一种含有辣椒碱类化合物的食用油标准物质制备方法技术

本发明专利技术公开了一种含有辣椒碱类残留的食用油标准物质的制备方法。通过逐步稀释混匀的方法，均匀添加辣椒碱类化合物至大豆油中，获得含有痕量辣椒碱类残留的食用油基体标准物质。以液相色谱同位素稀释质谱法的高准确度测量进行均匀性检验和稳定性监测，以及标准物质的赋值。该标准物质具有良好的均匀性和稳定性，可用于食用油中辣椒碱类化合物的检测，以及地沟油初步筛查鉴别工作，作为标准物质可用于校准计量器具和评价测量方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食用油中掺假鉴别
，特别涉及一种含有辣椒碱类化合物的食用油标准物质的制备方法。
技术介绍
辣椒中的辛辣成分是由一系列同类物质组成，它们的结构和性质非常相近，称为辣椒素类物质，又名辣椒碱类物质(Capsaicinoids)，均是由香草基胺和含有8～13个C组成的支链脂肪酸(酰基部分)构成的化合物。在目前已知的大约19种辣椒素类物质中辣椒素(Capsaicins)、二氢辣椒素(Dihydrocapsaicins)和降二氢辣椒素(Nordihydrocapsaicin)是辣椒中含量最高的三种化合物，是辣椒中的主要活性成分，也是辣椒中辣味的主要来源。此外，壬酸香草酰胺，又名合成辣椒素(N-Vanillylnonanamide，Nonylic acid vanillylamide)，虽然在天然辣椒中含量很低，但是由于经人工合成后作为常用的辣味调料深受国内外用户的采用和好评，也是重要的辣椒素类物质。图1为一般常见辣椒碱类化合物的分子结构图。正常食用油中基本不含辣椒碱，而作为地沟油主要来源的泔水油，如果在烹饪的过程中接触了辣味调料，则不可避免的含有辣椒碱成分。由于辣椒碱本身的亲脂性、稳定性和高沸点，很难从地沟油中清除干净，因此可以作为鉴别地沟油的特异性指标。目前，针对地沟油中辣椒碱成分含量的液相色谱-质谱检测方法已有报道，王龙星等采用固相萃取-液相色谱-串联质谱技术，以二苯胺作为进样内标，建立了食用油中3种微量辣椒碱(辣椒素、二氢辣椒素及壬酸香草酰胺)的检测方法。张忠等建立了地沟油中辣椒碱类化合物(包括辣椒素、二氢辣椒素、合成辣椒素)及丁香酚的液-液萃取-液相色谱-串联质谱检测
方法。吴惠勤等同样建立了液-液萃取-高效液相色谱-串联质谱同时测定地沟油中辣椒素、二氢辣椒素及胡椒碱3种难挥发性微量杂质成分的方法。目前文献报道的关于地沟油中辣椒碱类物质的鉴别限为2.0μg/kg，其残留水平属于痕量残留，检测结果的准确性需要得到保障。然而，目前关于食用油中痕量辣椒素的检测，没有国家标准方法，没有标准物质，检测结果的准确性无法保障。标准物质在保证分析方法的准确性及可溯源性方面具有重要作用。分析基体的差异使得在分析过程中不能简单地采用传统的高纯度溶液标准物质来校准或进行质量控制，需要采用相应基体的标准物质以提高检测结果的准确度。与传统的高纯度溶液标准物质相比，含有辣椒碱类物质的大豆油标准物质具有量值溯源性，对仪器的校准、检测实验室的质量控制、食用油中辣椒碱类的检测方法的开发等具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术提供一种含有辣椒碱类化合物的食用油标准物质制备方法，用以解决食用油掺假鉴别中对标准物质的需求。一种含有辣椒碱类化合物的食用油标准物质制备方法包括：标物原料筛查：采用LC-MS/MS方法，对市售的各品牌食用植物油中的辣椒碱类物质等进行筛查，选取不含辣椒碱类物质的空白大豆油作为标准物质研制原材料；标准物质添加制备：采用逐步添加法，具体包括：1)称取辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素3种标准物质适量，加入约1200g大豆油中，旋转混匀24小时，得到各辣椒碱组分浓度为4μg/kg的大豆油；2)称取步骤1)中大豆油适量，缓慢加入2000g空白大豆油，加入空白大豆油过程中保持不断搅拌，旋转混匀24小时，得到各辣椒碱组分浓度为1.1μg/kg的大豆油；标准物质分装：氮气保护条件下分装于40mL棕色样品瓶中，每瓶约20
mL，不透明包装袋真空密封包装；充氮保护时，氮气流量为10psi。所述方法还包括：标准物质保存：0-4℃条件下避光保存。本专利技术实施例中，通过逐步稀释混匀的方法，均匀添加辣椒碱类化合物至大豆油中，获得含有痕量辣椒碱类残留的食用油基体标准物质。以液相色谱同位素稀释质谱法的高准确度测量进行均匀性检验和稳定性监测，以及标准物质的赋值。该标准物质具有良好的均匀性和稳定性，可用于食用油中辣椒碱类化合物的检测，以及地沟油初步筛查鉴别工作，作为标准物质可用于校准计量器具和评价测量方法。本专利技术的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本专利技术而了解。本专利技术的目的和其他优点可通过在所写的说明书、说明书附图、权利要求书中所特别指出的结构来实现和获得。下面结合附图，通过实施例，对本专利技术的技术方案做进一步的详细描述。附图说明附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。在附图中：图1为辣椒碱类化合物的分子结构图；图2为辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素3种辣椒碱类化合物及其同位素的LC-MS/MS的MRM谱图。具体实施方式以下对本专利技术的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。正常食用油中基本不含辣椒碱，而作为地沟油主要来源的泔水油，如果在烹饪的过程中接触了辣味调料，则不可避免的含有辣椒碱成分。目前，餐饮业
中广泛使用的辣味调料主要有两种，一种是天然辣椒，其主要辣味成分为辣椒素和二氢辣椒素，两者含量占辣椒中辣椒碱成分的90％以上，另一种为人工合成的壬酸香草酰胺(合成辣椒素)。由于辣椒碱本身的亲脂性、稳定性和高沸点，很难从地沟油中清除干净，因此可以作为鉴别地沟油的特异性指标。本实施例选择辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素鉴别地沟油的特异性指标，研制大豆油中辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素基体标准物质，用于保障地沟油筛查结果的准确可靠。标物原料筛查：采用LC-MS/MS方法，对市售的各品牌食用植物油中的辣椒碱类物质等进行筛查，选取不含辣椒碱类物质的空白大豆油作为标准物质研制原材料。标准物质添加制备：采用逐步添加法，具体包括：1)称取辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素3种标准物质适量，加入约1200g大豆油中，旋转混匀24小时，得到各辣椒碱组分浓度为4μg/kg的大豆油；2)称取步骤1)中大豆油适量，缓慢加入2000g空白大豆油，加入空白大豆油过程中保持不断搅拌，旋转混匀24小时，得到各辣椒碱组分浓度为1.1μg/kg的大豆油；标准物质分装：氮气保护条件下分装于40mL棕色样品瓶中，每瓶约20mL，不透明包装袋真空密封包装；充氮保护时，氮气流量为10psi。所述方法还包括：标准物质保存：0-4℃条件下避光保存。图2为辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素3种辣椒碱类化合物及其同位素的LC-MS/MS的MRM谱图。(一)均匀性检验。均匀性是标准物质的基本属性，用于描述标准物质特性的空间分布特征。在标准物质的研制(生产)过程中必须进行均匀性评估，以证明其具有良好的均匀性。均匀性的检测方法：工作曲线用标准溶液配制：分别准确称取4种辣椒碱标准品和2种同位素内标(精确至0.01mg)适量，甲醇-水(1∶1，v/v)溶解，配制成含量约为1000μg/kg的标准储备液，置于-20℃冰箱中保存。使用时甲醇-水(1∶1，v/v)稀释配制成相应浓度的标准溶液。前处理用同位素标记物标准溶液配制：分别称取2种同位素内标(精确至0.01mg)适量，乙酸乙酯溶解，配制成含量约为1000μg/kg的标准储备液，置于-20℃冰箱中保存。使用时乙酸乙酯稀释配制成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有辣椒碱类化合物的食用油标准物质制备方法，其特征在于，包括：标物原料筛查：对市售的各品牌食用植物油中的辣椒碱类物质等进行筛查，选取不含辣椒碱类物质的空白大豆油作为标准物质研制原材料；标准物质添加制备：采用逐步添加法，具体包括：1)称取辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素3种标准物质适量，加入约1200g大豆油中，旋转混匀24小时，得到各辣椒碱组分浓度为4μg/kg的大豆油；2)称取步骤1)中大豆油适量，缓慢加入2000g空白大豆油，加入空白大豆油过程中保持不断搅拌，旋转混匀24小时，得到各辣椒碱组分浓度为1.1μg/kg的大豆油；3)标准物质分装：氮气保护条件下分装于40mL棕色样品瓶中，每瓶约20mL，不透明包装袋真空密封包装。

【技术特征摘要】
1.一种含有辣椒碱类化合物的食用油标准物质制备方法，其特征在于，包括：标物原料筛查：对市售的各品牌食用植物油中的辣椒碱类物质等进行筛查，选取不含辣椒碱类物质的空白大豆油作为标准物质研制原材料；标准物质添加制备：采用逐步添加法，具体包括：1)称取辣椒素、二氢辣椒素和合成辣椒素3种标准物质适量，加入约1200g大豆油中，旋转混匀24小时，得到各辣椒碱组分浓度为4μg/kg的大豆油；2)称取步骤1)中大豆油适量，缓慢加...

【专利技术属性】
技术研发人员：国振，李秀琴，张庆合，李红梅，
申请(专利权)人：中国计量科学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11