一种灰兜巴挥发性成分的提取方法技术

本申请公开了一种灰兜巴挥发性成分的提取方法，将灰兜巴剪碎后置于研钵中，加入液氮并对灰兜巴进行研磨，得到灰兜巴粉末；向灰兜巴粉末中加入正己烷，放入恒温冷冻摇床中进行提取，然后过滤，分别得到滤液和滤渣；向滤渣中加入正己烷于恒温冷冻摇床中浸提，浸提完成后再对提取物进行过滤，得到二次滤液；将滤液和二次滤液合并后置于旋转蒸发仪上减压蒸馏回收正己烷，得到灰兜巴挥发性成分。本发明专利技术低毒高效，避免对受热不稳定成分的影响，粉碎效率高；制备得到的灰兜巴挥发性成分可与人胰岛素有关的蛋白质对接，能降低血糖浓度，增加细胞对单糖、氨基酸和脂肪酸的通透性。还能加速肝脏中的糖酵解，戊糖磷酸循环和糖原合成。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及一种挥发性成分的提取方法，具体地说，涉及一种灰兜巴挥发性成分的提取方法。
技术介绍
灰兜巴又名闭口袋、灰蔸巴，其外观形似一个布口袋，上端开口处附于老茶树的树干上，而下端藏于洞穴之中，主要产于四川省峨眉山市。有人认为灰兜巴是老茶树底下生长的一种菌科植物，但也有人认为灰兜巴是老茶树底下的一种红蜘蛛所分泌的蜘蛛丝。灰兜巴常混有红色或黄色的泥土，其颜色也有相应区别，主要是偏绿色或偏黄色，以灰黄色的品质最佳。灰兜巴主要有益气健脾，滋补肾阴，消除和缓解糖尿病症状，平衡机体阴阳，调和气血，纠正代谢紊乱等多种功效，作为一种偏方药长期在民间使用，主要用于治疗Ⅱ型糖尿病，被誉作治疗糖尿病的优良偏方，是峨眉山地区千年来世代相传的药物，拥有“仙山灵药”、“糖尿病克星”、“天然纯绿色的大自然珍宝”等多种美誉。灰兜巴对糖尿病长期的临床疗效以及部分实验研究表明了灰兜巴具有良好的降糖效果。已有研究表明灰兜巴的提取液、含有灰兜巴的复方制剂等具有降血糖以及清除体外自由基等作用，其作用机理可能是通过增强糖尿病患者的抗氧化能力和免疫力，防止发生脂质过氧化以及减缓肾功能衰竭等途径实现的降糖作用。许多研究者对灰兜巴降血糖作用的具体药理活性成分进行了初步探索，包括采用系统预试法，对灰兜巴不同提取液所含化学成分进行定性检验，初步推断灰兜巴可能含有的有机物成分种类；研究灰兜巴所含有的化学成分种类与其周边的茶树所含有的化学成分的区别；对灰兜巴多糖的降糖作用机理以及对灰兜巴多糖含量的测定和优化多糖提取工艺的研究；灰兜巴蛋白质的研究以及其微量金属元素含量的分析测定等。但目前未见关于灰兜巴挥发性成分的研究报道。目前对于灰兜巴挥发性成分的提取方法未见报道。挥发油提取的主要方法为水蒸气蒸馏法，但该方法需要加热提取，会对一些挥发性成分造成损失，不利于反应灰兜巴挥发油的全部组成。
技术实现思路
有鉴于此，本申请针对上述存在的问题，提供了一种灰兜巴挥发性成分的提取方法。为了解决上述技术问题，本申请公开了一种灰兜巴挥发性成分的提取方法，具体按照以下步骤实施：步骤1，将灰兜巴剪碎后置于研钵中，加入液氮并对灰兜巴进行研磨，得到灰兜巴粉末；步骤2，向步骤1得到的灰兜巴粉末中加入正己烷，放入恒温冷冻摇床中进行提取，然后过滤，分别得到滤液和滤渣；步骤3，向步骤2得到的滤渣中加入正己烷，于恒温冷冻摇床中浸提，浸提完成后再对提取物进行过滤，得到二次滤液；步骤4，将步骤2得到的滤液和步骤3得到的二次滤液合并后置于旋转蒸发仪上减压蒸馏回收正己烷，得到灰兜巴挥发性成分。进一步地，步骤2中提取时恒温冷冻摇床的温度为30～35℃，振荡时间为30～40min，振荡完成后静置2～3h。进一步地，步骤3中浸提时间为30～40min。进一步地，步骤4中旋转蒸发仪的温度为35～40℃。与现有技术相比，本申请可以获得包括以下技术效果：1)本专利技术正己烷低毒高效，有利于劳动保护。2)本专利技术采用了低温提取浓缩工艺，避免对受热不稳定成分的影响。3)本专利技术采用摇床振荡提取，提高提取效率。4)本专利技术液氮研末，避免粉碎受热对成分的影响，且粉碎效率高。当然，实施本申请的任一产品必不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。附图说明此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本专利技术的一部分，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中：图1是本专利技术高海拔灰兜巴挥发油的总离子流色谱图；图2是本专利技术低海拔灰兜巴挥发油的总离子流色谱图；图3是本专利技术ferruginol，α-patchoulene，vitaminAaldehyde，phytol和α-copaen与蛋白质对接图；其中，A.Ferruginol；B.α-patchoulene；C.VitaminAaldehyde；D.phytol；E.α-copaene。具体实施方式以下将配合实施例来详细说明本申请的实施方式，藉此对本申请如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。本专利技术公开了一种灰兜巴挥发性成分的提取方法，具体按照以下步骤实施：步骤1，将灰兜巴剪碎后置于研钵中，加入液氮并对灰兜巴进行研磨，得到灰兜巴粉末；步骤2，向步骤1得到的灰兜巴粉末中加入正己烷，放入恒温冷冻摇床中进行提取，在30～35℃条件下振荡时间为30～40min，振荡完成后静置2～3h，然后过滤，分别得到滤液和滤渣；步骤3，向步骤2得到的滤渣中加入正己烷，于恒温冷冻摇床中浸提30～40min，浸提完成后再对提取物进行过滤，得到二次滤液；步骤4，将步骤2得到的滤液和步骤3得到的二次滤液合并后置于旋转蒸发仪上以35～40℃条件减压蒸馏回收正己烷，得到灰兜巴挥发性成分。实施例1称取灰兜巴样品各100g，用剪刀剪碎后置于研钵中。加入适量的液氮于研钵中并对样品及时进行研磨。待药材磨为粉末后分别置于1000mL的锥形瓶中，做好标记，各加入500mL正己烷，放入磁石，将锥形瓶放入恒温冷冻摇床中进行提取，以30℃的条件振荡30min，振荡完成后静置2h。用滤纸对提取物进行过滤，取滤液。并对滤渣进行第二次提取，向滤渣中各加入500mL正己烷，于恒温冷冻摇床中浸提30min，浸提完成后再对提取物进行过滤，合并2次滤液于圆底烧瓶中。将滤液置于旋转蒸发仪上以35℃的条件减压蒸馏回收正己烷得到浓缩的样品提取液。最后分别转移浓缩液于密闭试剂瓶中，将样品提取液置于4℃的冰箱中冷藏备用。实施例2一种灰兜巴挥发性成分的提取方法，具体按照以下步骤实施：将灰兜巴剪碎后置于研钵中，加入液氮并对灰兜巴进行研磨，得到灰兜巴粉末；向得到的灰兜巴粉末中加入正己烷，放入恒温冷冻摇床中进行提取，在35℃条件下振荡时间为40min，振荡完成后静置3h，然后过滤，分别得到滤液和滤渣；向得到的滤渣中加入正己烷，于恒温冷冻摇床中浸提40min，浸提完成后再对提取物进行过滤，得到二次滤液；将得到的滤液和得到的二次滤液合并后置于旋转蒸发仪上以40℃条件减压蒸馏回收正己烷，得到灰兜巴挥发性成分。实施例3一种灰兜巴挥发性成分的提取方法，具体按照以下步骤实施：将灰兜巴剪碎后置于研钵中，加入液氮并对灰兜巴进行研磨，得到灰兜巴粉末；向得到的灰兜巴粉末中加入正己烷，放入恒温冷冻摇床中进行提取，在32℃条件下振荡时间为35min，振荡完成后静置2.5h，然后过滤，分别得到滤液和滤渣；向得到的滤渣中加入正己烷，于恒温冷冻摇床中浸提35min，浸提完成后再对提取物进行过滤，得到二次滤液；将得到的滤液和得到的二次滤液合并后置于旋转蒸发仪上以38℃条件减压蒸馏回收正己烷，得到灰兜巴挥发性成分。下面结合具体的实验过程来说明本专利技术的技术效果：1实验材料与方法1.1实验材料1.1.1实验药材购买自四川峨眉山市的灰兜巴，根据灰兜巴生长的海拔高度不同，将其分为高海拔样品(海拔2500m以上)和低海拔样品(海拔1000-2500m)。1.1.2主要实验试剂正己烷(分析纯)、液氮、蒸馏水等。1.1.3实验仪器6890/5973型GC-MS联用仪(Agilent)、旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)、MaxQ481HP落地式恒温冷冻摇床(ThermoScientific)、电子天平(上海梅特勒-托利多仪器有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种灰兜巴挥发性成分的提取方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：步骤1，将灰兜巴剪碎后置于研钵中，加入液氮并对灰兜巴进行研磨，得到灰兜巴粉末；步骤2，向步骤1得到的灰兜巴粉末中加入正己烷，放入恒温冷冻摇床中进行提取，然后过滤，分别得到滤液和滤渣；步骤3，向步骤2得到的滤渣中加入正己烷，于恒温冷冻摇床中浸提，浸提完成后再对提取物进行过滤，得到二次滤液；步骤4，将步骤2得到的滤液和步骤3得到的二次滤液合并后置于旋转蒸发仪上减压蒸馏回收正己烷，得到灰兜巴挥发性成分。

【技术特征摘要】
1.一种灰兜巴挥发性成分的提取方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：步骤1，将灰兜巴剪碎后置于研钵中，加入液氮并对灰兜巴进行研磨，得到灰兜巴粉末；步骤2，向步骤1得到的灰兜巴粉末中加入正己烷，放入恒温冷冻摇床中进行提取，然后过滤，分别得到滤液和滤渣；步骤3，向步骤2得到的滤渣中加入正己烷，于恒温冷冻摇床中浸提，浸提完成后再对提取物进行过滤，得到二次滤液；步骤4，将步骤2得到的滤液和步骤3得到的二次滤液合并后置于...

【专利技术属性】
技术研发人员：李丽霞，王强，殷中琼，邹元锋，舒刚，付婷婷，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：四川;51