The invention discloses an antioxidant activity detection method of Chinese traditional medicine preparation for activating blood circulation and removing blood stasis, which comprises the following steps: extracting the Chinese traditional medicine preparation for activating blood circulation and removing blood stasis by ultrasonic wave with methanol solution to obtain sample solution; dissolving 1,1 diphenyl 2 trinitrophenylhydrazine (DPPH) with methanol to obtain DPPH methanol working solution; and dissolving sample solution and DPPH methanol. The working solution and methanol are allocated into the solution to be tested, blank solution and control solution in a specific proportion. The absorbance of each solution is measured by enzyme label instrument, and the clearance rate is calculated. The results are corrected by using Vc as internal standard, and the antioxidant activity of the traditional Chinese medicine preparation for activating blood circulation and removing blood stasis is expressed by SR sample/SRVC. The invention also provides the application of the detection method as an antioxidant activity detection method of Xuefu Zhuyu Capsules.
【技术实现步骤摘要】
一种活血化瘀中药制剂的抗氧化活性检测方法及应用
本专利技术属于中药分析
,尤其涉及一种活血化瘀中药制剂的抗氧化活性检测方法及应用。
技术介绍
血瘀证包括血运不畅阻滞于静脉及脏腑,或离经之血积存于体内,或污秽之血所致的证候,可见于冠心病、脑血管病、肺心病、肝硬化等多种疾病。血瘀证患者多有血小板及凝血功能异常、血流动力学改变、外周循环障碍、炎症反应、结缔组织疾病中的至少一种情况。采用活血化瘀药物,特别是活血化瘀中药制剂是常用的治疗方法。人体因为与外界的持续接触,包括呼吸(氧化反应)、外界污染、放射线照射等因素不断的在人体体内产生自由基。血瘀证患者对体内自由基清除不足,过量的自由基会引起细胞氧化性损伤、脂质过氧化等,可以损害所有类型的生物分子—脂质、蛋白质、碳水化合物和DNA。从血瘀证角度来说,自由基中的羟自由基与脂质过氧化物是前列环素2(PGl2)合成酶活性的强烈选择性抑制剂,进而又可刺激血栓烷A2(TXA2)的合成,导致血管收缩、血小板聚集,从而导致微循环障碍。自由基还可导致血流流变学异常,降低红细胞膜的流动性,并使血红蛋白形成海因茨小体(Heinz小体)从而降低红细胞变形能力,使红细胞与血浆蛋白交联,提高血浆粘度,并降低红细胞滤过能力,还会破坏PGl2与TXA2的平衡,导致血小板聚集、血栓形成,进一步影响血液流变特性。可见,自由基能够参与血瘀证的发生,因此很多药物发挥其活血化瘀功效的作用机理之一即是对抗自由基(即抗氧化)。《中国药典》2015年版收录的活血化瘀中药制剂有很多种,如血府逐瘀胶囊,其由桃仁(炒)、红花、赤芍、川芎、枳壳(麸炒)、柴胡、桔梗 ...
【技术保护点】
1.一种活血化瘀中药制剂的抗氧化活性检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤a、用25~75%v/v甲醇超声提取所述活血化瘀中药制剂,得样品溶液,备用;步骤b、取1,1‑二苯基‑2‑三硝基苯肼,用纯甲醇溶解,得1,1‑二苯基‑2‑三硝基苯肼甲醇工作溶液,备用;步骤c、取所述样品溶液与所述1,1‑二苯基‑2‑三硝基苯肼甲醇工作溶液混合,得待测溶液,其中所述1,1‑二苯基‑2‑三硝基苯肼甲醇工作溶液中的1,1‑二苯基‑2‑三硝基苯肼与所述样品溶液中所述活血化瘀中药制剂的质量比为0.3:1~5;步骤d、取所述样品溶液与25~75%v/v甲醇溶液混合,得空白溶液,其中所述样品溶液与所述甲醇溶液的体积比与步骤c中所述待测溶液中所述样品溶液与所述1,1‑二苯基‑2‑三硝基苯肼甲醇工作溶液的体积比相等;步骤e、取所述1,1‑二苯基‑2‑三硝基苯肼甲醇工作溶液与25~75%v/v甲醇溶液混合,得对照溶液,其中所述甲醇溶液与所述1,1‑二苯基‑2‑三硝基苯肼甲醇工作溶液的体积比与步骤c中所述待测溶液中所述样品溶液与所述1,1‑二苯基‑2‑三硝基苯肼甲醇工作溶液的体积比相等;步骤f、用酶标仪检测所述待测溶 ...
【技术特征摘要】
1.一种活血化瘀中药制剂的抗氧化活性检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤a、用25~75%v/v甲醇超声提取所述活血化瘀中药制剂,得样品溶液,备用;步骤b、取1,1-二苯基-2-三硝基苯肼,用纯甲醇溶解,得1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液,备用;步骤c、取所述样品溶液与所述1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液混合,得待测溶液,其中所述1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液中的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼与所述样品溶液中所述活血化瘀中药制剂的质量比为0.3:1~5;步骤d、取所述样品溶液与25~75%v/v甲醇溶液混合,得空白溶液,其中所述样品溶液与所述甲醇溶液的体积比与步骤c中所述待测溶液中所述样品溶液与所述1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液的体积比相等;步骤e、取所述1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液与25~75%v/v甲醇溶液混合,得对照溶液,其中所述甲醇溶液与所述1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液的体积比与步骤c中所述待测溶液中所述样品溶液与所述1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液的体积比相等;步骤f、用酶标仪检测所述待测溶液、空白溶液、对照溶液的吸光度,检测波长为500~520nm;步骤g、计算所述活血化瘀中药制剂的清除率,计算公式为SR样品=[1-(OD药物-OD空白)/OD对照]×100%,其中SR样品为所述待测溶液的清除率,OD药物为所述待测溶液的吸光度,OD空白为所述空白溶液的吸光度,OD对照为所述对照溶液的吸光度;步骤h、以Vc为内标物,用内标法对步骤g的测定结果进行校正,以S...
【专利技术属性】
技术研发人员:柴欣,张竞,丁佳敏,房士明,杨静,于卉娟,张中群,
申请(专利权)人:天津中医药大学,
类型:发明
国别省市:天津,12
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