一种藏药材裂叶独活挥发性成分的测定方法技术

本发明专利技术提供一种藏药材裂叶独活挥发性成分的快速测定方法，采用顶空‑气相‑质谱对裂叶独活根、茎、叶、花的粉末样品挥发性成分进行分析。主要包括：1)样品粉碎；2)顶空进样，无溶剂平衡后，顶空空气定量取样、进样；3)GC‑MS系统分离检测获得GC‑MS数据和4)根据GC‑MS数据处理分析，经NIST11.L质谱数据系统检索，确定挥发性成分。该方法效果为药材粉碎，操作简便，顶空条件无溶剂，避免挥发性成分溶解度不同造成检测信息失真；顶空进样快速、自动化程度高，提高了定性分析的效率和准确性，结果可靠，结合谱库检索，快速确认挥发性成分；裂叶独活中的挥发性成分的确定，对研究其药效物质基础、质量控制、现代藏药的开发等具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药材检测技术，特别涉及一种顶空-气相-质谱(HS-GC-MS)联用技术测定藏药材裂叶独活挥发性成分的方法。
技术介绍
裂叶独活HeracleummillefoliumDiels为伞形科(Umbelliferae)独活属，又名藏当归、千叶独活，产于我国西藏、青海、甘肃、四川、云南，属于高海拔药材。裂叶独活传承了藏药效果快、药力强、纯净、天然、无污染的特点，以干燥全草入药，味苦、辛，性平，消散肿胀、破除癥结痞块。藏药材裂叶独活化学成分研究报道较少。目前，仅饶高雄等人报道(饶高雄，溥发鼎，孙汉董.裂叶独活和长裂叶独活的化学成分及其分类学意义[J].天然产物研究与开发.1995,6:16-18)从裂叶独活根的乙醇提取物中分离鉴定了11个化学成分，其中香豆素类成分有4个。至今，也未见有关于裂叶独活挥发性成分的研究。挥发性成分是植物体内新陈代谢过程中所产生的次生代谢产物，因其有药理作用，广泛应用于临床与医疗保健，也可以将挥发性成分应用于研究植物生态学及植物生理活动规律，因此，对于植物挥发性成分的研究目前是一个热门课题。挥发性成分的分析方法有液液萃取后直接进样HPLC或GC法，然而其提取纯化操作繁琐复杂，且在敞开体系中挥发性成分易损失，造成样品信息失真。顶空富集法已成为现代挥发性成分的样品前处理方法的主要研究热点，但传统的顶空溶剂水由于其对样品中成分的溶解性不同，亦会造成样品信息失真。
技术实现思路
本专利技术采集西藏产药材裂叶独活，为解决上述问题，提供一种藏药材裂叶独活挥发性成分的测定方法，该方法采用顶空-GC-MS联用方法定性测定裂叶独活的根、茎、叶或花中挥发性成分及其相对含量。为实现上述目的，本专利技术通过以下技术方案来实现：一种藏药材裂叶独活挥发性成分的测定方法，包括以下步骤：1)样品粉碎：取裂叶独活需测定部位，粉碎成药材粉末；2)顶空进样：将上述药材粉末，直接放入顶空瓶并密封置于样品盘。样品瓶加热平衡后，通过定量环取样品瓶顶部空间气体进样入GC-MS系统；3)GC-MS系统分离检测：经气相色谱分离并进入质谱检测得到GC-MS数据；4)挥发性成分分析。药材粉末无溶剂顶空富集与传统的顶空溶剂水相比，避免了由于样品中挥发性成分在溶剂中溶解性的不同所造成的样品信息失真。其中：步骤1)所述药材粉末经过200-400目筛。步骤2)所述顶空进样中样品瓶加热平衡条件：样品瓶加热温度为60-200℃，平衡时间为10-120min；定量环取样条件：定量环温度80-180℃，传输线温度100-180℃。步骤3)所述GC-MS系统分离检测的条件：气相色谱条件：HP-5毛细管柱型弹性色谱柱；载气：高纯氦气，纯度≥99.999％；高纯氮气，纯度≥99.999％；柱流量1.0ml·min-1；分流进样，分流比10:1，进样口温度为200-300℃；溶剂延时为3.5min。程序升温条件：初始温度为50℃，保持2min；以2℃·min-1的速度升温至100℃，保持3min；再以4℃·min-1的速度升温至220℃，保持3min。质谱条件：EI离子源，电子能量70eV；离子源温度230℃；传输线温度为280℃；四级杆温度为150℃；全扫描模式；扫描范围：m/z50～500。步骤4)所述挥发性成分分析：GC-MS数据采用气相色谱数据处理系统，以峰面积归一化法测定其中各组分相对百分含量；并对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得到质谱图，经过NIST11.L质谱数据系统检索，确定挥发性成分。优选地，样品瓶加热温度为100℃，平衡时间为40min。优选地，定量环温度120℃，传输线温度140℃。优选地，进样口温度为260℃。优选地，药粉粉末经200目筛后，直接放入顶空瓶并密封置于样品盘。样品瓶加热温度为100℃，平衡时间为40min；定量环取样条件：定量环温度120℃，传输线温度140℃。分流进样，分流比10:1，进样口温度为260℃。本专利技术提供了一种使用HS-GC-MS联用测定藏药裂叶独活挥发性成分的方法，该方法的有益效果在于：1)顶空进样的药材仅需进行粉碎处理，操作简便，且顶空进样条件中无需加入溶剂水等其他溶剂，避免样品中挥发性成分溶解度不同造成检测信息失真。2)该检测方法快速、自动化程度高，提高了定性分析的效率和准确性，结果可靠，结合谱库检索，能快速确认挥发性成分。3)该检测方法确定裂叶独活中的挥发性成分，对研究其药效物质基础、质量控制、现代藏药的开发等具有重要意义。4)该方法可广泛应用于其他中药样品挥发性成分的定性分析。附图说明图1是实施例1中裂叶独活根挥发性成分GC-MS总离子流图；图2是实施例2中裂叶独活茎挥发性成分GC-MS总离子流图；图3是实施例3中裂叶独活叶挥发性成分GC-MS总离子流图；图4是实施例4中裂叶独活花挥发性成分GC-MS总离子流图。具体实施方式为更好地解释本专利技术，下面结合附图对本专利技术的实施例进行详细说明。本专利技术所用裂叶独活：裂叶独活药材于西藏山南地区贡嘎县岗堆镇实地采集，由江西中医药大学药学院国家级教学团队带头人龚千峰教授鉴定为裂叶独活。本专利技术所用试剂：高纯氦气，纯度≥99.999％；高纯氮气，纯度≥99.999％。本专利技术所用仪器：Agilent7697A自动顶空进样器(安捷伦公司，美国)；7890A型气相色谱仪(安捷伦公司，美国)；5975C单四极杆质谱仪(安捷伦公司，美国)；天平：万分之一天平(SartoriusBT224S)。实施例1藏药材裂叶独活根中挥发性成分的测定方法，包括以下步骤：1)样品粉碎：取裂叶独活的根，粉碎成药材粉末(过200目筛)；2)顶空进样：称取上述药材粉末0.2000g，直接放入20ml顶空瓶并密封置于样品盘。样品瓶加热温度为100℃，平衡时间为40min；取样品瓶顶部空间气体1mL进样入GC-MS系统，定量环温度120℃，传输线温度140℃；3)GC-MS系统分离检测：经气相色谱分离并进入质谱检测。其中，气相色谱条件：HP-5毛细管柱型弹性色谱柱(0.25μm×250μm×30m)；载气：高纯氦气，高纯氮气；柱流量1.0ml·min-1；采用分流进样，分流比10∶1；进样口温度为260℃；溶剂延时为3.5min。程序升温条件：初始温度为50℃(保持2min)，以2℃·min-1的速度升温至100℃(保持3min)，再以4℃·min-1的速度升温至220℃(保持3min)；质谱条件：EI离子源，电子能量70eV；离子源温度230℃；传输线温度为280℃；四级杆温度为150℃；全扫描模式；扫描范围：m/z50～500；4)挥发性成分分析：GC-MS数据采用气相色谱数据处理系统，以峰面积归一化法测定其中各组分相对百分含量；并对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得到质谱图，经过NIST11.L质谱数据系统检索，确定挥发性成分。裂叶独活根挥发性成分的总离子流图分别见图1。结果显示，裂叶独活根挥发性成分共分出34种物质，7种物质含量超过5％，其中辛醛17.177％，己醛15.979％，庚醛11.118％，邻异丙基甲苯8.478％，2-戊基呋喃7.332％，1-甲基-4-(1-甲基乙基)-1,4-环己二烯(γ-松油烯)5.559％，异松油烯5.391％，占挥发性成分的70％以上。实施例2藏药本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种藏药材裂叶独活挥发性成分的测定方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：1)样品粉碎：取裂叶独活需测定部位，粉碎成药材粉末；2)顶空进样：将上述药材粉末，直接放入顶空瓶并密封置于样品盘。样品瓶加热平衡后，通过定量环取样品瓶顶部空间气体进样入GC‑MS系统；3)GC‑MS系统分离检测：经气相色谱分离并进入质谱检测得到GC‑MS数据。4)挥发性成分分析。

【技术特征摘要】
1.一种藏药材裂叶独活挥发性成分的测定方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：1)样品粉碎：取裂叶独活需测定部位，粉碎成药材粉末；2)顶空进样：将上述药材粉末，直接放入顶空瓶并密封置于样品盘。样品瓶加热平衡后，通过定量环取样品瓶顶部空间气体进样入GC-MS系统；3)GC-MS系统分离检测：经气相色谱分离并进入质谱检测得到GC-MS数据。4)挥发性成分分析。2.如权利要求1所述的一种藏药材裂叶独活挥发性成分的测定方法，其特征在于：步骤1)所述药材粉末经过200-400目筛。3.如权利要求1所述的一种藏药材裂叶独活挥发性成分的测定方法，其特征在于：步骤2)所述顶空进样中样品瓶加热平衡条件：样品瓶加热温度为60-200℃，平衡时间为10-120min；定量环取样条件：定量环温度80-180℃，传输线温度100-180℃。4.如权利要求3所述的一种藏药材裂叶独活挥发性成分的测定方法，其特征在于：所述样品瓶加热平衡条件：样品瓶加热温度为100℃，平衡时间为40min。5.如权利要求3所述的一种藏药材裂叶独活挥发性成分的测定方法，其特征在于：所述定量环取样条件：定量环温度120℃，传输线温度140℃。6.如权利要求1所述的一种藏药材裂叶独活挥发性成分的测定方法，其特征在于：步骤3)所述GC-MS系统分...

【专利技术属性】
技术研发人员：顿珠次仁，严志宏，
申请(专利权)人：西藏藏医学院，
类型：发明
国别省市：西藏;54