一种从獐芽菜中提取苦龙胆酯甙的方法技术

本发明专利技术公开了一种从獐芽菜中提取苦龙胆酯甙的方法，属于生物医药技术领域。包括以下步骤：1)将中性磷酸盐缓冲液与獐芽菜粉混合冻融，离心除去杂质；2)将滤液除水后离心分离得到苦龙胆酯甙粗品；3)加入氯仿、甲醇入玻璃层析柱中，沉降，得到硅胶层析柱。4)将苦龙胆酯甙粗提取物用乙醇溶解、洗涤、纯化、干燥即得到苦龙胆酯甙。本发明专利技术的方法应用范围广泛、方便快捷、成本低、操作简单、分离量大，适合大规模推广应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法。
技术介绍
猜牙菜（学名：Swertia bimaculata (Sieb. et Zucc. ) Hook. Thoms, ex Clarke，英文 名：Swertia)，一年生草本，高10?40厘米。莖单一或分枝，四棱形，带紫色。叶对生，无 柄，线状披针形，长2?4厘米，先端渐尖，基部狭，全缘。 圆锥状聚伞花序顶生或腋生；萼片5,线状披针形；花冠蓝紫色，直径达2厘米，5 深裂，开展，裂片狭卵形，内侧基部有2腺窝，腺窝边缘的毛具瘤状突起；雄蕊5,花药暗紫 色。蒴果椭圆形。花期秋季。生于山坡、草地、林边。分布东北、华北、河南、山东等地。 苦龙胆酯甙，一种存在于獐芽菜中的稀有环烯醚萜，CAS21018-84-8,不但具有清 肝利胆的功效，还可用来治疗胃溃疡。该物质在獐芽菜中的含量很低，通常不高于万分之 八，因此分离与纯化相当困难。

【技术保护点】
一种从獐芽菜中提取苦龙胆酯甙的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)取獐芽菜粉，加入其质量8～12倍的中性磷酸盐缓冲液，充分混匀后得到獐芽菜粉悬浊液，将獐芽菜粉悬浊液冻融2～4次，在15～20℃下，离心除去杂质，得到滤液；2)将滤液除水后，在15～20℃下，向除水后的剩余物中加入硫酸铵饱和溶液，沉降5～8h后，离心分离得到苦龙胆酯甙粗品；3)柱层析硅胶的预处理：取200‑300目柱层析硅胶，加入氯仿、甲醇体积比为9:1的混合溶剂，搅拌至没有气泡后倒入玻璃层析柱中，沉降，得到硅胶层析柱。4)将苦龙胆酯甙粗提取物用乙醇溶解，加入3倍粗提取物重量的200‑300目硅胶，拌匀，挥去溶剂晾干，粉碎过200目筛，加入到含有粗提取物30倍重量柱层析硅胶的硅胶层析柱上，采用氯仿、甲醇体积比为9：1的混合溶剂做洗脱剂洗脱，以苦龙胆酯甙纯品做对照，采用薄层层析法跟踪检测，待苦龙胆酯甙呈现单一斑点时收集洗脱液，直至洗脱液中再次出现其它斑点时停止收集。5)将收集的洗脱液挥干溶剂得到纯化的苦龙胆酯甙。

【技术特征摘要】
1. 一种从獐芽菜中提取苦龙胆酯甙的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1) 取獐芽菜粉，加入其质量8?12倍的中性磷酸盐缓冲液，充分混匀后得到獐芽菜粉 悬浊液，将獐芽菜粉悬浊液冻融2?4次，在15?20°C下，离心除去杂质，得到滤液； 2) 将滤液除水后，在15?20°C下，向除水后的剩余物中加入硫酸铵饱和溶液，沉降 5?8h后，离心分离得到苦龙胆酯甙粗品； 3) 柱层析硅胶的预处理：取200-300目柱层析硅胶，加入氯仿、甲醇体积比为9:1的混 合溶剂，搅拌至没有气泡后倒入玻璃层析柱中，沉降，得到硅胶层析柱。 4) 将苦龙胆酯甙粗提取物用乙醇溶解，加入3倍粗提取物重量的200-300目硅胶，拌 匀，挥去溶剂晾干，粉碎过200目筛，加入到含有粗提取物30倍重量柱层析硅胶的硅胶层析 柱上，采用氯仿、甲醇体积比为9 :1的混合溶剂做洗脱剂洗脱，以苦龙胆酯甙纯品做对照， 采用薄层层析法跟踪检测，待苦龙胆酯甙呈现单一斑点时收集洗脱液，直至洗脱液中再次 出现其它斑点时停止收集。 5) 将收集的洗脱液挥干溶剂得到纯化的苦龙胆酯甙。2. 根据权利要求1所述的一种从獐芽菜中提取藻蓝蛋白的方法，其特征在于：将干燥 后的獐芽...

【专利技术属性】
技术研发人员：张天，
申请(专利权)人：西安岳达植物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61