超临界二氧化碳制备纳米熊果苷脂质体的方法技术

本发明专利技术是一种利用超临界二氧化碳制备纳米熊果苷脂质体的方法，称取磷脂以及胆固醇，将其溶解于无水乙醇中。同时，称取熊果苷，将其溶解于去离子水中；将两者混合均匀后加入超临界反应釜中，控制温度和压力，并保压；泄压后即得熊果苷脂质体混悬液。本制备方法制备过程不使用有毒有机溶剂，对环境无污染，最终产物中无有毒溶剂残留；制备的熊果苷脂质体单分散性好；包封效果好，稳定性高；工艺简单，成本低廉，易于实现工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物制剂领域，具体涉及一种利用。技术背景熊果苷(arbutin)是从厚叶岩白菜、乌饭树、毛大丁草中熊果等植物中提取的天然活性物质，化学名称为对羟基苯-B-D-吡喃葡萄糖苷。熊果苷是源于绿色植物的天然活性物质，集“绿色植物、安全可靠”和“高效脱色”三者统一于一体的皮肤脱色组份，它能渗入肌肤，在不影响细胞增殖浓度的同时，能有效地抑制皮肤中的酪氨酸酶的活性，阻断黑色素的形成，通过自身与酪氨酶直接结合，加速黑色素的分解与排泄，从而减少皮肤色素沉积，祛除色斑和雀斑，而且对黑色素细胞不产生毒害性、刺激性、致敏性等副作用，同时还有杀菌、消炎的作用。它是当今流行的最为安全有效的美白原料，也是二十一世纪的理想皮肤美白祛斑活性剂。但熊果苷化妆品的皮肤透过吸收能力不甚理想，这严重影响了熊果苷化妆品的美白效率。 脂质体是由磷脂等类脂形成的双分子层的完全封闭的多层囊泡，其结构类似于细胞，可包封水溶性和脂溶性两种物质，具有靶向高效、缓释可控和安全无毒的特点。人的皮肤是由一层致密的细胞构成，细胞膜对大分子生物活性物质是不通透的。化妆品中的活性成分要达到营养、改善皮肤状况和预防皮肤疾病的功效，关键是活性物质必须透过角质层而达到相应的作用部位并维持一定时间。脂质体具有与生物膜相似结构，与膏剂等相比具有更大的皮肤角质层透过量，同时脂质体本身可生物降解，无毒性。研究表明脂质体能很快地进入皮肤深层，以脂质体包封的活性物质经皮吸收后可使更多活性物质留在表皮到真皮之间。此外含有脂质体的化妆品对皮肤有良好的保湿作用，即使在空载形式下，脂质体在皮肤深层仍可起到活化细胞和保留水分作用。脂质体同时还含有丰富的不饱和脂肪酸，可以减少多余脂肪和毒素在皮肤上的沉积，与未使用脂质体的护肤品相比，其护肤效力强几倍至几十倍。以上研究均表明脂质体在皮肤病防治和化妆品方面有良好的应用前景。Dior在1986年开发了第一个商品名为Capture的脂质体化妆品，它的问世标志着新一代化妆品的开始。目前脂质体的制备方法较多，常规的方法有薄膜分散法、逆向蒸发法、表面活性剂除去法、乙醇/乙醚注入法、乳化法以及PH梯度法等，这些制备方法均需要使用到大量对环境以及人体有害的有毒有机溶剂，例如氯仿、乙醚、氟利昂以及甲醇等。并且这些方法由于步骤过多，不适用于大规模工业化的生产。理想的脂质体制备方法应该具备以下特点:包封率高，粒径分布范围窄，稳定性好；目前脂质体的制备方法主要存在着稳定性低，成本高，残留有毒溶剂，以及包封率低等缺点；超临界二氧化碳流体是一种环境友好型溶剂，在制备结束后易于与产物分离且不造成环境污染，并具备优良溶剂的特性。近几年来，随着超临界二氧化碳流体技术的迅速发展，应用领域的不断扩大，其渐渐被应用于脂质体的制备中。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有熊果苷脂质体制备方法中存在的有毒有机溶剂残留，粒度单分散性不强，脂质体稳定性较差等缺陷，提供一种超临界二氧化碳制备无有毒溶剂残留，产物单分散性好，稳定性好熊果苷脂质体的方法。一种，其特征在于，具体步骤如下: (1)按照配方精确称取磷脂和胆固醇，将其加入无水乙醇中，制备成溶液，放入超声波震荡器中5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用；精确称取熊果苷，溶于去离子水中配置成熊果苷溶液； (2)将熊果苷溶液与脂质体膜材乙醇溶液混合均匀后置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中；控制压力和温度，保压； (3)孵化结束后，释放二氧化碳气体将体系压力降至常压，即得产品。所述胆固醇与磷脂的质量比为1:3-1:20。所述熊果苷与磷脂的质量比为1:2-1:30 ;其中熊果苷溶液浓度为0.2mg/ml-3mg/ml ο所述溶剂无水乙醇与磷脂的质量比为1:5-1:30。所述孵化温度为30_60°C ;孵化压强为15_30MPa ;孵化时间为30_50分钟。与传统制备脂质体的方法相比，超临界流体技术制备脂质体的优势主要体现在以下几个方面:1，环境友好，绿色，无毒，价廉；2，与传统制备方法相比，流程简单，粒径及包封率易于控制；3，在现行药品生产管理规范(CGMP)条件下有可能实现脂质体的工业化；4，制备过程条件温和，避免了在常规制备过程中的某些脂质和药物的降解。因此，采用超临界二氧化碳法制备熊果苷脂质体，制备过程不使用有毒有机溶剂，所制备的熊果苷脂质体粒径均一，稳定性好，增加了熊果苷的透皮效率，提高了美白效果，确保了脂质体的安全性，具有技术与应用的新颖性和创造性。与现有技术相比，本专利技术的特点和优点在于: (1)制备过程不使用有毒有机溶剂，对环境无污染，且最终产物中无有毒溶剂残留； (2)制备的熊果苷脂质体粒径分布均匀，单分散性好。包封率高，包封效果好，稳定性闻; (3)可以很方便的通过调节制备过程中的压力、温度等制备参数来控制熊果苷脂质体的粒径、包封率以及稳定性； (4)工艺简单，成本低廉，在现行药品生产管理规范(CGMP)条件下有可能实现熊果苷脂质体的工业化。【具体实施方式】下面通过实施例进一步说明本专利技术，而不是限制本专利技术的范围。实施例1: 按照配方精确称取0.060g磷脂和0.006g胆固醇(磷脂与胆固醇质量比为10:1)，将其加入770 μ I无水乙醇中(磷脂与无水乙醇质量比为1:10)，制备成溶液，放入超声波震荡器中超声5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用。精确称取0.012g熊果苷，溶于IOml去离子水中配置成熊果苷溶液(磷脂与熊果苷质量比为5:1)。将熊果苷溶液与脂质体膜材乙醇溶液混合均匀后置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应爸中。在20MPa、50°C的条件下保压40min后,释放二氧化碳气体将体系压力降至常压，即得熊果苷脂质体混悬液。该条件下制得的熊果苷脂质体平均粒径为198nm，包封率为31%。实施例2: 按照配方精确称取0.060g磷脂和0.012g胆固醇(磷脂与胆固醇质量比为5:1)，将其加入1.53ml无水乙醇中(磷脂与无水乙醇质量比为1:20)，制备成溶液，放入超声波震荡器中超声5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用。精确称取0.030g熊果苷，溶于IOml去离子水中配置成熊果苷溶液(磷脂与熊果苷质量比为2:1)。将熊果苷溶液与脂质体膜材乙醇溶液混合均匀后置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中。在30MPa、35°C的条件下保压45min后，释放二氧化碳气体将体系压力降至常压，即得熊果苷脂质体混悬液。该条件下制得的熊果苷脂质体平均粒径为232nm，包封率为28%。实施例3: 按照配方精确称取0.060g磷脂和0.020g胆固醇(磷脂与胆固醇质量比为3:1)，将其加入380 μ I无水乙醇中(磷脂与无水乙醇质量比为1:5)，制备成溶液，放入超声波震荡器中超声5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用。精确称取0.003g熊果苷，溶于IOml去离子水中配置成熊果苷溶液 (磷脂与熊果苷质量比为20:1)。将熊果苷溶液与脂质体膜材乙醇溶液混合均匀后置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种超临界二氧化碳制备纳米熊果苷脂质体的方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）按照配方精确称取磷脂和胆固醇，将其加入无水乙醇中，制备成溶液，放入超声波震荡器中5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用；精确称取熊果苷，溶于去离子水中配置成熊果苷溶液；（2）将熊果苷溶液与脂质体膜材乙醇溶液混合均匀后置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中；控制压力和温度，保压；（3）孵化结束后,释放二氧化碳气体将体系压力降至常压,即得产品。

【技术特征摘要】
1.一种超临界二氧化碳制备纳米熊果苷脂质体的方法，其特征在于，具体步骤如下: (1)按照配方精确称取磷脂和胆固醇，将其加入无水乙醇中，制备成溶液，放入超声波震荡器中5分钟，混合均匀后放入冰箱中待用；精确称取熊果苷，溶于去离子水中配置成熊果苷溶液； (2)将熊果苷溶液与脂质体膜材乙醇溶液混合均匀后置入超临界反应釜中，打开二氧化碳钢瓶，二氧化碳气体经冷机冷却成液体后，由高压泵加压后进入反应釜中；控制压力和温度，保压； (3)孵化结束后，释放二氧化碳气体将体系压力降至常压，即得产品。2.根据权利要求1所述一种超临界二氧化碳制备纳米熊果苷脂...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐少洪，赵斌，陈超，何丹农，
申请(专利权)人：上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：