双黄酮-镍配合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种双黄酮类‑镍配合物及其制备方法和应用。本发明专利技术以穗花杉双黄酮为配体，镍离子为中心离子，经反应得到穗花杉双黄酮‑镍配合物，用红外光谱、紫外‑可见吸收光谱和高分辨质谱对配合物的结构进行表征。同时，本发明专利技术研究了穗花杉双黄酮‑镍配合物的抗肿瘤和抗氧化活性。MTT法表明穗花杉双黄酮‑镍配合物具有较好的抗肿瘤活性，且抗肿瘤活性强于穗花杉双黄酮；邻苯三酚自氧化法、ABTS法均表明穗花杉双黄酮‑镍配合物的抗氧化活性强于穗花杉双黄酮本身。双黄酮类‑镍配合物的形成，提高了穗花杉双黄酮抗肿瘤、抗氧化活性，有望用于药物的开发。

Biflavone nickel complexes and preparation method and application thereof

The invention discloses a biflavone nickel complexes and preparation method and application thereof. The invention uses amentoflavone as ligands, nickel ion as central ion via the reaction of amentoflavone nickel complexes, IR and UV visible absorption spectroscopy and high resolution structures of the complexes were characterized by mass spectrometry. At the same time, the invention of amentoflavone nickel complexes with antitumor and antioxidant activity. That amentoflavone nickel complexes have good antitumor activity by MTT, and the antitumor activity in amentoflavone; adjacent benzene three phenol autoxidation method and ABTS method showed that the amentoflavone nickel with strong antioxidant activities in amentoflavone itself. Biflavone nickel complex formation, improve the anti-tumor and antioxidant activity of amentoflavone, is expected to be used in drug development.

【技术实现步骤摘要】
双黄酮-镍配合物及其制备方法和应用
本专利技术属于有机合成、医药
，具体涉及一种双黄酮-镍配合物及其制备方法和应用。
技术介绍
双黄酮类化合物是裸子植物特有的化学成分，例如银杏、卷柏等，具有抗氧化、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等生物活性。其中，穗花杉双黄酮(Amentoflavone，Ame)是双黄酮类化合物中较为常见的一种，其结构式如下：Sun等研究发现穗花杉双黄酮通过激活hPPARγ来提高抗癌基因的表达，从而达到抑制乳腺癌细胞和宫颈癌细胞的效果[LeeE.,ShinS.,LeeJ.etal.Cytotoxicactivitiesofamentoflavoneagainsthumanbreastandcervicalcancersaremediatedbyincreasingofptenexpressionlevelsduetoperoxisomeproliferator-activatedreceptorγactivation[J].BulletinoftheKoreanChemicalSociety,2012,33(7):2219-2223.]。Chen等研究发现穗花杉双黄酮通过抑制因子NF-kappaB的活性，阻碍血管的生成和癌细胞的新陈代谢，达到抑制肿瘤细胞生长的目的[ChenJ.H.,ChenW.L.,LiuY.C.Amentoflavoneinducesanti-angiogenicandanti-metastaticeffectsthroughsuppressionofNF-kappaBactivationinMCF-7cells[J].AnticancerResearch,2015,35(12):6685-6693.]。Lee等研究发现，穗花杉双黄酮可以抑制由紫外辐射引起的金属蛋白酶的表达，从而起到抗氧化、防辐射的作用[LeeC.W.,NaY.,ParkN.,etal.AmentoflavoneinhibitsUVB-inducedmatrixmetalloproteinase-1expressionthroughthemodulationofAP-1Nimponentsinnormalhumanfibroblasts[J].AppliedBiochemistryandBiotechnology,2012,166:1137-1147.]。Zhang等研究发现穗花杉双黄酮和银杏黄素具有一定的抗氧化活性，去除DPPH自由基的能力较强。[ZhangY.P.,ShiS.Y.,WangY.X.,etal.Target-guidedisolationandpurificationofantioxidantsfromSelaginellasinensisbyofflineNiuplingofDPPH-HPLCandHSCCCexperiments[J].JournalofChromatographyB,2011,879:191-196.]。Li等研究表明，穗花杉双黄酮具有抗氧化活性，可有效清除OH-·，O2-·，DPPH·，ABTS+·等自由基，并可以保护DNA免受OH-·引起的氧化损伤[LiX.C.,WangL.,HanW.J.,etal.Amentoflavoneprotectsagainsthydroxylradical-inducedDNAdamageviaantioxidantmechanism[J].TurkishJournalofBiochemistry-TurkBiyokimyaDergisi,2014,39(1):30-36.]。中药配位化学表明，微量元素和有机化合物反应生成的配合物存在着配合平衡，所以可以呈现出原来成分的生物活性；又由于微量元素间、有机成分间、配合物间以及它们相互间的协同和拮抗作用可以减弱或增强原有各成分的生物活性，也可能产生新的生物活性[曹治权.中药药效的物质基础和作用机理研究新思路(一)-中药中化学物种形态和生物活性关系的研究[J].上海中医药大学学报,2000,14(1):36-39.]。例如，Zhou等研究发现槲皮素稀土配合物清除O2-·的能力均强于槲皮素，槲皮素稀土配合物可以抑制多种肿瘤，且抗肿瘤活性均强于槲皮素，其中配合物对膀胱肿瘤细胞具有较强的抑制作用，而槲皮素无此作用[ZhouJ.,WangL.F.,WangJ.Y.,etal.Synthesis,characterization,antioxidativeandantitumoractivitiesofsolidquercetinrareearth(III)Nimplexes[J].JournalofInorganicBiochemistry,2001,83:41-48.]。然而，到目前为止，有关双黄酮配合物的合成及其生物活性的研究未见报道。
技术实现思路
专利技术目的：针对现有技术中存在的不足，本专利技术的目的是提供一种穗花杉双黄酮-镍配合物，满足抗肿瘤和抗氧化药物的使用需求。本专利技术的另一目的是提供一种上述双黄酮-镍配合物的制备方法。本专利技术还有一目的是提供双黄酮-镍配合物的应用。技术方案:为实现上述专利技术目的，本专利技术的技术方案为：双黄酮-镍配合物，其特征在于，结构式如下：X为NO3-或Cl-。一种制备所述双黄酮-镍配合物的方法：将镍盐用醇溶解后加入到双黄酮的醇溶液中，控制pH为5-7，加热搅拌，反应2-5h，有沉淀产生，将沉淀过滤，用醇和水洗涤后用二甲亚砜作为溶剂重结晶，干燥，得双黄酮-镍配合物。所用双黄酮为穗花杉双黄酮，但不局限于穗花杉双黄酮，泛指具有5-OH和4-C＝O或5”-OH和4”-C＝O的双黄酮类化合物。所用镍盐为硝酸镍、氯化镍等醇溶性镍盐。所用溶剂为乙醇、甲醇及不同浓度的甲醇、乙醇水溶液等。用碱的醇溶液调节pH值，所用碱包括氢氧化钠、氢氧化钾、氨水、乙醇钠、甲醇钠等常用碱类。反应时，加热温度为30-50℃，反应时间为2-5h。溶液中双黄酮与镍离子摩尔比为2-2.5：1。重结晶所用溶剂为二甲亚砜，干燥方法为冷冻干燥、低温真空干燥等。所述的双黄酮-镍配合物在制备抗肿瘤药物和/或抗氧化药物中的应用。有益效果：与现有技术相比，本专利技术首次合成得到了穗花杉双黄酮-镍配合物，采用MTT法研究了Ame-Ni配合物的抗肿瘤活性，结果表明，Ame-Ni配合物抑制肝癌细胞(HepG2)和宫颈癌细胞(HeLa)的能力强于Ame本身，紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和粘度法表明Ame-Ni配合物抗肿瘤活性的机理是配合物与嵌入式插入DNA，引起细胞凋亡。邻苯三酚自氧化法、ABTS法显示Ame-Ni配合物清除自由基能力强于Ame本身，说明配合物的抗氧化活性强于Ame；有利于进一步开发双黄酮类化合物，为新药研究提供依据，有利于人类健康事业的发展。附图说明图1是Ame和Ame-Ni配合物的红外光谱谱图；图2是Ame和Ame-Ni配合物的紫外-可见吸收光谱谱图；图3是Ame质谱图；图4是Ame-Ni配合物的质谱图；图5是Ame和Ame-Ni配合物对HepG2细胞的抑制作用结果图；图6是Ame和Ame-Ni配合物对HeLa细胞的抑制作用结果图；图7是fDNA对Ame紫外-可见吸收光谱的影响结果图；图8是fDNA对Ame-Ni配本文档来自技高网...

【技术保护点】
双黄酮‑镍配合物，其特征在于，结构式如下：

【技术特征摘要】
1.双黄酮-镍配合物，其特征在于，结构式如下：X为NO3-或Cl-。2.一种制备权利要求1所述双黄酮-镍配合物的方法，其特征在于：将镍盐用醇溶解后加入到双黄酮的醇溶液中，控制pH为5-7，加热搅拌，反应2-5h，有沉淀产生，将沉淀过滤，用醇和水洗涤后用二甲亚砜作为溶剂重结晶，干燥，得双黄酮-镍配合物。3.根据权利要求2所述制备双黄酮-镍配合物的方法，其特征在于，所用双黄酮为穗花杉双黄酮。4.根据权利要求2所述制备双黄酮-镍配合物的方法，其特征在于，所用镍盐为硝酸镍、氯化镍。5.根据权利要求2所述制备双黄酮-镍配合物的方法，其特征在于，所用溶剂为甲醇、乙醇及它...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹福亮，杨世龙，徐莉，唐颖，周梦怡，卢雯，赵俸艺，蒋国斌，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32