酶NADH循环再生，与野生型甲酸脱氢酶相比表现出更高的热稳定性，具有I98V、V152I、A154D、D158R中的一个或多个突变特征。本发明专利技术的重组甲酸脱氢酶突变体具有更好的热稳定性，适用于较高温度下的NADH的循环再生，与目前发现的甲酸脱氢酶相比，本发明专利技术的甲酸脱氢酶突变体在50℃－55℃之间活性没有明显降低，具有更好的热稳定性，因此更适合于工业化应用。

【技术实现步骤摘要】
热稳定性增强的甲酸脱氢酶突变体及其制备方法
本专利技术涉及一种甲酸脱氢气酶突变体，特别涉及一种热稳定性增强的甲酸脱氢酶突变体及其制备方法。
技术介绍
氧化还原酶在制备手性醇、氨基酸及羟基酸等方面的应用越来越多。但在其催化的反应中，90％需要烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD，NADH)，或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP，NADPH)做为辅酶。因为在氧化还原酶的应用中，还需要低成本、高效的辅酶再生体系。甲酸脱氢酶(FormateDehydrogenase，FDH)是最成功的辅酶再生体系之一，已应用于工业生产中。其优势在于反应不可逆，并只产生一种副产物－二氧化碳，对酶的活性没有任何影响。Kula等在2002年因为发现这一体系而被授予德国未来奖。但目前发现的FDH热稳定性较差，在55℃－60℃之间迅速失活。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种与野生型甲酸脱氢酶相比热稳定性增强的甲酸脱氢酶突变体、编码序列及其制备方法。实现本专利技术目的的技术方案是：本专利技术提供一种甲酸脱氢酶突变体，其源于博伊丁假丝酵母(Candidaboidinii)的野生型甲酸脱氢酶，能够催化辅酶NADH循环再生。所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种热稳定性增强的甲酸脱氢酶突变体，其源于博伊丁假丝酵母的野生型甲酸脱氢酶，能够催化辅酶NADH循环再生，与野生型甲酸脱氢酶相比表现出更高的热稳定性，具有选自以下特征中的一个或多个突变：I98V、V152I、A154D、D158R。

【技术特征摘要】
1.一种热稳定性增强的甲酸脱氢酶突变体，其源于博伊丁假丝酵母的野生型甲酸脱氢酶，能够催化辅酶NADH循环再生，与野生型甲酸脱氢酶相比表现出更高的热稳定性，有以下四个突变：I98V、V152I、A154D、D158R，其序列为SEQIDNO.4。2.一种多核苷酸，其编码如权利要求1所述的甲酸脱氢酶突变体。3.根据权利要求2所述的多核苷酸，其特征在于：其序列为SEQIDNO.3。4.一种重组质粒，其包括表达载体连接权利要求3所述的多核苷酸，所述载体序列为SEQIDNO.5。5.一种宿主细胞，其包含权利要求4所述的重组质粒。6.根据权利要求5所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁雪峰，
申请(专利权)人：南京朗恩生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32