诊断血内寄生物的方法和设备技术

用于检测血液样品中寄生物的方法和设备。该方法包括：将血液样品与裂解试剂相混合，以裂解红细胞；在颗粒分析仪中测量裂解后的血液样品中的颗粒，得到轴向光损失测量值；以及响应于轴向光损失测量值，区分裂解后的血液样品中的寄生物颗粒种群。在一种实施方式中，该方法包括：测量光散射；通过比较光散射测量值和轴向光损失测量值，区分寄生物颗粒种群。用于检测血液样品中寄生物种群的系统包括：用于获得轴向光损失测量值的颗粒分析仪；以及用于通过使用轴向光损失测量值来确定寄生物颗粒种群的计算机。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】诊断血内寄生物的方法和设备
本专利技术涉及医疗诊断领域，更具体地说，涉及用于诊断血内寄生物感染的方法和设备。相关申请本申请要求2011年5月13日申请的美国临时申请61/486，059的优先权，通过引用将其全部内容结合于本文。
技术介绍
寄生虫性疾病可引起死亡，全世界许多人遭受其苦。主要的寄生虫性疾病之一是疟疾。根据世界卫生组织(WH0)，疟疾是威及生命的寄生虫性疾病，每年感染2亿2千5百万人，并且杀死一百万人的四分之三略多。死亡者主要是儿童。该疾病的大部分受害者住在非洲的撒哈拉沙漠地区，但是在亚洲、中东、美国和欧洲也出现很大数量的病例。—般有四种类型的痕原虫会感染人:间日痕原虫(Plasmodium vivax);三日痕原虫(Plasmodium malariae);卵形痕原虫(Plasmodium ovale);以及恶性痕原虫(Plasmodium falciparum)。第五种类型的痕原寄生虫是诺氏痕原虫(Plasmodiumknowlesi)，其可在猴子中引起疟疾，已经发现其可感染人类，但是其发病率还不知道。借助早期诊断，该疾病通过使用抗疟疾药物是可治疗的。世界卫生组织(WHO)建议，在治疗之前，病人的感染应该通过快速诊断试验(RDT)、或者通过显微镜血细胞检查进行证实。显微镜检查较慢，并且是劳动密集型，要求高度熟练的技师。RDT是典型的免疫色谱抗体试验，其结果表现为与温度稳定性、技师熟练要求和成本相关。使用细胞计数器通过测量白细胞对疟疾感染的响应来尝试快速诊断疟疾的感染多少是成功的。然而，难以在白细胞测量和疟疾感染严重程度之间建立可靠的关系。产生该问题的原因是因为，当淋巴细胞和单核细胞与寄生虫起反应时，被测量的白细胞参数是白细胞体积的变化。不幸的是，当疟疾寄生虫首次感染病人时，白细胞体积不会立刻变化；一旦通过治疗消灭了寄生虫，白细胞体积也不立刻恢复正常。细胞体积变化典型地以不可量化的方式滞后于传入或者除去疟疾寄生虫之后。另外，淋巴细胞和单核细胞对疟疾寄生虫的生物反应是如此复杂，以至于很难可靠地定量白细胞体积(淋巴细胞和单核细胞的体积)与寄生虫感染严重程度之间的关系。需要的是容易使用和解释的血内寄生物的快速诊断试验。本专利技术满足了该需要。
技术实现思路
本专利技术公开的主题一般涉及用于检测血液样品中寄生物的方法和设备。在一个方面，本申请说明书公开了一种用于检测血液样品中寄生物颗粒种群的方法。在一种实施方式中，该方法包括下述步骤:将血液样品与裂解试剂(lytic reagent)相混合，以便裂解红细胞；在颗粒分析仪中测量混合后的血液样品中的颗粒，得到轴向光损失测量值；区分混合后的血液样品中的寄生物颗粒种群，所述种群响应于轴向光损失测量值。在一种实施方式中，所述区分步骤包括识别混合后血液样品中响应于轴向光损失测量值的寄生物颗粒种群。在一种实施方式中，被区分的寄生物颗粒种群包含疟疾寄生虫。在另一个实施方式中，该方法包括:进行至少一种光散射测量法；以及将混合后的血液样品中的寄生物颗粒种群区分出来，所述种群响应于轴向光损失测量值和光散射测量值。在另一个实施方式中，该方法进一步包括:计数寄生物颗粒种群中的颗粒，以便确定寄生物浓度的系数；以及将寄生物浓度的系数报告为对应于寄生物感染的计数。在又一个实施方式中，该测量是有核红细胞(NRBC)分析的一部分。在另一个实施方式中，至少一种光散射测量值是中上角度(upper median angle)光散射测量值。在一种实施方式中，所述区分步骤包括:将测量的至少一种光散射测量值与测量的轴向光损失测量值相比较，并且通过门控(gating)由所述比较指示的各个种群来检测寄生物颗粒种群。在另一个实施方式中，该方法还包括:计数寄生物颗粒种群中的颗粒，以便确定第一数目；计数由所述比较得到的其他颗粒种群中的所述颗粒，以便确定第二数目；以及将包含第一数目和第二数目的份数报告为寄生物感染的指示。在又一个实施方式中，寄生物颗粒种群具有比各个白细胞种群更低的至少一种光散射测量数值和更低的所述轴向光损失测量数值。在另一个实施方式中，所述识别步骤包括:比较至少一种光散射测量值、轴向光损失测量值、以及第三测量值，其中所述第三测量值是在所述颗粒测量期间得到的；以及通过门控(gating)由所述比较指示的各个种群来检测寄生物颗粒种群。在另一个实施方式中，第三测量值是直流(DC)测量值。在另一个实施方式中，使用血液样品来检测寄生物颗粒的方法包括下述步骤:将所述血液样品与裂解试剂相混合，以便裂解红细胞；在颗粒分析仪中测量混合后的血液样品中的颗粒，得到至少一种光散射测量值、轴向光损失测量值、以及体积测量值；基于至少一种光散射测量值和轴向光损失测量值，区分与混合后血液样品中的寄生物颗粒对应的第一颗粒种群；基于体积测量值，区分与受到所述寄生物颗粒影响的白细胞对应的第二颗粒种群；以及报告响应于被区分的第一颗粒种群和第二颗粒种群的寄生物感染。在一种实施方式中，包括下述步骤:基于至少一种光散射测量值和轴向光损失测量值来区分与混合后血液样品中的寄生物颗粒对应的第一颗粒种群；并且/或者识别与受寄生物颗粒影响的白细胞对应的第二颗粒种群。在另一个实施方式中，区分第二颗粒种群的步骤进一步基于光散射测量值。在又一个实施方式中，检测红细胞中寄生物的方法包括下述步骤:以一种其中寄生物被保留的方式裂解血液样品中红细胞；一束光定向穿过裂解后的血液样品；根据由颗粒引起的光束测量轴向光损失；以及根据测量的轴向光损失测量值确定受感染细胞的种群。在另一个实施方式中，该方法包括下述步骤:当从光束方向测量时，在预先确定的角度范围内，测量被样品中颗粒散射的光；比较当从光束方向测量时，在预先确定的角度范围内被颗粒散射的光和颗粒的轴向光损失，并且通过该比较来确定受感染细胞的种群。在又一个实施方式中，将受感染细胞的种群中的颗粒的数量计数除以白细胞的数量计数。在另一方面，本申请公开的主题涉及一种用于检测血液样品中寄生物颗粒种群的系统，该系统包含:用于获得轴向光损失测量值的颗粒分析仪，该颗粒分析仪由轴向光损失测量值启动散射光测量；用于确定寄生物颗粒的指示种群的计算机。在一种实施方式中，颗粒分析仪可进一步确定光散射测量值，并且计算机可将光散射测量值与轴向光损失测量值相比较，其中，光散射测量值和轴向光损失测量值的比较可定量寄生物颗粒种群。在一个实施方式中，在20-45度之间产生光散射测量值。【附图说明】通过如下附图，能够更好地理解本专利技术的目的和特征。这些附图并非必须按比例绘制；其重点反而是用于说明本专利技术公开的主题的原理。当在本公开内部被引入时，这些与本公开有关的附图被逐个地解释。图1A是本
已知的细胞计数器的实施方式的示意图，图1B是一个红细胞组的显微照片，其中一些红细胞被疟原虫感染；图2是描述本专利技术方法的实施方式中各步骤的程序框图的实施方式；图3A和图3B分别显示了被间日疟原虫(P.vivax)感染的病人和未感染病人的RUMALS对ALL的实例绘图；图4A和图4B分别显示了被间日疟原虫感染的病人和未感染病人的RLALS对ALL的实例绘图；图5A和5B分别显示了被P.vivax感染的病人的寄生物负载测量和CMC测量以及寄生物_颗粒_种群％本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测血液样品中寄生物颗粒种群的方法，包括下述步骤：a）将所述血液样品与裂解试剂相混合，以便裂解红细胞；b）测量来自光源的光损失以获得轴向光损失测量值，所述光损失由裂解后的血液样品中的颗粒穿过颗粒分析仪时所引起；以及c）响应于轴向光损失测量值，使用计算机将裂解后的血液样品中的寄生物颗粒种群与其他种群区分开来。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.05.13 US 61/486,0591.一种用于检测血液样品中寄生物颗粒种群的方法，包括下述步骤: a)将所述血液样品与裂解试剂相混合，以便裂解红细胞； b)测量来自光源的光损失以获得轴向光损失测量值，所述光损失由裂解后的血液样品中的颗粒穿过颗粒分析仪时所引起；以及 c)响应于轴向光损失测量值，使用计算机将裂解后的血液样品中的寄生物颗粒种群与其他种群区分开来。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括:测量来自光源的光散射以获得光散射测量值，所述光散射由裂解后的血液样品中的颗粒穿过颗粒分析仪时所引起；以及响应于光散射测量值和轴向光损失测量值，使用计算机将裂解后的血液样品中的寄生物颗粒种群区分出来。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，被区分的寄生物颗粒种群包含被疟疾寄生物感染的细胞。4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法还包括: a)计数所述寄生物颗粒种群中的所述颗粒，以便确定寄生物浓度的系数；以及 b)将寄生物浓度的系数报告为对应于寄生物感染的计数。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法还包括下述步骤:在用抗疟疾药物治疗期间，通过周期地测量所获得的病人血液样品中的寄生物浓度来确定治疗的效果。6.如权利要求2所述的方法，其特征在于，至少一种光散射测量值是中上角度光散射测量值。`7.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述区分包括: a)使用计算机，比较测得的至少一种光散射测量值和测得的轴向光损失测量值；以及 b)通过门控由所述比较指示的各个种群来检测寄生物颗粒种群。8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法还包括: a)使用计算机对所述寄生物颗粒种群中的所述颗粒进行计数，以便确定第一数目； b)使用计算机对其他颗粒种群中的所述颗粒进行计数，以便确定第二数目；以及 c)将包含第一数目和第二数目的分数报告为寄生物感染的指示。9.如权利要求2所述的方法，其特征在于，与各个白细胞种群相比，所述寄生物颗粒种群具有较低的所述至少一种光散射测量值和较低的所述轴向光损失测量数值。10.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述区分包括: a)比较至少一种光散射测量值、轴向光损失测量值、以及第三测量值，其中第三测量值是在所述颗粒测量期间得到的；以及 b )通过门控由所述比较指示的各个种群来检测寄生物颗粒种群。11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，第三测量值是直流(DC)测量值。12.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括:通过使用计算机对血液样品进行5H)绘图，将寄生物感染与其他疾病区分开来。13.一种使用血液样品来检测寄生物颗粒的方法，包括下述步骤: a)将所述血液样品与裂解试剂相混合，以便裂解红细胞； b)在颗粒分析仪中测量裂解后的血液样品中的颗粒，得到由颗粒引起的来自光源的散射光的光散射测量值、由颗粒引起的来自光源的光强度降低的轴向光损失测量值、以及每一个颗粒的体积测量值； C)基于至少一种光散射测量值和轴向光损失测量值，使用计算机区分与裂解后的血液样品中的寄生物颗粒对应的第一颗粒种群； d)基于体积测量值，使用计算机区分与受到所述寄生物颗粒影响的白细胞对应的第二颗粒种群；以及 e)响应于经识别的第一颗粒种群和第二颗粒种群，报告寄生物感染。14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩庆子，陆久留，JS赖利，MA罗斯曼，R西蒙洛佩斯，
申请(专利权)人：贝克曼考尔特公司，
类型：
国别省市：