一株抑制真菌的解淀粉芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种解淀粉芽孢杆菌（Bacillus?amyloliquefaciens）KB，保藏号为CGMCC?No.8179。所述解淀粉芽孢杆菌KB对桃采后褐腐病菌、苹果采后灰霉病菌、西红柿采后灰霉病菌和苹果采后青霉病菌具有抑制作用；对桃采后褐腐病、苹果采后灰霉病、西红柿采后灰霉病、苹果采后青霉病具有抑制作用。对桃褐腐病菌和苹果灰霉病菌的抑制作用最明显，抑菌圈直径分别为22mm和20mm，对桃褐腐病斑及苹果灰霉病病斑的抑制率达到100%。

【技术实现步骤摘要】
一株抑制真菌的解淀粉芽孢杆菌及其应用
一种抑制真菌的解淀粉芽孢杆菌及其应用，属于微生物应用
。
技术介绍
植物真菌病害给农业生产带来巨大损失，而果实采后真菌病害是一类重要的病害，造成了果实的大量减产，严重影响果实的食用价值和市场价值，导致了果农的经济收入降低。在发达国家，果实采摘后病害引起的损失量占果实总量的15%以上，在发展中国家由于缺少必要的防控技术和设备，果实采摘后病害引起的损失量占总量的30%以上。果实采摘后病害的发生已给现代农业生产尤其是高端果蔬产品的生产与加工造成了严重影响。由Monilinia spp.病原真菌引起的桃褐腐病目前在世界范围内都是桃子的第一大病害，也是影响桃产业发展的第一大问题。据统计，在发达国家如美国、以色列、意大利、法国等，采后褐腐病导致的损失量就占桃总产量的10%_30%;在发展中国家由于缺少必要的防治技术和相关设备，其损失量达30%-50%，甚至更高。有些地区，桃褐腐病的大面积严重发生，几乎导致桃果绝收。因此，对桃褐腐病的防治和控制显得更加迫切和重要。我国桃园面积超过900万亩，是世界上桃有效种植面积第一大国；年产桃超过40万吨，是世界上桃产量第一大国。北京桃产量位居国内前8名，仅北京平谷一地，桃种植面积就达22万亩(1.47万公顷)之多。桃产业已成为平谷县的经济支柱产业，一些桃子及相关加工产品已经出口到欧盟、日本等国家。2000年以来北京桃褐腐病大面积增加，且逐年加重；其中2005年发病较重的桃园，桃果受害，大量脱落，采摘时未见显症的果实，在采摘后2-3天，50%以上的果实因褐腐病侵染而腐烂，这给果农造成严重的经济损失。2012年北京市植保站桃褐腐病调查结果显示，北京各郊区县桃产区均有桃褐腐病发生，而且桃子在采后的运输和贮藏期间发病率都在30%以上。这大大降低了果实的食用价值和市场价值，严重影响了北京桃产业的发展。因此对桃采后褐腐病的有效防控与经济发展尤其是与果农的经济收入有着紧密联系。目前生产中对桃褐腐病的防治仍然以化防为主，但由此带来的“3R”负面影响非常严重。化学农药的大量使用严重破坏了生态环境，导致桃果实中大量的农药残留，影响人们身体健康。在北方桃产区，在桃子的采摘之前及采摘之后，对桃褐腐病的防治手段同样也是以化学农药为主，这不仅影响人民的身体健康，也限制了桃产品的加工与出口。我国已将发展生物农药和绿色食品列入了《中国21世纪议程》，北京现代农业科技城的建设要求北京市及周边地区作物病害实现绿色防控、农业产品实行绿色生产。芽孢杆菌(Bacillus spp.)在土壤中普遍存在，是存在于土壤和植物微生态系统中的优势微生物种群之一，由于产生内生芽孢，具有较强的抵抗外界环境压力的能力，能够抵抗所生存的环境中因干燥、热和紫外辐射所造成的伤害，维持自身生存能力不受影响。这个生物学特征使芽孢杆菌具有非常良好的应用前景，特别是在使用活菌制剂的生物制品中表现出强大的生命力。芽孢杆 菌种类繁多，数量巨大，能够产生多种多样的生理活性物质和代谢产物，具有广泛的工业应用前景。解淀粉芽孢杆菌在自然界中分布十分广阔，目前尚未有防治桃褐腐病的解淀粉芽孢杆菌的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),菌株 KB，保藏号为 CGMCC N0.8179。本专利技术的目的也在于提供一种病原菌抑制剂，其活性成分为上述解淀粉芽孢杆菌和/或其代谢物。本专利技术的目的也在于提供一种病害抑制剂，其活性成分为上述解淀粉芽孢杆菌和/或其代谢物。本专利技术所提供的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的菌株号为KB,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC N0.8179。所述述解淀粉芽抱杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)KB 的 16S rDNA 序列 SEQID N0.1 所示。所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) KB的形态学特征为:菌体细胞呈短杆状，直或近直，芽孢中生，柱状或椭圆形，具有运动性；在LB培养基上不产色素，菌落为白色不透明，扁平或圆形，无光泽，随着培养时间增长，菌落变厚变干，边缘不整齐，菌落上有裙皱，变为乳脂色。所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) KB的生理生化特征为革兰氏染色阳性，形成菌膜，甲基红、硝酸盐还原、乙酰甲基甲醇、吲哚反应、接触酶阳性，可水解明胶、尿素、纤维素、淀粉和七叶苷，氧化酶反应、分解酪氨酸阴性，产生硫化氢，利用柠檬酸盐，不利用丙二酸盐，精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶反应阳性，苯丙氨酸脱氨酶反应阴性，葡萄糖、蔗糖产酸产气，可利用葡萄糖、麦芽糖、山梨醇、鼠李糖、菊糖、半乳糖、肌醇、木糖、甘露糖、甘露醇、核糖、蔗糖等，不利用阿拉伯糖和山梨糖。所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) KB于含有1%_7% (质量含量)氯化钠的培养基中均可正常生长，于含有10% (质量含量)氯化钠的培养基中不可生长，于pH4.5-9.0的培养基中均可正常生长，在PH4.0下生长势弱，pH9.5下不可生长，在环境温度为4°C下生长势弱，在55°C -80°C下处理15min，仍可正常生长。所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens) KB产嗜铁素、纤维素酶、蛋白酶和几丁质酶，这些都是生防菌的关键性生防指标。本专利技术的目的还在于提供上述解淀粉芽孢杆菌和/或其代谢物在抑制病原菌、制备病原菌抑制剂、抑制病害、制备病害抑制剂中的应用。所述病原菌为下述至少一种:A、桃采后褐腐病菌；B、苹果采后灰霉病菌；C、西红柿米后灰霉病囷；D、平果米后青霉病囷；所述病害为下述至少一种:A、桃采后褐腐病；[0021 ] B、平果米后灰霉病；C、西红柿采后灰霉病；D、苹果米后青霉病。 其中，所述桃米后褐腐病菌可为Monilinia fructicola或Monilinia Iaxa或Monilinia fructigena ;所述苹果采后灰霉病菌为Botrytis cinerea ;所述西红柿采后灰霉病菌为Botrytis cinerea ;所述苹果采后青霉病菌为Penicillium expansum。所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) KB的代谢物可从所述解淀粉芽抱杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) KB的发酵液中获得。所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) KB的代谢物具体可按照如下方法制备:在液体培养基中培养所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)KB,除去液体培养物(发酵液)中的所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)KB即得到所述解淀粉芽孢杆菌的代谢物。本专利技术中的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) KB对桃采后褐腐病囷、平果米后灰霉病囷、西红柿米后灰霉病囷和平果米后青霉病囷具有抑制作用；对桃米后揭腐本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种解淀粉芽孢杆菌（Bacillus?amyloliquefaciens），菌株KB，保藏号为CGMCC?No.8179。

【技术特征摘要】
1.一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),菌株KB,保藏号为CGMCCN0.8179。2.一种病原菌抑制剂，其活性成分为权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌和/或权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌的代谢物。3.根据权利要求2所述的病原菌抑制剂，其特征在于，所述病原菌抑制剂对下述至少一种病原菌具有抑制作用: A、桃米后揭腐病囷； B、苹果采后灰霉病菌； C、西红柿米后灰霉病囷； D、苹果采后青霉病菌。4.一种病害抑制剂，其活性成分为权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌和/或权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌的代谢物。5.根据权利要求4所述的病害抑制剂，其特征在于，所述病害为下述至少一种:...

【专利技术属性】
技术研发人员：张殿朋，刘伟成，卢彩鸽，张涛涛，董丹，刘霆，吴慧玲，刘德文，卢向阳，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：