用于微粒递送锌原卟啉的制剂制造技术

本发明专利技术提供了涉及生物相容递送锌原卟啉(ZnPP)的制剂及其使用方法。在一些实施方案中，将所述ZnPP配制用于口服递送。制剂可包含ZnPP微粒，其中将所述ZnPP活性剂与药学上可接受的稳定剂混合或用药学上可接受的稳定剂涂布，以提供对酸性条件增加的稳定性和在中性pH增加的溶解性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请本申请请求保护于2014年2月3日提交的美国临时专利申请序列号61/935,200的优先权权益，将其全部内容引入本文作为参考。政府支持本专利技术是基于美国国立卫生研究院授予的契约TW008781在政府支持下完成的。美国政府具有本专利技术一定的权利。
技术介绍
金属卟啉是血红素的结构类似物且对它们在处理新生儿高胆红素血症和其他病症中的潜在用途已经进行了大量研究，持续超过三十年。使用这类化合物来控制胆红素水平的药理学基础是通过竞争性抑制血红素加氧酶(HO)靶向阻止胆红素生成，所述血红素加氧酶是胆红素生成途径中的限速酶。目前的研究继续通过限定用于治疗过度新生儿高胆红素血症的治疗窗和靶向干预来寻求鉴定安全且有效的金属卟啉。HO酶以组成型(HO-2)和诱导型(HO-1)亚型存在。血红素加氧酶是代谢性酶，其利用NADPH和氧来分裂血红素部分，从而释放胆绿素、一氧化碳(CO)和铁。胆绿素(BV)和胆红素(分别是胆绿素还原酶的底物和产物)是有效的抗氧化剂。HO-1在细胞内环境稳定中的作用包括充当细胞应激的重要“感受器”和限制或预防组织损伤的直接贡献者的特征；参与产生在对应激的细胞适应中的HO活性。HO-1路径及其产物的药理学处理可用于提供针对以氧化应激和炎症为特征的各种病症的保护。锌原卟啉(ZnPP)是在血红素生物合成中以痕量形成的正常代谢产物。血红素的生物合成途径中的最终反应是铁与原卟啉的螯合。在铁不足或所用铁被削弱期间，锌成为亚铁螯合酶的另一金属底物，从而增加ZnPP的形成。证据表明，这一金属取代是对铁衰竭的第一生物化学响应中的一种，导致增加的ZnPP出现在循环的红细胞中。因为这一锌-对-铁的替代主要发生在骨髓中，因此红细胞中ZnPP/血红素的比率反映出骨髓中铁的状态。此外，ZnPP可通过HO的竞争性抑制来调节血红素的分解代谢，所述HO是产生胆红素和CO的血红素降解途径中的限速酶。在临床上，ZnPP量化作为用于评估铁营养和代谢的灵敏且特异性的工具是有价值的。诊断测定适用于各种临床情况，包括儿科、产科和血库。ZnPP具有用于治疗新生儿黄疸和其他病症的一些所需特性：其是高度有效的；其无需穿过血脑屏障(BBB)；其对光活化是相对惰性的并因此在体内没有光敏化/光毒效应；且其不会被HO降解。但是，该化合物的递送是困难的。本专利技术解决了这个问题。
技术实现思路
本专利技术提供了涉及生物相容的递送有效剂量的锌原卟啉(ZnPP)的制剂及其使用方法。在一些实施方案中，将所述ZnPP配制用于口服递送。这些制剂提供了ZnPP微粒，其中所述ZnPP活性剂涂覆有药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，提供了治疗组合物，其包含含有ZnPP的包衣微粒和药学上可接受的赋形剂。所述治疗组合物可配制用于口服给药，包括但不限于通过胃管等例如作为液体给药至新生儿和婴儿。本文所述微粒包含所述ZnPP活性剂和药学上可接受的稳定剂，例如，其中所述活性剂可以是总微粒重量的至少约5％，且优选不超过总微粒重量的约50％。所述稳定剂可防止所述活性剂在低pH下(例如，存在于胃中的酸性条件)不稳定。所述稳定剂还可以增加所述活性剂在中性pH的溶解度，例如，提高在存在于肠的中性条件下的吸收。可将所述微粒混悬于药学上可接受的载体中，以提供充分浓缩的制剂来递送在合理的制剂体积中的所需剂量的活性剂。载体包括药学上可接受的赋形剂，包括水性赋形剂。这种组合物可以单位剂量制剂提供，例如，包含一定剂量的微粒ZnPP以用于给药至患者。所述单位剂量通常还将进一步包含赋形剂，例如，提供用于增强稳定性和溶解性的赋形剂。在某些实施方案中，有效剂量的活性剂是指当提供给患者时，有效抑制诱导型血红素加氧酶(HO-1)、但比其抑制组成型血红素加氧酶(HO-2)的程度要高、优选基本上不抑制组成型血红素加氧酶(HO-2)的剂量。在某些实施方案中，相对于不存在用本文所述组合物或方法进行治疗的对照而言，有效剂量刺激在婴儿或新生儿中增加了胆红素降解。也提供了用本文所述的制剂和组合物进行治疗的方法。在一些实施方案中，提供了用ZnPP治疗高胆红素血症的方法，其包括向有此需要的个体给药有效剂量的本文所述ZnPP的微粒制剂的步骤。更具体地，所公开的实施方案包括在婴儿中治疗高胆红素血症或其症状的方法。在一些实施方案中，所述婴儿是约35周至约43周的胎龄。在其他实施方案中，所述婴儿的年龄不超过30天。在一些实施方案中，所述婴儿具有约2,500g的最小出生体重。在一些实施方案中，所述婴儿具有约1,700g至约4,000g的出生体重。在一些实施方案中，所述婴儿具有至少一种危险因素，例如，溶血性疾病、ABO血型不相容、抗-C Rh不相容、抗-c Rh不相容、抗-D Rh不相容、抗-E Rh不相容、抗-e Rh不相容、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏，或其任意组合。在一些实施方案中，本文所述的ZnPP制剂在选自以下的时间进行给药：出生约6小时内、出生约12小时内、出生约24小时内和出生约48小时内。在一些实施方案中，所述ZnPP制剂通过口服给药。一些实施方案还包括在给药所述ZnPP制剂后测定治疗后总胆红素水平。在一些实施方案中，治疗后总胆红素水平在向所述婴儿给药治疗量的ZnPP制剂后24小时为基线总胆红素(TB)水平以下至少5％。在一些实施方案中，治疗后TB水平在向所述婴儿给药治疗量的ZnPP制剂后48小时为基线TB水平以下至少10％。在一些实施方案中，治疗后TB水平在向所述婴儿给药治疗量的ZnPP制剂后72小时为基线TB水平以下至少20％。在一些实施方案中，治疗后TB水平在向所述婴儿给药治疗量的ZnPP制剂后48小时为超过基线TB水平不到3mg/dL。还发现本文所述制剂用于其他方法，其中需要递送有效剂量的ZnPP。在一些实施方案中，提供了治疗癌症的方法。HO-1已经显示出涉及促癌活性。通过抑制HO，本文所述ZnPP制剂在单独或与化学疗法或放射疗法组合时可在例如治疗实体瘤(如癌等)中发挥抗肿瘤活性。其他方法包括，但不限于，在各种需要选择性抑制HO的病症中治疗年龄相关性黄斑变性、治疗感染等。还发现，本文所述的组合物能用作NMR成像的造影增强剂。附图说明图1提供了血红素降解途径的示意图。胆红素生成的减少可通过抑制血红素加氧酶(HO)(其为血红素降解途径中的限速酶)而被靶向。血红素被HO降解以产生等摩尔量的一氧化碳(CO)和胆绿素，然后将所述胆绿素立即用胆绿素还原酶降解以形成胆红素。图2包括三组((A)、(B)和(C))，其显示了光毒性研究的实验装置。以3.75-30μmol/kg体重(BW)范围内的剂量向3日龄的幼鼠(在组(A)中放大)腹腔给药载剂或Mp，并然后将其暴露于荧光3小时，所述荧光由2个冷白光和1个蓝光管组成(如组(B)所示)，其发射35.0±1.0μW/cm2/nm的辐照，由BiliBlanket II Meter测量(如组(C)所示)。图3描述了总结ZnBG的安全性和有效性的数据。向暴露于光的3日龄幼鼠给药3.75μmol ZnBG/kg BW，其显示出无光毒性，正如100％的存活率(空心栏)和高达75％的抑制HO活性(实心栏)所示。图4描述了在与各种锌制剂接触后HO活性的体外抑制。使用从3日龄幼鼠中采集本文档来自技高网...

【技术保护点】
微粒，其包含：ZnPP和药学上可接受的稳定剂，其中ZnPP的浓度为微粒重量的至少约5％。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.02.03 US 61/935,2001.微粒，其包含：ZnPP和药学上可接受的稳定剂，其中ZnPP的浓度为微粒重量的至少约5％。2.权利要求1的微粒，其中ZnPP在该微粒中的浓度为微粒重量的约5％至约50％。3.权利要求1或2的微粒，其中相比于仅有ZnPP，所述微粒在酸性条件下具有增加的稳定性。4.权利要求3的微粒，其中相比于仅有ZnPP，所述微粒对酸性条件更加稳定至少10％。5.权利要求3的微粒，其中所述微粒对酸性条件的稳定性是仅有ZnPP时的2倍。6.权利要求1-5中任一项的微粒，其中相比于仅有ZnPP，所述微粒在中性pH具有增加的溶解性。7.权利要求6的微粒，其中相比于仅有ZnPP，所述微粒在中性pH的溶解性大至少10％。8.权利要求6的微粒，其中所述微粒在中性pH的溶解性是仅有ZnPP时的至少2倍。9.权利要求1-8中任一项的微粒，其中所述微粒基本上由ZnPP和药学上可接受的稳定剂组成。10.权利要求1-9中任一项的微粒，其中所述微粒具有约10nm至约10μm的直径。11.权利要求1-9中任一项的微粒，其中所述微粒具有约100nm至约5μm的直径。12.权利要求1-11中任一项的微粒，其中所述稳定剂是海藻酸盐、壳聚糖、卵磷脂、泊洛沙姆、三偏磷酸钠、阳离子脂质、蛋白质、油、聚乙烯吡咯烷酮或其组合。13.权利要求1-11中任一项的微粒，其中所述稳定剂是阳离子脂质或阳离子脂质的混合物。14.权利要求13的微粒，其中所述阳离子脂质是DSPC、DPPC、DOTIM、DDAB、DOTMA、DMRIE、EDMPC、DCChol、DOGS、MBOP，或其任意组合。15.权利要求1-11中任一项的微粒，其中ZnPP的浓度为微粒重量的约10％至约25％，且所述稳定剂是DSPC和DPPC的混合物。16.权...

【专利技术属性】
技术研发人员：DK史蒂文森，J拉贾达斯，C埃斯帕达斯，RJ黄，D莱丘加，
申请(专利权)人：里兰斯坦福初级大学理事会，DK史蒂文森，J拉贾达斯，C埃斯帕达斯，RJ黄，D莱丘加，
类型：发明
国别省市：美国;US