赤豆总黄酮提取物及其应用制造技术

本发明专利技术提供赤豆总黄酮提取物，主要含有：儿茶素（Ｃａｔｅｃｈｉｎｅ）、芦丁（Ｒｕｔｉｎ）、杨梅酮芸香糖苷（Ｍｙｒｉｃｅｔｉｎ－ｒｕｔｉｎｏｓｉｄｅ）和槲皮素（Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ）。赤豆总黄酮提取物与药用赋形剂可在制备具有抗氧化作用和雌激素样作用的药物中应用，也可在制备具有抗氧化作用和雌激素样作用的保健品或营养品中应用。制备的制剂形式主要包括液体制剂和固体制剂。所述制剂的给药形式主要包括口服给药或非肠道给药。该提取物作为营养品尚具有预防、保健和抗衰老作用。具有药用价值和营养价值肯定、安全性大、来源丰富、符合消费群体饮食习惯，市场推广前景大的优点。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然药物提取物，尤其涉及总黄酮提取物及其在制备药物、营养保健产品、食品中的应用。
技术介绍
随着人类健康事业的迅猛发展，许多常见、多发疾病的发生发展和转归过程已经得以明确，但是能够达到疗效肯定、不良反应轻微、用药方便、疗程适中的药物却明显缺乏。与此同时可用于提高人类健康水平的营养成分明确、用途广泛、性价比高的营养保健品也亟待进一步研究开发。许多疾病的发生发展和转归与体内的氧自由基产生，脂质过氧化损伤有关，如心血管疾病、肝脏损伤、老年性退行性疾病、肿瘤、免疫性疾病等。因此具有抗氧化作用的天然来源物质在上述疾病的预防和治疗中具有重要作用[1-5]，在提高人类机体防病治病能力上，也能起到营养保健作用。植物中存在的许多物质具有雌激素样活性，与疾病的发生发展和转归同样密切相关[6-13]。在上述疾病的防治和营养保健上也起着重要作用。到目前为止未见文献报道有关赤豆种子总黄酮提取物明确组分，仅有报道赤豆干燥种皮提取物中含芦丁[14]。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供赤豆总黄酮提取物，赤豆总黄酮组成主要成分是儿茶素(Catechine)、芦丁(Rutin)、杨梅酮芸香糖苷(Myricetin-rutinoside)和槲皮素(Quercetin)。赤豆总黄酮提取物与药用赋形剂制备的制剂形式主要包括液体制剂和固体制剂。固体制剂主要包括颗粒剂、片剂、胶囊剂(含软胶囊)、滴丸剂。液体制剂主要包括口服液体制剂和注射液体制剂。所述制剂的给药形式主要包括口服给药或非肠道给药，优选口服给药。本专利技术的另一个目的，是基于赤豆总黄酮提取物所具有的抗氧化作用和雌激素样作用，在制备具有抗氧化作用和雌激素样作用的药物中应用；以及在治疗心血管疾病、肝脏损伤、老年性退行性疾病、肿瘤、免疫性疾病的药物中应用；同时也由于具备上述作用，在制备具有抗氧化作用和雌激素样作用的保健品或营养品中应用。本专利技术的有益效果是1.该提取物选自药食同源天然植物赤豆荚果种子(既是中药材，具有悠久药用历史，又是民间广泛食用的材料)，具有药用价值和营养价值肯定、安全性大、来源丰富、符合消费群体饮食习惯，市场推广前景大的优点。2.经实验研究表明，该提取物在制备用于治疗和改善心血管疾病、肝脏损伤、老年性退行性疾病(老年性痴呆、骨质疏松、更年期综合征)、肿瘤、免疫性疾病有关药物中应用，可解决该类疾病治疗中，明显缺乏疗效肯定、不良反应轻微、用药方便的药物的问题。该提取物作为营养品尚具有预防、保健和抗衰老作用。3.采用多种经典的生物评价系统，在细胞水平和基因水平证实该提取物具有显著的抗氧化作用和雌激素样活性，提供了该提取物制备药物在治疗上述疾病中和/或营养保健用途中，具有多层次、多靶点作用的依据。4.经体外实验和动物药效学实验证明，该提取物具有以下作用(1)体外抗氧化作用；(2)体外植物雌激素样活性；(3)护肝作用；(4)活血化瘀作用；(5)促进大鼠空间记忆作用，对D-半乳糖所致亚急性衰老合并鹅膏蕈酸损伤Meynert基底核的老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力有显著改善作用；(6)抗动物骨质疏松作用；(7)提高小鼠免疫力作用。5.总黄酮提取物毒理作用研究结果表明，均未出现死亡和明显的中毒症状。6.本专利技术从赤豆种子中获得总黄酮达到＞50％以上，可用于研制5类以上中药新药。也可用于开发营养保健食品。附图说明图1为抗坏血酸体外抗氧化标准曲线；图2为赤豆总黄酮提取物的体外抗氧化作用；图3为赤豆总黄酮提取物对MCF-7细胞的促增殖作用。具体实施例方式本专利技术结合实施例作进一步说明。实施例1本专利技术赤豆总黄酮的制备方法称取市售赤豆种子干燥原料3.0kg，8倍量70％乙醇，75℃下提取两次，每次1.5h；减压浓缩挥去乙醇，冷却后滤纸过滤除去不溶物。滤液用石油醚萃取三次去除杂质，水相挥去剩余石油醚后过聚酰胺柱(5cm×80cm)。先用水洗涤，再用70％乙醇洗脱。收集乙醇洗脱液，减压浓缩挥去乙醇。浓缩液冷冻干燥后得到赤豆总黄酮提取物，经检测总黄酮含量达到50％以上，由儿茶素、芦丁、杨梅酮芸香糖苷和槲皮素组成。上述制备方法提取的总黄酮，以下简称“赤豆总黄酮提取物”。实施例2本专利技术提取物的最大耐受量实验(1)材料与方法赤豆总黄酮提取物参照实施例1方法获得，以0.5％羧甲基纤维素钠配制成悬液。提取物浓度相当于在每毫升含10g原材料的提取物。采用最大浓度(相当于10g原材料中含量/ml)、最大给药容量0.4ml/10g/次灌胃给予小鼠，一天内小鼠灌胃上述悬液两次，间隔5～6小时，观察给药当天及随后两周内小鼠的体重和各种症状变化。(2)结果小鼠灌胃给药当天有拉稀便现象，但未出现死亡，随后两周内未见表观不良症状。(3)结论赤豆总黄酮提取物小鼠灌胃给予800g生药中相应含量/kg，除给药当天有拉稀便现象外，未出现死亡及其它明显毒性反应。实施例3体外抗氧化作用(1)材料与方法赤豆总黄酮提取物参照实施例1方法获得，并按下法进行体外抗氧化实验体外抗氧化活性通过Photochem(Analytik Jena AG)抗氧化测定仪测定。本实验采用ACW方法(the method of antioxidative capacity of water solublesubstances)测定。先用抗坏血酸为标准制作标准曲线，槲皮素，芹菜素以及用工作液溶解赤豆总黄酮提取物后，使最终测定量分别为0，10，20，40，80，120ng，并进行抗氧化活性测定。结果显示，标准曲线线性关系良好，参见图1，采用Photochem抗氧化测定法所获抗坏血酸标准曲线，回归方程为Y＝46.78X-1.24(R2＝0.9991)。以维生素C为标准物质与迟滞时间做标准曲线，其他测定样品的信号通过标准取消的转换，转变为抗坏血酸当量，定量比较如下赤豆总黄酮提取物具有很强的抗氧化能力，随着浓度的增加而加强，表现出较好的量效关系。在40ng、80ng、120ng浓度下，赤豆总黄酮提取物作用强于芹菜素，两者有显著性差异(P＜0.05)，但较槲皮素作用弱。参见图2，通过标准曲线换算，所有结果均以抗坏血酸当量表示，槲皮素显示最强的抗氧化作用，赤豆总黄酮提取物次之，在40ng，80ng，120ng时，抗氧化作用显著强于芹菜素，赤豆总黄酮提取物与芹菜素相比统计结果P＜0.05。目前认为抗氧化活性与防治许多疾病及营养保健有关[15-7]，由此可在服用赤豆总黄酮提取物后产生防治疾病和营养保健作用。实施例4赤豆总黄酮提取物雌激素样作用的体外研究雌激素样活性通过能表达雌激素受体人乳腺癌细胞MCF-7/BUS体外增殖法测定。MCF-7细胞以含5％FBS的DMEM培养基常规培养，至80％融合时用0.25％胰酶消化，以10000个细胞/孔密度接种于24孔细胞培养版中，贴壁48h后换用无激素条件培养基，预培养48h，加入不同浓度的受试物和阳性药雌二醇(17-β-estradiol，E2)，继续培养6天，MTT法检测细胞增殖率。参见图3，赤豆总黄酮提取物对雌激素敏感型MCF-7细胞的促增殖作用。1nM雌二醇设为100％，结果均为相对于1nM雌二醇的相对增殖率。表述为平均值±标准差，数据统计用t-TEST检验(*P＜0.05，与溶剂二甲基亚砜相比)。结果显示，与溶剂组相比，10-本文档来自技高网...

【技术保护点】
赤豆总黄酮提取物，其特征是：提取物的主要组成有儿茶素、芦丁、杨梅酮芸香糖苷和槲皮素。

【技术特征摘要】
1.赤豆总黄酮提取物，其特征是提取物的主要组成有儿茶素、芦丁、杨梅酮芸香糖苷和槲皮素。2.根据权利要求1所述的赤豆总黄酮提取物，其特征是总黄酮提取物可与药用赋形剂制备成药物制剂。3.根据权利要求1所述的赤豆总黄酮提取物，其特征是总黄酮提取物可与药用赋形剂制备成营养保健食品。4.根据权利要求2或3所述的药物制剂或营养保健食品，其特征是制剂形式主要包括液体制剂和固体制剂。5.根据权利要求4所述的药物制剂或营养保健食品，其特征是固体制剂主要包括颗粒剂、片剂、胶囊、软胶丸、软胶囊、滴丸剂。6.根据权利要求4所述的药物制剂或营养保健食...

【专利技术属性】
技术研发人员：楼宜嘉，王志强，赵青威，李波，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]