一种复合芽孢菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种复合芽孢菌剂及其制备方法和应用。本发明专利技术保护甲基营养化芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)LPL-117。本发明专利技术还保护一种复合菌剂，包括甲基营养化芽孢杆菌LPL-117、解淀粉芽孢杆菌LPL-K13、解淀粉芽孢杆菌LPL-K103、蜡状芽孢杆菌LPL-NKY和胶冻样类芽孢杆菌LPL-HYZ。本发明专利技术还保护所述复合菌剂在促进植物生长和/或抑制植物病原菌和/或防治植物发生植物病原菌侵染引起的相关疾病中的应用。本发明专利技术对于植物病原菌引起的相关疾病的防治具有重大价值，对于植物的栽培，特别是经济植物的栽培具有重大应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种复合芽孢菌剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种复合芽孢菌剂及其制备方法和应用。
技术介绍
长期以来我国农业增产主要依靠大量化学肥料和农药的投入，不合理施用化肥和农药引起的农业生态环境问题日渐严重。近些年,随着人们保护环境意识的增强及对无公害农产品的日益重视,新技术、新产品研发不断深入,探寻新的生物肥源和生物防治以替代或部分替代化肥和农药的研究倍受关注。芽孢杆菌是土壤和植物微生态区系的优势生物种群，因其能够产生耐热、耐旱、抗紫外线和有机溶剂的芽孢，加之易制成粉剂，便于贮藏运输，利于实现大规模生产，所以是理想的植物促生菌筛选对象。芽孢杆菌通过成功定殖至植物根际体表或体内与病原菌竞争植物周围的营养、分泌抗菌物质以抑制病原菌生长、同时诱导植物防御系统抵御病原菌入侵，从而达到生防的目的。目前，利用单一微生物防治植物病害和促进植物生长的报道较多，但是单一菌株作用机制单一，受环境影响较大。通过促生菌复配可实现多菌株间的优势互补与协同作用，增强其在自然环境中的适应性、竞争力及存活率，充分发挥其促生和生防效果，但目前针对多功能复合芽孢菌剂的研究较少。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种复合芽孢菌剂及其制备方法和应用。本专利技术保护甲基营养化芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117。甲基营养化芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117已于2013年6月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCCNO.7749。甲基营养化芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117简称甲基营养化芽孢杆菌LPL-117。本专利技术还保护一种复合菌剂，包括甲基营养化芽孢杆菌LPL-117、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)LPL-NKY和胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ。所述复合菌剂中，以上各个菌株可以独立包装，也可以混合包装。解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13已于2013年6月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCCNO.7748。解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13简称解淀粉芽孢杆菌LPL-K13。解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103已于2013年6月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCCNO.7747。解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103简称解淀粉芽孢杆菌LPL-K103。蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)LPL-NKY已于2013年6月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCCNO.7761。蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)LPL-NKY简称蜡状芽孢杆菌LPL-NKY。胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ已于2013年6月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCCNO.7750。胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ简称胶冻样类芽孢杆菌LPL-HYZ。所述复合菌剂中，甲基营养化芽孢杆菌LPL-117、解淀粉芽孢杆菌LPL-K13、解淀粉芽孢杆菌LPL-K103、蜡状芽孢杆菌LPL-NKY和胶冻样类芽孢杆菌LPL-HYZ的配比具体为3.2×1010cfu：2.4×1010cfu：1.8×1010cfu：7.8×1010cfu：1.3×1010cfu。所述复合菌剂中，甲基营养化芽孢杆菌LPL-117、解淀粉芽孢杆菌LPL-K13、解淀粉芽孢杆菌LPL-K103、蜡状芽孢杆菌LPL-NKY和胶冻样类芽孢杆菌LPL-HYZ的配比具体为4.1×1010cfu：3.7×1010cfu：2.9×1010cfu：5.8×1010cfu：1.0×1010cfu。本专利技术还保护所述复合菌剂在促进植物生长和/或抑制植物病原菌和/或防治植物发生植物病原菌侵染引起的相关疾病中的应用。所述植物可为黄瓜或番茄，具体可为黄瓜中农6号或番茄中杂9号。所述植物病原菌可为立枯丝核菌、尖孢镰刀菌或辣椒疫霉。所述植物病原菌具体可为立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)：ACCC36124。尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)：ACCC37438。辣椒疫霉(Phytophthoracapsisi)：ACCC37300。本专利技术还保护甲基营养化芽孢杆菌LPL-117、解淀粉芽孢杆菌LPL-K13、解淀粉芽孢杆菌LPL-K103、蜡状芽孢杆菌LPL-NKY和胶冻样类芽孢杆菌LPL-HYZ在制备复合菌剂中的应用。所述复合菌剂的用途为促进植物生长和/或抑制植物病原菌和/或防治植物发生植物病原菌侵染引起的相关疾病。所述植物可为黄瓜或番茄，具体可为黄瓜中农6号或番茄中杂9号。所述植物病原菌可为立枯丝核菌、尖孢镰刀菌或辣椒疫霉。所述植物病原菌具体可为立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)：ACCC36124。尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)：ACCC37438。辣椒疫霉(Phytophthoracapsisi)：ACCC37300。本专利技术还保护一种复合芽孢杆菌菌肥，其制备方法包括如下步骤：(1)将甲基营养化芽孢杆菌LPL-117、解淀粉芽孢杆菌LPL-K13、解淀粉芽孢杆菌LPL-K103、蜡状芽孢杆菌LPL-NKY和胶冻样类芽孢杆菌LPL-HYZ分别进行如下操作：①将菌接种至培养基甲，使发酵体系中的初始菌浓度为107cfu/mL，30℃、通气保压0.05MPa、160rpm振荡培养36h；②完成步骤①后，取整个体系，按10％体积比的接种量转接至培养基乙，混匀后30℃静置培养5天，然后风干至含水量为10％以下(具体可为8％)，粉碎，得到各个固态发酵物；所述培养基甲(pH6.5-7.0)的组成如下：2％质量比的蔗糖、2％质量比的酵母浸膏、1.5％质量比的牛肉浸膏、0.06％质量比的MgSO4·7H2O、0.0009％质量比的FeSO4·7H2O，余量为水；所述培养基乙(自然pH，含水量为40％)的组成如下：40％质量比的米糠、30％本文档来自技高网...

【技术保护点】
甲基营养化芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)LPL‑117，其保藏编号为CGMCC NO.7749。

【技术特征摘要】
1.甲基营养化芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117，其保藏编号为CGMCCNO.7749。2.一种复合菌剂，包括甲基营养化芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)LPL-NKY和胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ；所述甲基营养化芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117的保藏编号为CGMCCNO.7749；所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13的保藏编号为CGMCCNO.7748；所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103的保藏编号为CGMCCNO.7747；所述蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)LPL-NKY的保藏编号为CGMCCNO.7761；所述胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ的保藏编号为CGMCCNO.7750。3.权利要求2所述复合菌剂在促进植物生长和/或抑制植物病原菌和/或防治植物发生植物病原菌侵染引起的相关疾病中的应用；所述植物病原菌为立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)或辣椒疫霉(Phytophthoracapsici)。4.甲基营养化芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)LPL-NKY和胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ在制备复合菌剂中的应用；所述甲基营养化芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117的保藏编号为CGMCCNO.7749；所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13的保藏编号为CGMCCNO.7748；所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103的保藏编号为CGMCCNO.7747；所述蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)LPL-NKY的保藏编号为CGMCCNO.7761；所述胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ的保藏编号为CGMCCNO.7750。5.一种复合芽孢杆菌菌肥，其制备方法包括如下步骤：(1)将甲基营养化芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)LPL-117、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K13、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)LPL-K103、蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)LPL-NKY和胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillusmucilaginosus)LPL-HYZ分别进行如下操作：①将菌接种至培养基甲，使发酵体系中的初始菌浓度为107cfu/mL，30℃、通气保压0.05MPa、160rpm振荡培养36h；②完成步骤①后，取整个体系，按10％体积比的接种量转接至培养基乙，混匀后30℃静置培养5天，然后风干至含水量为10％以下，粉碎...

【专利技术属性】
技术研发人员：李平兰，韩玉竹，尚庆茂，王洋，游成真，张宝，张志刚，褚群，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11