本发明专利技术公开了二硫代磷酸酯类农药代谢物的高效液相色谱-串联质谱检测方法，属于二硫代磷酸酯类农药代谢物的检测领域。所述方法包括：将含有二硫代磷酸酯类农药代谢物的样品进行前处理；用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸对样品进行衍生化处理；衍生化产物用液相色谱-串联质谱进行检测。本发明专利技术检测方法对于土壤中二硫代磷酸酯类农药代谢物的回收率为79.3～90.7%，精密度为9.38%和5.93%，检出限为0.01mg/kg和0.005mg/kg，在0.005～1.000mg/kg范围内线性相关系数为0.9992和0.9997，具有良好的回收率、定量限、精密度和线性，符合农产品中农药残留及其代谢物检测方法的要求。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种农药代谢物的检测方法，尤其涉及一种，属于二硫代磷酸酯类农药代谢物的检测领域。
技术介绍
有机磷农药具有广谱、高效等众多优点，是当前农药的三大支柱之一，广泛用作农业杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植物生长调节剂等，不论在品种的数量、产量的规模等都位居各种农药首位(张强.有机磷农药快速检测方法研究综述[J].广东化工.2013，10 (40): 142-147)，有机磷农药在农业的广泛应用可能导致土壤、地表水及生物等被污染，并可能最终传递于食品(Ballesteros, E.，&Parrado, Μ.J..Continuous solid-phase extraction and gas chromatographic determinationof organophosphorus pesticidesin natural and drinking waters[J].Journal ofChromatography A，2004，1029，267-273.)。二硫代磷酸酯类有机磷农药是农业生产中最常用一类农药，部分农药还在大量使用，多数为剧毒农药，杀虫效果好，降解周期长，主要种类有甲拌磷、乙拌磷、乐果、特丁硫磷及马拉硫磷等，其主要代谢产物为0，O- 二甲基二硫代磷酸酯和0，O- 二乙基二硫代磷酸酯(图1)。传统有机磷农药的检测一般采用气相色谱或气质联用的方法，但在检测二硫代磷酸酯类农药代谢物过程中，都遇到了一些问题。二硫代磷酸酯类农药代谢物中磷原子接受巯基中的硫原子提供的孤对电子形成η键，其一对电子供给硫原子形成σ配键，因此氧原子上的氢易失去电子，发生亲和取代反应(苏寿承.有机磷农药的分子结构和化学性质.浙江林学院学报.1988，5(3):318-327.)。痕量二硫代磷酸酯类农药代谢物的检测方法主要有气相色谱法，由于代谢物结构不稳定，气相色谱法采用五氟苄基苯(PFBBr)对代谢物进行衍生化处理，但存在衍生时间长，灵敏度不高等问题(杨玉林，芮振荣，王宏，等.气相色谱法分析尿样中六种有机磷农药代谢产物[J].中国卫生检验杂志，2003, 13(1):24 ;邬春华，郑力行，周志俊.尿中有机磷农药代谢产物的测定[J].复旦学报，2006，33 (4):552-554);采用五氟溴苄基苯(PFBBr)衍生时，将羟基屏蔽以减小0，O- 二甲基二硫代磷酸酯或0，O- 二乙基二硫代磷酸酯的活性，再进行气相色谱-FPD法进行检测，实际测得土壤中0，O- 二甲基二硫代磷酸酯或0，O- 二乙基二硫代磷酸酯灵敏度分别为0.5mg/kg和1.0mg/kg，远低于液相色谱_质谱法。此外，O, O- 二甲基二硫代磷酸酯和0，O- 二乙基二硫代磷酸酯遇热甲基化为三甲基硫代磷酸酯和0，O-二乙基-S-甲基二硫代磷酸酯(如图1)，转化效率不高，且转化速率较慢，因而峰形对称性不好，峰形不尖锐，无法准确定量。二硫代磷酸酯类农药代谢物极性较强，使用普通的液相色谱柱无法保留，即使使用对极性化合物保留较强的HILIC液相色谱柱，仍很难保留且无法将两种化合物进行分离，因此无法采用液相色谱-质谱法直接进行检测。采用液相色谱-串联质谱法直接测定二硫代磷酸酯类农药代谢物，色谱保留时间过短，代谢物无法完全分离，造成基质效应过高，实际样品灵敏度较低(Schenke D..Analytical Method for the determinationof 0, O-diethylphosphate and 0，O-diethylthiophosphate in faecal sample[J].Chemosphere, 2000，41:1313-13201 ;刘倩，谢曼丹，朱育芬.硫逐磷酸酯和二硫代磷酸酯的电喷雾电离质谱[J].分析测试学报.2000, 19(5):24-27.)。总之，采用气相色谱测定二硫代磷酸酯类农药代谢物(0，O- 二甲基二硫代磷酸酯和0，O- 二乙基二硫代磷酸酯)时，以五氟溴苄基苯作为衍生化试剂，存在衍生时间长，灵敏度低的缺陷，而且这种衍生化试剂不适合在液相色谱-串联质谱上检测；直接采用液相色谱-串联质谱的检测方法又存在无法保留，灵敏度低等问题。
技术实现思路
针对现有的二硫代磷酸酯类农药代谢物检测方法所存在的缺陷，本专利技术提供了一种新的，该方法采用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸作为二硫代磷酸酯类农药代谢物的衍生化试剂，所获得的衍生化产物易溶于水相，适合液相色谱-质谱检测，检测灵敏度远高于五氟溴苄基苯衍生后用气相色谱进行检测的方法，且衍生时间也显著缩短。为此，本专利技术首先提供了 3-溴甲基-4-硝基苯甲酸作为二硫代磷酸酯类农药代谢物高效液相色谱-串联质谱检测的衍生化试剂的新用途；本专利技术进一步提供了一种，该方法包括:将待检测的含有二硫代磷酸酯类农药代谢物的土壤样品进行前处理，得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物；用衍生化试剂将提取物进行衍生化处理，获得衍生化产物；将衍生化产物用液相色谱-串联质谱进行检测，获得样品中二硫代磷酸酯类农药代谢物的含量；其中，所述的衍生化试剂是3-溴甲基-4-硝基苯甲酸。本专利技术通过实验发现，3-溴甲基-4-硝基苯甲酸极性与二硫代磷酸酯类农药相似，在乙腈中溶解度高，结构小于五氟溴苄基苯，亲和取代位阻较小，更有利于衍生化反应的进行，采用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸对二硫代磷酸酯类农药代谢物进行衍生化处理，衍生化产物易溶于水相，适合液相色谱-质谱检测，检测灵敏度远高于五氟溴苄基苯衍生后用气相色谱进行检测，衍生时间缩短，更适合二硫代磷酸酯类农药代谢物的检测。本专利技术中所述的二硫代磷酸酯类农药代谢物优选为0，O- 二甲基二硫代磷酸酯或O,O-二乙基二硫代磷酸酯；本专利技术特别提供了一种0，O-二甲基二硫代磷酸酯和0，O-二乙基二硫代磷酸酯的高效液相色谱-串联质谱检测方法，该方法包括:将待检测的含有0，O- 二甲基二硫代磷酸酯和0，O- 二乙基二硫代磷酸酯的土壤样品进行前处理，获得0，O- 二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的提取物；用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸对0，O-二甲基二硫代磷酸酯和0，O- 二乙基二硫代磷酸酯的提取物进行衍生化处理，获得衍生化产物；将衍生化产物用液相色谱-串联质谱进行检测，获得样品中0，O- 二甲基二硫代磷酸酯和0，O- 二乙基~ 硫代憐Ife酷的含量。本专利技术优选在氮气保护加热条件下对二硫代磷酸酯类农药代谢物进行衍生化处理。本专利技术检测方法中所述的前处理方式依次包括:(1)从土壤样品中提取得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物；(2)将提取物进行净化处理。步骤(I)中所述的从土壤样品中提取得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物的方法包括:将土壤样品风干后加入丙酮作为提取溶剂进行振荡提取，将提取液离心后，取上清液；将上清液旋转蒸发近干后用乙酸乙酯溶解得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物。有机磷农药及其代谢产物在乙酸乙酯、乙腈及CHCl3等试剂中均有较好的溶解度，考虑到对环境的污染及乳化问题，通常提取试剂宜采用乙腈、丙酮或乙酸乙酯。土壤中成分较为复杂，腐殖质含量高的土壤色素含量较高，而乙酸乙酯对色素的提取效率不高，提取物色素类杂质含量较低，而且乙酸乙酯可以有效地降低土壤中各种无机本文档来自技高网...
【技术保护点】
3?溴甲基?4?硝基苯甲酸作为二硫代磷酸酯类农药代谢物衍生化试剂的应用。
【技术特征摘要】
1.3-溴甲基-4-硝基苯甲酸作为二硫代磷酸酯类农药代谢物衍生化试剂的应用。2.按照权利要求1所述的应用，其特征在于:所述二硫代磷酸酯类农药代谢物指示物是O，O- 二甲基二硫代磷酸酯或O，O- 二乙基二硫代磷酸酯。3.—种二硫代磷酸酯类农药代谢物的高效液相色谱-串联质谱检测方法，该方法包括:将待检测的含有二硫代磷酸酯类农药代谢物的土壤样品进行前处理，得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物；用衍生化试剂将提取物进行衍生化处理，获得衍生化产物；将衍生化产物用液相色谱-串联质谱进行检测，获得样品中二硫代磷酸酯类农药代谢物的含量；其特征在于:所述的衍生化试剂是3-溴甲基-4-硝基苯甲酸。4.按照权利要求3所述的高效液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于:氮气保护加热条件下用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸对二硫代磷酸酯类农药代谢物进行衍生化处理。5.按照权利要求3所述的高效液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于，所述的前处理依次包括:(I)从土壤样品中提取得到含有二硫代磷酸酯类农药代谢物的提取物；(2)将提取物进行净化处理。6.按照权利要求5所述的高效液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于:步骤(I)中采用以下方式将土壤样品中提取得到含有二硫代磷酸酯类农药代谢物的提取物:将土壤样品风干后加入丙酮作为提取溶剂进行振荡提取，将提取液离心后，取上清液；将上清液旋转蒸发近干后用乙酸乙酯溶解得到二硫代磷酸酯类农药...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘永，宋金凤，丁为民，王洋，胡志伟，
申请(专利权)人：黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。