调节复合物SASPase-FLG2的肽制造技术

本发明专利技术涉及一种从SASPase或FLG2、其片段或其同系物中分离出来的肽，该肽可以改变通过来自丝聚合蛋白-2的第一氨基酸序列和来自SASPase的第二氨基酸序列之间的相互作用而形成的复合物的三维构像。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】调节复合物SASPase-FLG2的肽
本专利技术涉及一种关于皮肤和/或其附属物的新颖的美容靶点或治疗靶点，还涉及其用于皮肤的生物标记物的用途，或用于筛选新的专用于皮肤和/或其附属物的美容护理、治疗护理或皮肤病学护理的活性剂的用途。更具体地说，本专利技术涉及分别从丝聚合蛋白-2或FLG2和SASPase分离出的肽，所述肽能够一起形成复合物，并且本专利技术涉及所述肽作为用于筛选关于皮肤和/或其附属物的美容活性剂或治疗活性剂的靶点的用途。
技术介绍
词语“皮肤和其附属物”意思是整个身体的皮肤、头皮、黏膜，尤其是嘴唇、体毛、头发和指甲。更具体地说，本专利技术涉及身体的皮肤、头皮、嘴唇、头发和体毛。特别地，本专利技术涉及面部的皮肤、颈部皮肤、臂和前臂的皮肤、腿部的皮肤、和头皮。更具体地说，术语“附属物”表示头发、体毛、指甲，尤其是头发和体毛。表皮通常分为构成表皮的生发层的胶质细胞基底层，位于生发层上的多面体细胞构成的多层“刺状”层，由含有明显的细胞质内含物透明胶质颗粒的扁平细胞构成的I层至3层“颗粒”层，和最后的被称为角化层(或角质层)的上层组合，该上层组合由在其分化末期被称为角质细胞的角化细胞构成。角质细胞为主要由含有细胞质蛋白的纤维材料构成、由角化包膜包围的无核细胞。新的角化细胞经历了永久的生成以补偿通过被称为脱皮的机理而来自于角化层的表皮细胞的连续的损失。导致角质层的形成和其消除的整个过程是在多种激素因子或细胞因子的控制下精细调节的对象。这些因子的失调，如果没有快速调节，到最后导致基底层中细胞增殖和/或分化的功能紊乱，或脱皮的功能紊乱。皮肤和其附属物的许多缺陷或紊乱可与此类改变关联。因此，相对于脱皮，当表皮的基底层的细胞的增殖和/或分化加速时，那么角质层倾向于变厚。根据其表现的程度，这种功能紊乱可与各种美学缺陷(如皮肤老化的体征、表皮屏障功能紊乱、或皮肤干燥的体征)有关，或者在适当情况下，与各种病理紊乱(例如，角化过度、干燥病、鱼鳞癣、牛皮癣或反应性角化过度)有关。相反，相对于脱皮，基底层的细胞的增殖和/或分化减慢可以通过使表皮、尤其角化层变薄而显现出其本身。根据其表现的程度，这种功能紊乱可与各种美学缺陷(如愈合缺陷、或尤其在皮肤用力擦洗或去角质处理后的再上皮化缺陷)有关，或者在适当情况下，与各种病理紊乱(例如，通常由皮肤与一种或多种外源试剂接触而诱导的免疫起源反应)有关。为角质层形成的基础的激素的、细胞的或分子的机理的各种失调可与这些紊乱有关。例如，FR2842209描述了 SASPase蛋白质在表皮中的表达，和其在治疗皮肤紊乱中作为靶点的用途。然而，SASPase在表皮中的表达的检测只是整套涉及表皮体内平衡的机理的一个因素，这些机理的许多方面仍然有待确定。因此，仍然需要更加精确地确定涉及表皮体内平衡、尤其涉及表皮细胞的增殖和/或分化的因子的性质和作用。尤其，需要确定能够调节SASPase的蛋白水解活性的试剂的性质。仍然需要识别和提供关于皮肤和/或其附属物的新的美容靶点或治疗靶点，尤其是涉及表皮细胞的增殖和/或分化的美容靶点或治疗靶点。仍然需要识别和提供用于筛选能够调节表皮细胞的增殖和/或分化的活性化合物的新的工具，该工具同时是快速的、灵敏的、易于使用和便宜的。
技术实现思路
本专利技术的目的是满足这些需要。因此，根据第一主题，本专利技术涉及一种分离的肽，该分离的肽由选自SEQ IDN0.:9、SEQ ID N0.: 16、其片段、或其具有至少85%的序列同一性的同系物的氨基酸序列表示，所述氨基酸序列能够改变由来自丝聚合蛋白-2的第一氨基酸序列和来自SASPase的第二氨基酸序列的相互作用而形成的复合物的三维构象。出乎意料的是，专利技术人已证明以单体或二聚物形式的丝聚合蛋白-2和SASPase通过亲和力彼此结合，以一起形成蛋白质复合物。尤其，专利技术人已识别了在丝聚合蛋白-2和SASPase中，涉及该结合和蛋白质复合物的形成的明确的氨基酸序列。更重要的是，专利技术人已证明丝聚合蛋白-2与SASPase的结合增强了 SASPase的蛋白水解活性，并且证明该活性也可以通过来自于丝聚合蛋白-2的特定的肽来调节。为了本专利技术的目的，术语“相互作用”意思是在两个氨基酸序列之间通过亲和力形成一个或多个键，以致形成在生理学上可接受的条件下能够保持稳定的蛋白质或肽复合物。在本专利技术中，无区别地使用术语“相互作用”和“结合”。为了本专利技术的目的，复合物的“三维构象”这一术语意思是当彼此相互作用时组成该复合物的氨基酸序列的空间排列。 为了本专利技术的目的，复合物的三维构象的“改变”这一术语意思是改变复合物中的氨基酸序列的空间排列，或改变这些序列中的两者或一者的三维结构。这些改变可以导致复合物的整体形状的改变(也称为变构改变)和/或在自由氨基酸序列和彼此结合的氨基酸序列之间的热力平衡的改变。这些改变导致复合物的生物活性的增强、降低或稳定。优选地，这些改变可以导致复合物的解离，即在自由序列和结合序列之间建立的热力平衡朝着自由序列偏移。根据另一个方面，本专利技术涉及一种嵌合肽，该嵌合肽包括与第二氨基酸序列融合的第一氨基酸序列，其中，第一氨基酸序列表示本专利技术的肽。根据另一个方面，本专利技术涉及一种分离复合物，该分离复合物通过第一氨基酸序列和来自SASPase或其具有至少85%的序列同一性的同系物的第二氨基酸序列的相互作用而形成，其中，所述第一氨基酸序列表示本专利技术的肽，尤其是正如根据本专利技术的第一个主题所限定的肽。为了本专利技术的目的，词语“来自于…的氨基酸序列”旨在表示考虑之中的蛋白质或肽的全部或部分，即整体或片段。根据另一个方面，本专利技术涉及至少一种本专利技术的复合物用于筛选能够调节表皮细胞的增殖和/或分化的化合物的用途。根据另一个方面，本专利技术涉及一种用于筛选能够调节表皮细胞的增殖和/或分化的化合物的方法，所述方法至少包括在下文中描述的步骤。本专利技术的方法或用途可有利地在体内、间接体内或体外进行。 尤其，本专利技术的方法或用途可在间接体内或体外进行。可有利地实施本专利技术的筛选方法，以便识别能够预防和/或治疗与表皮细胞的分化和/或增殖的功能紊乱关联的皮肤和/或其附属物的美学缺陷或病理紊乱的新的活性化合物。为了本专利技术的目的，术语“预防”意思是降低出现所给现象(即在本专利技术中，与表皮细胞的分化和/或增殖的缺陷关联的皮肤和/或其附属物的美学缺陷或病理紊乱)的风险或可能性。本专利技术有利地可提供新靶点，其用在化妆品行业或关于皮肤和/或其附属物的治疗中。有利的是，本专利技术的肽对于进行筛选新的美容活性剂或皮肤病学活性剂的简单的、便宜的和灵敏的方法可以是特别有用的。有利的是，本专利技术可以识别能够作用于调节表皮体内平衡的未知途径的新的活性剂，并且因此可以关于皮肤和/或其附属物的美容缺陷或病理紊乱提供更加精确的效果和更好的效力。有利的是，本专利技术可以提供一种新颖的筛选工具，该工具对于检测在关于皮肤和/或其附属物的化妆品行业或治疗中有用的新的活性化合物是特别有效和灵敏的。对于与表皮细胞的增殖和/或分化的缺陷关联的皮肤和/或其附属物的美学缺陷或病理紊乱，这些活性化合物可以是特别有效的。有利的是，本专利技术的肽也可以用作化妆品活性剂。肽本专利技术的肽可以来自于或源于SASPase或FLG2的氨基酸序列，并且能够在适当的条件下改本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的肽，所述分离肽由选自SEQ?ID?No.:9、SEQ?ID?No.:16、其片段、或其具有至少85%的序列同一性的同系物的氨基酸序列表示，并且能够改变由来自丝聚合蛋白?2的第一氨基酸序列和来自SASPase的第二氨基酸序列的相互作用而形成的复合物的三维构象。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.12.07 FR 10601771.一种分离的肽，所述分离肽由选自SEQ ID N0.:9、SEQ ID N0.:16、其片段、或其具有至少85%的序列同一性的同系物的氨基酸序列表示，并且能够改变由来自丝聚合蛋白-2的第一氨基酸序列和来自SASPase的第二氨基酸序列的相互作用而形成的复合物的三维构象。2.根据权利要求1所述的肽，其中，所述肽由序列SEQID N0.:9、其片段、或其具有至少85%的序列同一性的同系物表示，并且能够通过亲和力与来自SASPase的所述第一氨基酸序列结合。3.根据权利要求1或2所述的肽，其中，所述肽由来自序列SEQID N0.:9的3至50个连续的氨基酸、优选6至30个连续的氨基酸、优选8至20个连续的氨基酸、更优选10至16个连续的氨基酸构成。4.根据前述权利要求中的任意一项所述的肽，其中，所述肽由选自SEQID N0.:10,SEQID N0.: 11、SEQ ID N0.: 12、SEQ ID N0.: 13、SEQ ID N0.: 14、SEQ ID N0.: 15、其片段、或其具有至少85%的序列同一'I生的同系物的氨基酸序列表不。5.根据前述权利要求中的任意一项所述的肽，其中，所述肽通过选自SEQID N0.:1、其片段、或其具有至少85%的序列同一性的同系物的序列所表示的核酸序列编码。6.根据权利要求1所述的肽，其中，所述肽由序列SEQID N0.: 16、其片段、或其具有至少85%的序列同一性的同系物表示，并且能够通过亲和力与来自丝聚合蛋白-2的所述第二氨基酸序列结合。7.根据前一项权利要求所述的肽，其中，所述肽通过由SEQID N0.:8、其片段、或其具有至少85%的序列同一性的同系物表示的核酸序列编码。8.一种嵌合肽，包括与第二氨基酸序列融合的第一氨基酸序列，其中，所述第一氨基酸序列表示在权利要求1至7的任意一项中所限定的肽。9.根据前一项权利要求所述的嵌合肽，其中，所述第二氨基酸序列选自于荧光蛋白、亲和标记物、信号肽和促渗透肽，优选为亲和标记物。10.一种分离的复合物，该分离的复合物通过第一氨基酸序列和第二氨基酸序列相互作用形成，所述第二氨基酸序列来自SASPase或其具有至少85%的序列同一'I生的同系物，其中，所述第一氨基酸序列表示在权利要求1至5、权利要求8或9中的任意一项中所限定的肽。11.根据前一项权利要求所述的复合物，其中，所述第二氨基酸序列表示如在权利要求1和权利要求6至9的任意一项中所限定的来自SASPase的肽。12.至少一种如在权利要求10或11中所限定的复合物用于筛选能够调节表皮细胞的增殖和/或分化的化合物的用途。13.一种用于体外或间接体内地筛选能够调节表皮细胞的增殖和/或分化的化合物的方法，所述方法至少包括在于以下的步骤: a)在有利于权利要求10或11中所限定的复合物的形成的条件下，提供所述复合物； b)在步骤a)之前或继步骤a)之后，将所述第一氨基酸序列和/或所述第二氨基酸序列与实...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·伯纳德，A·托马斯克里基努恩，
申请(专利权)人：欧莱雅，
类型：
国别省市：