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一种高产多糖蛹虫草的培养方法技术

技术编号:10344044 阅读:118 留言:0更新日期:2014-08-21 16:09
本发明专利技术涉及食用菌栽培领域,特别涉及一种高产多糖蛹虫草的培养方法,包括以下步骤:将蛹虫草菌种活化培养,制得孢子悬液;将孢子悬液以体积百分数为3-8%的比例接种于蛹虫草种子培养基中培养,得到种子液;将种子液接种于蛹虫草生长培养基中依次进行暗培养、菌丝转色培养和子实体培养,得到蛹虫草子实体。本发明专利技术提供的高产多糖蛹虫草的培养方法,将孢子悬液接种于本发明专利技术中提供的蛹虫草种子培养基中培养,得到种子液;将种子液接种到本发明专利技术提供的蛹虫草生长培养基中依次进行暗培养、菌丝转色培养和子实体培养,培养方法简单,培养周期短,得到的蛹虫草子实体蛹虫草多糖含量高,且用该蛹虫草子实体提取的蛹虫草多糖的纯度高。

【技术实现步骤摘要】
一种局产多糖蛹虫草的培养方法
本专利技术涉及食用菌栽培领域,具体而言,涉及。
技术介绍
蛹虫草又称北虫草、北冬虫夏草,是真菌寄生于鳞翅目等昆虫的虫体上形成的虫菌复合体,是一种具有滋补作用的重要和营养品。蛹虫草具有抗肿瘤、抗炎等多种药力功效,它已经在东亚地区被广泛作为滋补品及药用菌使用,我国卫生部于2009年3月16日正式将其列为新资源食品。其中蛹虫草中的多糖,主要是由甘露糖、虫草素、腺苷、半乳糖、阿拉伯糖、木糖精、葡萄糖、岩藻糖组成的多聚糖。实验证明,虫草多糖可提高人体免疫功能,升高白细胞,改善呼吸系统,可使肾上腺重量、血浆皮质醇、醛固酮及肾上腺内胆固醇含量增加,有促进肾上腺的作用,抑制肿瘤生长,并具有抗肿瘤、抗辐射、降血糖和脂蛋白、止咳、化痰、润肺和延缓衰老等药理作用,临床已用于治疗恶性肿瘤,因此,虫草多糖具有重要的利用价值。目前,蛹虫草多糖含量主要集中于通过液体深层发酵来提高,但是,深层发酵得到的为蛹虫草菌丝体,其包括蛹虫草自身外,还有一些培养基残渣,影响蛹虫草多糖的纯度。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供蛹虫草种子培养基、蛹虫草生长培养基以及,以解决上述的问题。在本专利技术的实施例中提供了蛹虫草种子培养基,按重量份计,包括以下成分:葡萄糖8-12份、蛋白胨2-4份、酵母粉4-6份、磷酸二氢钾0.02-0.06份、硫酸镁0.02-0.06份、氯化钠4-6份、维生素B10.05-0.15份、山药粉8-12份、水800-1200份。在本专利技术的实施例中还提供了蛹虫草生长培养基,按重量份计,包括以下成分:玉米粉12-18份、麦子粉5-10份、山药粉3-8份、干刺梨粉2_5份、蛋白胨0.02-0.05份、磷酸二氢钾 0.02-0.04 份、硫酸镁 0.02-0.03 份、葡萄糖 0.02-0.08 份、维生素 B10.0005-0.001份、水30-40份。,包括以下步骤:(a)将蛹虫草菌种活化培养,制得浓度为1-3 X 107CFU/ml的孢子悬液;(b)将所述孢子悬液以体积百分数为3-8%的比例接种于权利要求1所述的蛹虫草种子培养基中培养,得到种子液;(C)将所述种子液接种于权利要求2所述的蛹虫草生长培养基中依次进行暗培养、菌丝转色培养和子实体培养,得到蛹虫草子实体。优选地,在所述步骤(b)中,培养条件为:25-30°C,240-260rpm/min振荡培养。优选地,在所述步骤(b)中,培养3-5d,得到所述种子液。优选地,将所述种子液稀释20-30倍后,以体积百分数为5-8%进行接种。优选地,在所述步骤(C)中,所述暗培养在已消毒的培养间进行培养,培养条件为:温度20-25°C,湿度60-70%,培养6_8d。优选地,在所述步骤(C)中,所述菌丝转色培养的培养条件为:温度15_20°C,湿度60-70%,每天通风1.5-2.5h,光照8_12h,光照强度为250_300Lux,培养5_8d。优选地,在所述步骤(C)中,所述子实体培养的培养条件为:透气培养,温度为200C ±2°C,湿度为80-90%,每天通风1.5-2.5h,光照6_8h,光照强度为250_300Lux,培养至子实体长度为6-lOcm,采收得到所述蛹虫草子实体。优选地,所述消毒为:将装有过氧乙酸溶液的容器置于75_85°C的水浴中熏蒸对所述培养间消毒,熏蒸时间为90-100min,所述过氧乙酸每立方米空间用量为3_3.2g ;消毒期间,培养间室温不低于20°C,湿度为60% -80%。本专利技术实施例提供的高产多糖蛹虫草的培养方法,将孢子悬液接种于本专利技术中提供的蛹虫草种子培养基中培养,得到种子液;将种子液接种到本专利技术提供的蛹虫草生长培养基中依次进行暗培养、菌丝转色培养和子实体培养,培养方法简单,培养周期短,得到的蛹虫草子实体蛹虫草多糖含量高,且用该蛹虫草子实体提取的蛹虫草多糖的纯度高。【具体实施方式】下面通过具体的实施例子对本专利技术做进一步的详细描述。在本专利技术的实施例中提供了蛹虫草种子培养基,按重量份计,包括以下成分:葡萄糖8-12份、蛋白胨2-4份、酵母粉4-6份、磷酸二氢钾0.02-0.06份、硫酸镁0.02-0.06份、氯化钠4-6份、维生素B10.05-0.15份、山药粉8-12份、水800-1200份。进一步地,按重量份计,包括以下成分:葡萄糖9-10份、蛋白胨3-4份、酵母粉5_6份、磷酸二氢钾0.03-0.05份、硫酸镁0.03-0.05份、氯化钠4-5份、维生素B10.05-0.15份、山药粉9-10份、水1000份。得到的蛹虫草种子培养基营养全面,培养基成分浓度及配比合适;将蛹虫草的孢子悬液接种至本培养基,部分孢子生长成菌丝体,孢子生命力旺盛,孢子数扩增快,并且得到部分菌丝体,得到的种子液含有孢子和菌丝体,利于后续生长。在本专利技术的实施例中还提供了蛹虫草生长培养基,按重量份计,包括以下成分:玉米粉12-18份、麦子粉5-10份、山药粉3-8份、干刺梨粉2_5份、蛋白胨0.02-0.05份、磷酸二氢钾 0.02-0.04 份、硫酸镁 0.02-0.03 份、葡萄糖 0.02-0.08 份、维生素 B10.0005-0.001份、水30-40份。进一步地,按重量份计,包括以下成分:玉米粉14-16份、麦子粉6-8份、山药粉4-6份、干刺梨粉3-4份、蛋白胨0.03-0.04份、磷酸二氢钾0.02-0.04份、硫酸镁0.02-0.03份、葡萄糖0.03-0.06份、维生素B10.0005-0.001份、水30-40份。得到的蛹虫草生长培养基营养全面,培养基成分浓度及配比合适;将蛹虫草的种子液接种至本培养基,利于孢子生长为菌丝体,得到较多的菌丝体,利于获得更多的蛹虫草子实体,且得到的蛹虫草子实体蛹虫草多糖含量高。其中,蛹虫草种子培养基和蛹虫草生长培养基中涉及的玉米粉和麦子粉的粒度均为1-3_,山药粉和干刺梨粉采用以下方式制备:将鲜山药烘干,然后粉碎,得到粒度为0.8-1.5mm的山药粉; 将鲜刺梨烘干,去籽后粉碎,得到粒度为0.8-1.5mm的干刺梨粉。使用这种粒度的玉米粉、麦子粉、山药粉以及干刺梨粉,其在灭菌过程中能分布均匀,灭菌后得到的培养基中的成分分布均一。 分别将蛹虫草种子培养基和蛹虫草生长培养基各自含有的成分称取后混合,均采用高温高压灭菌,具体为121°C,灭菌20-30min,灭菌后冷却至室温,得到可直接用于培养菌株的培养基。高产多糖蛹虫草的培养方法,包括以下步骤:(a)将蛹虫草菌种活化培养,制得浓度为1-3 X 107CFU/ml的孢子悬液;(b)将所述孢子悬液以体积百分数为3-8%的比例接种于权利要求1所述的蛹虫草种子培养基中培养,得到种子液;(c)将所述种子液接种于权利要求2所述的蛹虫草生长培养基中依次进行暗培养、菌丝转色培养和子实体培养,得到蛹虫草子实体。采用本专利技术提供的蛹虫草种子培养基和蛹虫草生长培养基进行蛹虫草的培养,培养方法简单,培养周期短,成本低,得到的蛹虫草子实体蛹虫草多糖含量高;另外,现有技术中采用液体发酵培养蛹虫草,蛹虫草的大部分在发酵液中,自身产生的分泌物等物质混杂在发酵液中,因而得到的蛹虫草含有发酵液的成分,而本专利技术提供的蛹虫草生长培养基为固体培养基,采用固体培养蛹虫草,采摘得本文档来自技高网...

【技术保护点】
蛹虫草种子培养基,其特征在于,按重量份计,包括以下成分:葡萄糖8‑12份、蛋白胨2‑4份、酵母粉4‑6份、磷酸二氢钾0.02‑0.06份、硫酸镁0.02‑0.06份、氯化钠4‑6份、维生素B10.05‑0.15份、山药粉8‑12份、水800‑1200份。

【技术特征摘要】
1.蛹虫草种子培养基,其特征在于,按重量份计,包括以下成分:葡萄糖8-12份、蛋白胨2-4份、酵母粉4-6份、磷酸二氢钾0.02-0.06份、硫酸镁0.02-0.06份、氯化钠4_6份、维生素B10.05-0.15份、山药粉8-12份、水800-1200份。2.蛹虫草生长培养基,其特征在于,按重量份计,包括以下成分:玉米粉12-18份、麦子粉5-10份、山药粉3-8份、干刺梨粉2-5份、蛋白胨0.02-0.05份、磷酸二氢钾0.02-0.04份、硫酸镁0.02-0.03份、葡萄糖0.02-0.08份、维生素B10.0005-0.001份、水30-40份。3.一种高产多糖蛹虫草的培养方法,其特征在于,包括以下步骤: (a)将蛹虫草菌种活化培养,制得浓度为l_3X107CFU/ml的孢子悬液; (b)将所述孢子悬液以体积百分数为3-8%的比例接种于权利要求1所述的蛹虫草种子培养基中培养,得到种子液; (c)将所述种子液接种于权利要求2所述的蛹虫草生长培养基中依次进行暗培养、菌丝转色培养和子实体培养,得到蛹虫草子实体。4.根据权利要求3所述的高产多糖蛹虫草的培养方法,其特征在于,在所述步骤(b)中,培养条件为:25-30°C,240-260rpm/min振荡培养。5.根据权利要求4所述的高产多糖蛹虫草的培养方法,其特征在于,在所述步骤(b)中,培养3-...

【专利技术属性】
技术研发人员:熊艳
申请(专利权)人:熊艳
类型:发明
国别省市:贵州;52

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