基于木糖苷酶的工程菌及其实现方法技术

一种基因工程领域的木糖苷酶的工程菌，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点和聚组氨酸标签的引物进行PCR扩增得到编码木糖苷酶的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体，再将获得的连接产物转入大肠杆菌表达菌株内，获得木糖苷酶过表达重组菌株。本发明专利技术针对现有技术存在的由于木糖苷酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足，应用基因工程手段实现其体外的大量表达合成，此外本发明专利技术通过在表达重组蛋白C端添加聚组氨酸标签的方法，提高蛋白活性的同时也保证了纯化后木糖苷酶的纯度；此外，本发明专利技术通过载体信号肽实现了目的蛋白的周质空间表达，提高了木糖苷酶的活性。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种木糖苷酶的工程菌，其特征在于，该工程菌为外源表达木糖苷酶的大肠杆菌； 所述的胞内木糖苷酶具体为灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)JSD‐1木糖苷酶编码基因，即木糖苷酶SG‐XO的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，该核苷酸序列为1518bp，共编码505个氨基酸，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周培，冯海玮，孙玉静，支月娥，罗艳青，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海;31