异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法技术

本发明专利技术公开了异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法，它包括以下步骤：a、制备异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液；b、取供试品溶液、对照品溶液；c、采用正相高效液相色谱对供试品溶液、对照品溶液分别进行检测；d、计算供试品中2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的含量。本发明专利技术异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法，既解决了供试品溶液的制备问题，又实现了互为异构体化合物之间的完全分离，化合物之间的分离度高。本发明专利技术还提供了异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液及其制备方法。

【技术实现步骤摘要】
异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法
本专利技术涉及异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法。
技术介绍
2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(如式Ⅰ所示)是一种重要的合成中间体，可以用于合成利伐沙班。2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(如式Ⅱ所示)是2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的对映异构体。一般情况下，2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮产品中不可避免地会存在有2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮等杂质化合物，检测其中的杂质化合物对于2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮产品以及利伐沙班的质量控制具有重要的意义。高效液相色谱是一种常用的检测方法，它分为反相高效液相色谱、正相高效液相色谱：反相高效液相色谱：采用非极性或相对极性较弱的固定相，以极性较强的溶剂作为流动相，常用于分离、检测非极性和极性较弱的化合物；反相高效液相色谱在现代液相色谱中的应用最为广泛，据统计，它占整个高效液相色谱应用的80％左右。正相高效液相色谱：采用极性固定相，以相对极性较弱的溶剂作为流动相，常用于分离、检测中等极性和极性较强的化合物。然而，采用高效液相色谱对2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮产品进行检测却面临两难的境地：(1)选用反相高效液相色谱，难以实现2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮与2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的完全分离，造成检测结果不准确；(2)选用正相高效液相色谱，由于2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮不溶于相对极性较弱的溶剂，也根本无法实施。现有技术中，也未见报道有2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮产品的检测方法，给利伐沙班生产过程的质量控制造成了极大的困难。因此，亟需建立一种检测方法，对2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮产品的质量进行监控。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法。本专利技术提供的异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法，它包括以下步骤：a、制备异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液：取异吲哚二酮类化合物，加入乙醇，于40℃～70℃下溶解，溶解后冷却至室温，得到异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液；异吲哚二酮类化合物选自2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮、2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮中的任意一种；b、取步骤a制备的2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的乙醇溶液，作为供试品溶液；取步骤a制备的2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的乙醇溶液，作为对照品溶液；c、采用正相高效液相色谱对步骤b的供试品溶液、对照品溶液分别进行检测：色谱柱的填料：表面涂敷有纤维素-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯)的硅胶；流动相：正己烷-乙醇，正己烷与乙醇的体积比为20％：80％～60％：40％；检测波长为210nm～270nm；d、按外标法以峰面积计算供试品中2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的含量。进一步的，步骤a中，乙醇为色谱纯乙醇；溶解的时间为30分钟以上。进一步的，步骤b中，供试品溶液的浓度为0.05mg/ml～1mg/ml；对照品溶液的浓度为0.05μg/ml～2μg/ml。进一步的，步骤c中，色谱柱的规格为：长度为250mm，内径为4.6mm，填料粒径为5μm。进一步的，步骤c中，色谱柱的型号为CHIRALCELOD-H。进一步的，步骤c中，正己烷与乙醇的体积比为40％：60％～50％：50％。进一步的，步骤c中，流动相中还包括二乙胺，二乙胺的用量为流动相体积的1％～3％。进一步的，步骤c中，柱温为10℃～40℃；流速为0.5ml/min～1.5ml/min；检测波长为220nm～221nm；进样量为20μl。采用正相高效液相色谱对异吲哚二酮类化合物进行检测，首先需要解决供试品溶液的制备问题，也就是说，需要筛选出合适的溶剂将异吲哚二酮类化合物溶解。本专利技术意外的发现，异吲哚二酮类化合物只有在乙醇中升温至40℃～70℃条件下，才可以将其溶解，而且冷却至室温后，仍为溶解状态，不会析出固体，取得了预料不到的技术效果。本专利技术提供的异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液的制备方法，它包括以下步骤：取异吲哚二酮类化合物，加入乙醇，于40℃～70℃下溶解，溶解后冷却至室温，得到异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液；异吲哚二酮类化合物与乙醇的重量体积比为0.00005mg/ml～1mg/ml；异吲哚二酮类化合物选自2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮、2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮中的任意一种或两种；乙醇为色谱纯乙醇；溶解的时间为30分钟以上。本专利技术还提供了异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液。本专利技术提供的异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液，它是由异吲哚二酮类化合物和乙醇组成；异吲哚二酮类化合物与乙醇的重量体积比为0.00005mg/ml～1mg/ml；异吲哚二酮类化合物选自2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮、2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮中的任意一种或两种；乙醇为色谱纯乙醇。本专利技术异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法，既解决了供试品溶液的制备问题，又实现了互为异构体化合物之间的完全分离，化合物之间的分离度高，检测结果准确、可靠，具有操作简便、分析时间短等优点。本专利技术还提供了异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液及其制备方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法，其特征在于：它包括以下步骤：a、制备异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液：取异吲哚二酮类化合物，加入乙醇，于40℃～70℃下溶解，溶解后冷却至室温，得到异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液；异吲哚二酮类化合物选自2‑[(2R)‑2‑羟基‑3‑[[4‑(3‑氧代‑4‑吗啉基)苯基]氨基]丙基]‑1H‑异吲哚‑1,3(2H)‑二酮、2‑[(2S)‑2‑羟基‑3‑[[4‑(3‑氧代‑4‑吗啉基)苯基]氨基]丙基]‑1H‑异吲哚‑1,3(2H)‑二酮中的任意一种；b、取步骤a制备的2‑[(2R)‑2‑羟基‑3‑[[4‑(3‑氧代‑4‑吗啉基)苯基]氨基]丙基]‑1H‑异吲哚‑1,3(2H)‑二酮的乙醇溶液，作为供试品溶液；取步骤a制备的2‑[(2S)‑2‑羟基‑3‑[[4‑(3‑氧代‑4‑吗啉基)苯基]氨基]丙基]‑1H‑异吲哚‑1,3(2H)‑二酮的乙醇溶液，作为对照品溶液；c、采用正相高效液相色谱对步骤b的供试品溶液、对照品溶液分别进行检测：色谱柱的填料：表面涂敷有纤维素‑三(3,5‑二甲苯基氨基甲酸酯)的硅胶；流动相：正己烷‑乙醇，正己烷与乙醇的体积比为20％：80％～60％：40％；检测波长为210nm～270nm；d、按外标法以峰面积计算供试品中2‑[(2S)‑2‑羟基‑3‑[[4‑(3‑氧代‑4‑吗啉基)苯基]氨基]丙基]‑1H‑异吲哚‑1,3(2H)‑二酮的含量。...

【技术特征摘要】
1.异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法，其特征在于：它包括以下步骤：a、制备异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液：取2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮，加入乙醇，于40℃～70℃下溶解，溶解后冷却至室温，得到2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的乙醇溶液；取2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮，加入乙醇，于40℃～70℃下溶解，溶解后冷却至室温，得到2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的乙醇溶液；b、取步骤a制备的2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的乙醇溶液，作为供试品溶液；取步骤a制备的2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的乙醇溶液，作为对照品溶液；c、采用正相高效液相色谱对步骤b的供试品溶液、对照品溶液分别进行检测：色谱柱的填料：表面涂敷有纤维素-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯)的硅胶；流动相：正己烷-乙醇，正己烷与乙醇的体...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈明霞，
申请(专利权)人：成都百裕科技制药有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51