一种染色体异常核型图像库及其构建方法技术

本发明专利技术涉及一种用于医疗领域的染色体异常核型图像库及其构建方法，其主要特征是取因诊治需要而作染色体病诊断并已确诊为疑难染色体异常的剩余的贴壁生长活细胞，经反复传代扩增，收获细胞，作低渗、固定、-20℃贮存，然后取1种或数种细胞悬液按需要比例混合，使原先每份细胞悬液只含一种染色体异常核型转变为含有不同比例、易于误诊的多种染色体异常核型，经染色体制备、图像摄取制成图像库，所制图像增加了鉴别诊断、嵌合体诊断的难度和复杂性，能按需制出更多染色体异常组合类型的核型图像，标本易得且将废弃的多余细胞转用于染色体分析的教学示教、技术考核、室间质评及资源共享，对及时发现诊断质量问题、提高诊断水平具有显著的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，主要应用于医学领域的细 胞遗传学诊断实验室作染色体核型分析的教学示教、技术考核、室间质评及资源共享与存 贮。
技术介绍
染色体是细胞核中的遗传物质，人类有23对染色体，其中22对为常染色体，1对为 决定男女性别的性染色体。染色体上载有遗传信息的基因，其中DNA占90%以上，RNA含量 随细胞周期及生长情况而有所变化，一般占1%?10%。 染色体结构异常、数目异常及嵌合体，临床上表现为染色体病，属于常见的出生缺 陷，如先天愚型、原发性闭经、两性畸型等。染色体结构异常包括染色体易位、缺失、倒位、环 状等；染色体数目异常指多1条或数条染色体、多1条或数条染色体片段；嵌合体核型是指 同一病例个体并存数种染色体核型。目前分析染色体核型的常规方法是用被检的组织或 细胞，经过常规细胞培养、0. 02 μ Ι/ml秋水仙素终止细胞生长、分离中期细胞、0. 075mol/L KC1低渗、甲醇-冰乙酸（3 : 1)固定等染色体制片程序后，最后用胰酶消化、染色显带，从 而作出染色体结构和数目是否异常的判断。目前通过染色体分析来诊断染色体病已被各级 产前诊断中心或医院检验科普遍地开展，并广泛应用于产前、胚胎植入前染色体病的诊断 以及作为异常妊娠、血液病、肿瘤等临床诊断或发病机理研究的重要指标。 作为所开展的各类实验诊断项目，均应有相应规范的质量控制措施。实验室的质 量控制是确保实验诊断结果准确性的前提，已成为政府行为。为了加强实验室的质量控制， 我国于1982年成立了卫生部临床检验中心，下设室间质评办公室，专职从事于实验诊断项 目的质量控制。卫生部[卫医发]1997第31号文件、《临床实验室管理办法》、《医院评审标 准实施细则》以及大量的文献均指出，实验室必须有规范的质量控制标准，所开展的实验诊 断项目必须参加卫生部临床检验中心组织的室间质评。自1982年以来，在临床检验学科先 后开展了临床实验的室内质控、室间质评。包括了对各检验项目的实验前、中、后以及仪器、 试剂和实验人员的质量控制。质量控制已渗透到临检、生化、微生物、免疫、基因、细胞形态 学诊断等各个实验项目。实验室的质量控制已成为开展实验诊断项目的准入制度、成为医 院等级评审的重要标准。 产前诊断的质量控制已引起日益重视。随着我国对生殖健康和出生缺陷工作的 是益重视，近年来各省市均建立了产前诊断中心，开展了 21三体综合症、18三体综合征、 神经管畸形等重大出生缺陷的产前筛查和产前诊断，其中与重大出生缺陷相关的胎儿羊水 染色体异常的诊断已成为目前产前诊断的主要项目。由于产前诊断是新开展的学科，大多 专业人员的技术经验较为缺乏，特别是对于疑难、罕见病例、国内外首报病例以及如猫叫综 合症等染色体异常不明显但临床后果严重的病例，误诊现象时有发生。我国国家主席令 (1994年10月27日第三十三号）公布的产前诊断法规标准以及国务院办公厅[国发办 (1999) 15号]转发卫生部关于做好提高出生人口素质工作意见的通知中均强调指出， 各省、市产前诊断中心必须加强产前诊断的质量控制、严把质量关。 产前诊断的质量控制是许多学者致力于研究的重要课题。国外有较多的文献报 道了产前诊断质量控制的重要性，Sikkema-Raddatz B等对产前细胞遗传学诊断的细胞培 养及制片过程的影响因素作了深入的研究，提出了室内质量控制的方法；Fries N和Merz E等提出了影像学产前诊断的质量控制方法；Pihlk等认为必须加强产前筛查的质量控制； 在2002?2004年期间，Bastien P等对法国23家实验室作了弓形虫产前分子诊断的室间 质量评价，认为室间质评对促进实验室间的技术交流、发现问题、提高实验诊断质量起到重 要的作用。 研制可行的质控物，是开展产前细胞遗传学诊断室间质评和室内质控的关键环 节。虽然我国行政主管部门以及学术界十分重视产前诊断的质量控制（包括室内质控和室 间质评），但因没有可行的质控物，所以无法开展实质性的质量控制。也就是说，要开展产前 细胞遗传学诊断的室间质评，首先必须要有质控物。这是质量管理人员以及本专业的技术 人员长期以来想方设法解决但始终没有解决的难题。
技术实现思路
为了解决在产前细胞遗传学诊断中无可行质控物的问题，本专利技术人提出了本发 明。 本专利技术的目的是要提供一种应用于医学领域的细胞遗传学诊断实验室作染色体 核型分析的教学示教、技术考核、室间质评及资源共享与存贮的染色体异常核型图像库及 其构建方法。 本专利技术的目的是这样实现的：取自因临床诊治需要而作常规染色体病实验诊断后 并已确诊为疑难、罕见染色体异常的剩余的呈贴壁生长的原代或传代活细胞，经反复传代、 大量扩增细胞数量后，或边传代扩增边收获贴壁细胞，经低渗和固定后，将细胞悬浮于3份 甲醇和1份冰乙酸配制的固定液中，作为原液质控细胞贮存于-20°C备用，然后按待制染 色体异常核型图库的要求，提取数例各自制备的不同病例的疑难染色体异常的原液质控细 胞，按所需要的比例混合使之成为应用质控细胞，从而使原先一般每份只有一种染色体异 常核型的原液质控细胞转变为含有不同比例的、易于误诊的多种染色体异常核型的应用质 控细胞，经制片、干燥、胰酶消化、染色G显带、摄取染色体核型图像，集中保存，建立染色体 异常核型图像库，作为染色体核型分析的质控图备用。 本专利技术取自因临床诊治需要而作常规染色体病实验诊断后并已确诊为疑难、罕见 染色体异常的剩余的呈贴壁生长的原代或传代活细胞，经反复传代、大量扩增细胞数量后 收获贴壁细胞，制备原液质控细胞，然后将各自制备的不同例次的原液质控细胞按质控需 要比例混合，使之成为应用质控细胞，由此可制成更多种类的、包含有在同一份应用质控细 胞中同时含有多种不同比例的、不同类型的易误诊染色体异常核型的应用质控细胞，经制 片、干燥、胰酶消化、G显带制成的染色体异常核型图像，不但增加了鉴别诊断、染色体嵌合 体诊断的难度和复杂性，而且因有足量的原液质控细胞可选并按所需比例混合，所以可制 备更多染色体异常组合类型的染色体异常核型图像，标本易得且将废弃的多余细胞转化为 可用于染色体核型分析的教学示教、技术考核、室间质评及资源共享的有用材料，应用后对 提高诊断水平、加强质量管理具有意想不到的效果。 【附图说明】 图1是根据本专利技术提出的一种46, X，t(Y ;5) (ql2 ;ql2)染色体异常核型图像。 图2是根据本专利技术提出的一种46，XX，t(13 ;18) (ql2 ;q21)染色体异常核型图像。 如图1，其染色体核型并非表现为46，XX的正常女性或46，XY的正常男性核型，而 是为46, X，t(Y ;5) (ql2 ;ql2)的少见、易误诊异常核型，即发生病变易位后的5号染色体 [der(5)]很象9号染色体；而发生病变易位后的Y染色体[t(Y;5)]很象14号染色体，这 个核型图中同时有两条染色体异常，很易误诊为46, X，+9, +14, -Y，-5。 如图2,其染色体核型并非表现为46，XX的正常女性或46，XY的正常男性核型，而 是为46, XX，t (13 ;18) (ql2 ;q21)的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于医疗领域的染色体异常核型图像库及其构建方法，其主要特征是取因临床诊治需要而作染色体病诊断并已确诊为疑难染色体异常的剩余的贴壁生长活细胞，经反复传代扩增，收获细胞，作低渗、固定、制成原液质控细胞，‑20℃贮存，然后提取1例或数例原液质控细胞按需要比例混合，使原先每份只含一种染色体异常核型的原液质控细胞转变为含有不同比例、易于误诊的多种染色体异常核型的应用质控细胞，经染色体制备、图像摄取和集中贮存建成染色体异常核型图像库，其中所得染色体异常图像不但增加了鉴别诊断、嵌合体诊断的难度和复杂性，而且因有足量的原液质控细胞可选并按所需比例混合，所以可制备更多染色体异常组合类型的染色体异常核型图像，标本易得且将废弃的多余细胞制成病例图像、转用于染色体分析的教学示教、技术考核、室间质评及异常病例资源共享，对及时发现诊断质量问题、提高诊断水平具有显著的效果。

【技术特征摘要】
1. 一种用于医疗领域的染色体异常核型图像库及其构建方法，其主要特征是取因临床 诊治需要而作染色体病诊断并已确诊为疑难染色体异常的剩余的贴壁生长活细胞，经反复 传代扩增，收获细胞，作低渗、固定、制成原液质控细胞，-20°C贮存，然后提取1例或数例原 液质控细胞按需要比例混合，使原先每份只含一种染色体异常核型的原液质控细胞转变为 含有不同比例、易于误诊的多种染色体异常核型的应用质控细胞，经染色体制备、图像摄取 和集中贮存建成染色体异常核型图像库，其中所得染色体异常图像不但增加了鉴别诊断、 嵌合体诊断的难度和复杂性，而且因有足量的原液质控细胞可选并按所需比例混合，所以 可制备更多染色体异常组合类型的染色体异常核型图像，标本易得且将废弃的多余细胞制 成病例图像、转用于染色体分析的教学示教、技术考核、室间质评及异常病例资源共享，对 及时发现诊断质量问题、提高诊断水平具有显著的效果。2. 根据权利要求1所述的一种用于医疗领域的染色体异常核型图像库及其构建方法， 其特征是提取数例在不同时间制备的不同病例的疑难染色体异常核型的原液质控细胞，按 1例原液质控细胞悬液分别与另外1例、2例、3例、4例、5例、6例、7例、8例、9例、10例、11 例、12例、14例、15例、16例、17例、18例、19例、20例、1?50例原液质控细胞以1 : 1、 1 : 2、1 : 3、1 : 4、1 : 5、1 : 6、1 : 7、1 : 8、1 : 9、1 : 10、1 : 1 ?20 的体积比例或 细胞数比例进行混合，混合...

【专利技术属性】
技术研发人员：翁炳焕，
申请(专利权)人：翁炳焕，
类型：发明
国别省市：浙江;33