一种新的羊毛甾烷型三萜化合物及其制备方法和医药用途技术

本发明专利技术公开了一种新的羊毛甾烷型三萜化合物及其制备方法和医药用途。该化合物为首次报道，是一种结构新颖的羊毛甾烷型三萜类化合物，可以从干燥的野马追中提取、分离纯化得到。本研究证实该化合物对破骨细胞的分化及增殖具有抑制作用，且存在浓度依赖关系。应用化合物(Ⅰ)治疗以破骨细胞活性增强为主的骨破坏性疾病有可能成为一种有前景的治疗方法，可以用来开发成治疗骨破坏性疾病的药物。

A new steroidal terpene type three terpene compound, preparation method and medical use thereof

The present invention discloses a new steroidal terpene type three terpene compound, a preparation method and a medical use thereof. This compound was first reported to be a novel terpenoid type terpenoid of three, which can be extracted, isolated and purified from dry wild horse. The present study demonstrated that the compound inhibited the differentiation and proliferation of osteoclasts, and there was a concentration dependent relationship between them. The use of compounds (I) to treat bone destruction characterized by increased osteoclast activity may be a promising therapeutic approach for the development of drugs for the treatment of bone destructive diseases.

【技术实现步骤摘要】
一种新的羊毛甾烷型三萜化合物及其制备方法和医药用途
本专利技术属于药物
，具体涉及从干燥的野马追中分离得到的一种具有治疗骨破坏性疾病作用的羊毛甾烷型三萜类化合物及其制备方法。
技术介绍
野马追是菊科植物轮叶泽兰EupatoriumlindleyanumDC.的干燥地上部分，又名白鼓钉(《江苏南部种子植物手册》)、化食草(《杭州药用植物志》)、毛泽兰(《内蒙古植物志》)，产于江苏、甘肃、山东、湖南等地。其味苦，性平，归肝、脾经，具有化痰止咳、清热解毒、利尿消肿、降压的功能，用于治疗感冒、咳嗽多痰、头疼、扁桃体炎、细菌性痢疾、高血压、慢性气管炎、支气管炎等。其枝叶入药有解表祛湿、和中化湿之效，用于劳伤咳嗽、吐血咳血以及淋浊白带、无名肿痛等证的治疗。迄今为止，从野马追植物中发现的化学成分类型主要包括倍半萜类、黄酮类、三萜类、挥发油类、有机酸类及其他类成分，其中以倍半萜类化合物的研究最多。迄今为止，已得到的倍半萜类化合物主要为愈创木烷型和吉马烷型，此外还有少量的杜松烷型和桉烷型倍半萜类。药理作用研究表明，野马追提取物具有抗炎、抗菌、降血脂以及保护急性肺损伤、止咳、平喘等作用。野马追广泛应用于临床，主要包括片剂、颗粒剂、糖浆剂等制剂品种，还有以野马追为君药的复方野马追颗粒、胶囊等产品，主要用于治疗慢性气管炎、支气管炎、高血压等症。通过对临床应用的观察发现，野马追注射液治疗钩端螺旋体病具有退热显著、缓解症状快、治愈时间短的特点。同时，野马追糖浆用于治疗小儿咳喘性疾病也安全、有效。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从干燥的野马追中分离得到的一种具有治疗骨破坏性疾病作用的羊毛甾烷型三萜类化合物及其制备方法。本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将干燥的野马追粉碎，用80～90％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体积，再用80％乙醇洗脱8个柱体积，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中80％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、50:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8～10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)。进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为85％。一种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物(Ⅰ)和药学上可接受的载体。所述的化合物(Ⅰ)在制备治疗骨破坏性疾病的药物中的应用。所述的药物组合物在制备治疗骨破坏性疾病的药物中的应用。本专利技术化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有治疗有效量的本专利技术化合物(Ⅰ)，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本专利技术的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本专利技术药物可通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。附图说明图1为化合物(Ⅰ)结构式；图2为化合物(Ⅰ)理论ECD值与实验ECD值比较。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此限定本专利技术保护范围。尽管参照较佳实施例对本专利技术作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。实施例1：化合物(Ⅰ)分离制备及结构确证试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。制备方法：(a)将干燥的野马追(8kg)粉碎，用85％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇(3L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(359g)和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体积，再用80％乙醇洗脱8个柱体积，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱物浸膏(138g)；(c)步骤(b)中80％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(8个柱体积)、50:1(8个柱体积)、35:1(6个柱体积)、15:1(8个柱体积)和1:1(5个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4(32g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1(8个柱体积)、15:1(10个柱体积)和5:1(6个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2(17g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)(29mg)。结构确证：白色针状结晶；HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z535.2712，结合核磁特征可得分子式为C30H40O7，不饱和度为11。核磁共振氢谱数据δH(ppm，DMSO-d6，600MHz)：H-1(1.57，m)，H-1(1.85，m)，H-2(2.21，m)，H-2(2.37，m)，H-5(1.79，m)，H-6(2.74，m)，H-6(3.02，m)，H-12(2.71，m)，H-12(2.89，m)，H-15(5.63，m)，H-16(6.25，m)，H-17(1.90，m)，H-18(1.11，s)，H-19(1.26，s)，H-20(1.78，m)，H-21(0.98，d，J＝6.3)，H-22(2.27，m)，H-22(2.61，m)，H-24(2.52，m)，H-24(3.15，m)，H-25(3.24，m)，H-27(1.26，d，J＝7.2)，H-28(3.61，d，J＝10.5)，H-28(3.78，d，J＝10.5)，H-29(1.17，s)，H-30(1.21，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，DMSO-d6，150MHz)：37.1(CH2，1-C)，34.3(CH2，2-C)，215.9(C，3-C)，52.5(C，4-C)，43.8(CH，5-C)，37.7(CH2，6-C)，202.6(C，7-C)，151.4(C，8-C)，149.2(C，9-C)，38.7(C，10-C)，201.8(C，11-C)，52.5(CH2，12-C)，46.2(C，本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，

【技术特征摘要】
1.具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，2.权利要求1所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，其特征在于包含以下操作步骤：(a)将干燥的野马追粉碎，用80～90％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体积，再用80％乙醇洗脱8个柱体积，收集80％乙醇洗脱液，减压浓缩得80％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中80％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、50:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1...

【专利技术属性】
技术研发人员：李玉林，陈涛，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：青海,63