本发明专利技术公开了一种从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法，采用高效液相色谱法进行测定，流动相：甲醇，流速0.8-1.2ml/min；检测波长：204nm；柱温：25-35℃；检测时间：30min；进样量：10μl。本发明专利技术的从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法中，进样量与其峰面积积分值呈良好的线性关系，样品稳定性、仪器精密度、方法重现性以及方法专属性均符合要求，为以后角鲨烯快速、准确定量奠定了基础。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学分析
，尤其涉及一种从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法。
技术介绍
香露兜叶系露兜树科露兜属香露兜(Pandanus amaryllifolius Roxb)的新鲜叶片(别名：香兰叶、板兰香、斑兰叶等)。香露兜为常绿草本，叶长约30cm，宽约1.5cm，叶缘偶见微刺，叶尖刺稍密，叶背面先端有微刺，叶鞘有窄白膜，花果未见。原产地为印尼马古鲁群岛。研究发现，香露兜适应我国南部酸性赤红壤，但因受温度限制，仅适合在我国亚热带南缘至热带区域生长。角鳖烯是天然的链状三萜化合物，是重要的天然活性物质，主要的来源依然是深海鱼类，在植物中的分布也十分广泛，但含量不高。如在橄榄果实、棕榈果实的植物油中含量相对较高，而在其它植物油亦可检测到，但含量一般都很低。任竹君等采用水蒸气蒸馏(SD)法、尹桂豪等分简单地采用超临界CO2萃取(SFE-CO2)法进行提取，通过气相色谱质谱(GC-MS)联用分析法对香露兜叶挥发油化学成分研究，结果均鉴定出相对含量较高的角鲨烯，分别为21.03％、4.229％。Tan M.A.等在同科属植物露兜树(Pandanus tectorius Soland.var.laevis)叶中提取分离得到了角鲨烯化合物，并通过MABA试验表明其具有抗结核作用的生物活性。至今为止，对香露兜挥发性成分系统地分析报道也甚少。因此非常有必要对香露兜挥发性成分进行深入地提取分离、系统地定性定量分析，为进一步开发香露兜叶更广的应用价值提供了一定的实验依据。
技术实现思路
本专利技术提供了一种从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法。本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法采用高效液相色谱法进行测定，流动相：甲醇，流速0.8-1.2ml/min；检测波长：204nm；柱温：25-35℃；检测时间：30min；进样量：10μl。流动相的流速优选为1.0ml/min。柱温优选：30℃。本专利技术的积极效果如下：本专利技术的从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法中，进样量与其峰面积积分值呈良好的线性关系，样品稳定性、仪器精密度、方法重现性以及方法专属性均符合要求，为以后角鲨烯快速、准确定量奠定了基础。附图说明图1是角鲨烯对照品溶液光谱图。图2是角鲨烯供试品溶液光谱图。图3是香露兜超临界提取物供试品色谱图。图4是角鲨烯对照品色谱图。图5是空白对照色谱图。图6是角鲨烯标准曲线图。具体实施方式下面的实施例是对本专利技术的进一步详细描述。实施例11仪器与材料1.1仪器DIONEX3000型高效液相色谱(HPLC)仪，DAD检测器、Chromeleon色谱工作站(美国戴安公司)；AL104型电子天平(梅特勒-托利多上海仪器有限公司)；XS205DualRange型电子天平(梅特勒-托利多上海仪器有限公司)；HN-1006型超声波清洗机(广州市华南超声设备有限公司)；HK-08B型流水式中药粉碎机(广州市旭朗机械设备有限公司)；国家标准检验筛(浙江飞达金属砂筛厂)1.2材料甲醇(HPLC级,Merck有限公司)；角鲨烯对照品(140721-200601，中国食品药品检定研究院供鉴别与含量测定，含量99.5％)；CO2(食品级，纯度>99.95％，购自佛山市顺德区佛伦气体有限公司)；香露兜叶(批号：20130114B，2013年1月购于海南省万宁市兴隆华侨农场，经鉴定为香露兜(Pandanus amaryllfoliu Roxb)的新鲜叶。2方法与结果2.1对照品溶液制备取角鲨烯对照品约0.01g，精密称定，加甲醇溶解，并定容至5ml棕色量瓶中，作为角鲨烯对照品贮备液。精密移取角鲨烯对照品贮备液3ml，置25ml棕色量瓶中，加入甲醇稀释至刻度，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为角鲨烯对照品溶液。2.2供试品溶液制备取香露兜超临界CO2萃取物约0.02g，精密称定，加甲醇超声使溶解，并定容至25ml棕色量瓶中，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品溶液。2.3检测波长的选择角鲨烯对照品的紫外波长图谱显示角鲨烯最大吸收波长为203.9nm，香露兜挥发性成分中角鲨烯的紫外波长图谱与对照品基本相符，最大吸收波长为204.6nm。认为在该色谱条件下角鲨烯的最大吸收波长为204nm。如图1、2所示。2.4流动相的选择角鲨烯为不饱和的烯烃化合物，采用反相色谱检测超临界CO2萃取的香露兜性成分中角鲨烯含量，据文献报道，角鲨烯成分分离采用甲醇：乙腈(60:40)、甲醇：乙腈(40:60)、甲醇：水(99:1)等流动相；调整流动相比例，得出在甲醇时有较好的分离效果，对照品保留时间为18.040min，样品保留时间为18.047min，两者保留时间基本一致。色谱图如图3所示。2.5柱温选择实验就柱温进行考察，以选择合适的柱子温度。考察的温度有25℃，30℃，35℃。经过实验表明，随着柱温升高，保留时间缩短，保留时间分别为20.07min、18.12min、16.47min。在25℃～35℃范围内，色谱峰的分离度良好，柱温对角鲨烯的分析并无显著影响，如表1。综合考虑，选择30℃为适宜温度。表1 柱温对角鲨烯峰面积的影响2.6流速选择实验就流速进行考察，按2.2项方法制备供试品溶液，在选定的检测波长、流动性组成和比例，检测时间、进样体积一定的色谱条件下，分别以0.8ml/min、1.0ml/min、1.2ml/min的流速进行测定。结果显示，保留时间随着流速的加快而缩短，保留时间分别为22.68min、18.14min、15.12min，流速为0.8ml/min时，色谱峰较明显地展宽，流速为1.2min/ml时，影响色谱峰的分离度，综合考虑，本实验采用1.0min/ml的流速。2.7分析条件色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C18(4.6mm×150mm，5μm),柱温：30℃。流动相：甲醇，流速1.0ml/min；检测波长：204nm；检测时间：30min；进样量：10μl。2.8方法学考察2.8.1专属性试验分别精密吸取对照品溶液、香露兜供试品溶液和阴性对照溶液(本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法进行测定，流动相：甲醇，流速0.8‑1.2ml/min；检测波长：204nm；柱温：25‑35℃；检测时间：30min；进样量：10μl。
【技术特征摘要】
1.一种从香露兜挥发性成分中测定角鲨烯含量的方法，其特征在于：采用高效
液相色谱法进行测定，流动相：甲醇，流速0.8-1.2ml/min；检测波长：204nm；
柱温：25-35℃...
【专利技术属性】
技术研发人员：马晋芳，陈小凯，葛发欢，史庆龙，张湘东，
申请(专利权)人：广州中大南沙科技创新产业园有限公司，中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。