本发明专利技术提供了3株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和2株猪链球菌，几种抗原配合使用，可以将抗原之间的相互干扰将至最低；基于上述发现，本发明专利技术提供了一种具有良好的免疫原性的猪传染性胸膜肺炎、猪链球菌病二联灭活疫苗；该疫苗使用了灭活的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌1、5、7型与猪链球菌作为抗原，其具有超强毒力及免疫原性，在疫苗制备过程中可使用较少的抗原量达到较好的免疫效果，从而降低生产及使用成本，适宜大规模生产及养殖场中的应用。本发明专利技术的猪传染性胸膜肺炎、猪链球菌二联灭活疫苗，在与单苗相同生产成本及销售价格的水平上，达到一针两防的效果，可代替单苗使用，从而大大降低了免疫成本，具有商业上的成功潜力。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种，属于兽药疫苗领域。
技术介绍
猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(ActionobacillusPleuropneumoniae,APP)引起的一种呼吸系统重要传染病。本病主要引起猪的一种伴有胸膜炎的纤维素性、出血性、坏死性肺炎，多呈最急性或急性病程而迅速死亡，发病率和死亡率均在50%以上，它可发生于任何年龄的猪只，尤其是在集约化养猪场，一旦发生会造成重大经济损失。猪胸膜肺炎放线杆菌又称为副溶血嗜血杆菌(H.parahaemoIyties),该病原菌生长要求严格，为革兰氏阴性球杆菌，有荚膜。该病原菌血清型众多，根据NAD依赖性，可以分为生物I型和生物II型，其中依赖NAD的猪胸膜肺炎放线杆菌划为生物I型(Biovar I)，不依赖NAD的猪胸膜肺炎放线杆菌划为生物II型(Biovar II)，采用传统血清型方法，又可细分为15个血清型；其中生物I型包括血清1-12型和15型，生物II型包括血清13型和14型。猪胸膜肺炎病的病原血清型众多，给猪胸膜肺炎病的预防与控制带来了困难。猪链球菌(Streptococcus suis)是条件致病菌,广泛分布于自然界中，在动物的呼吸道、肠道、生殖道等处常在，可引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症、肺炎和突然死亡，严重危害养猪业的发展。猪链球菌为革兰氏阳性菌，可在外界环境中存活很长时间，特别是在粪便中及被污染的环境和带菌猪是重要的传染源，超急性死亡的猪只不出现任何症状。猪只不分品种、年龄和性别，一年四季都可以感染本病，哺乳和断奶后仔猪发病死亡率高达80%以上，并有一定人畜共感染性。猪链球菌至少分为5种类型:急性败血性、脑膜炎性、关节炎性、脓肿性和无乳型。由于猪胸膜肺炎病血清型和猪链球菌的类型众多，对两种疾病共感染、同时发病的养殖场，没有有效的应对措施，常常带来巨大损失。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的主要目的在于提供一种新型猪传染性胸膜肺炎、猪链球菌病二联多价灭活疫苗，包含至少一种已灭活的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原和至少一种猪链球菌抗原，以预防和治疗猪胸膜肺炎病和猪链球菌引起的疾病。猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原是指含有至少一种猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原形式的任何组合物，所述猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原接种猪可诱导、刺激或增强抵抗猪传染性胸膜肺炎放线杆菌感染的免疫应答。猪传染性胸膜肺炎放线杆菌为包括本领域技术人员熟知的临床分离的野毒株，包含目前已鉴定的I~15个血清型。优选地，所述猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原是完整的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌，优选为灭活形式，更优选，所述猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原是灭活的血清型为I型、5型和7型的混合抗原；最优选为灭活的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型LC株，和灭活的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清5型YC株，和灭活的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清7型YS株。本专利技术的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原还可以包含以下组合物的任一种抗原:如武汉科前动物生物制品有限责任公司的猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗(APP血清型I型、2型和7型)；中牧实业股份有限公司成都药械厂的猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗(APP血清I型、2型和7型)。正如本领域技术人员所知，不同的微生物野外分离株在基因序列上有微小的变异，然而，当变异不影响其蛋白质合成、结构或者主要作用功能区时，该微生物之他种野外分离株即使基因序列无法百分之百相同，其基本的生理功能并不会有所改变。因此，目前国际上常使用16S Ribosomal RNA (16S rRNA)来进行细菌型的分辨，因此在相似性的比较上可以用16S rRNA来进行比对而得到其同源性。所以，在16S rRNA具有同源性的前提下，本专利技术所使用的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原并不限定于本专利技术所使用的野外分离株。16s rRNA基因是细菌染色体上编码rRNA相对应的DNA序列，存在于所有细菌的染色体基因组中。16S rRNA具有高度的保守性和特异性以及该基因序列足够长(包含约50个功能域)。因此，本专利技术包括与猪传染性胸膜肺炎放线杆菌三株菌株(LC株、YC株和YS株)16S rRNA的同源性在80%上以上的菌株，更优选与LC株或YC株或YS株16S rRNA同源性在至少90%以上，优选地至少95%以上，更优选地至少95%~99%以上的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌菌株，即不改变猪传染性胸膜肺炎放线杆菌三株菌株(LC株、YC株和YS株)16SrRNA的前提下，本领域技术人员可以通过简单的筛选或诱变本专利技术的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌，获得与本专利技术猪传染性胸膜肺炎放线杆菌16S rRNA高度同源的菌株，并获得相应地具有相同或相似免疫原性的抗原组合物。猪链球菌抗原是指含有至少一种猪链球菌抗原形式的任何组合物，所述猪链球菌抗原接种猪可诱导、刺激或增强抵抗猪链球菌感染的免疫应答。猪链球菌为包括本领域技术人员熟知的临床分离的野毒株，包含目前已鉴定的I~9个起致病作用的血清型。优选地，所述猪链球菌抗原是完整的猪链球菌，优选为灭活形式，更优选，所述猪链球菌抗原是灭活的血清型为2型和猪链球菌C群马链球菌兽疫亚种的混合抗原；最优选为灭活的猪链球菌血清2型SC株，和灭活的猪链球菌C群马链球菌兽疫亚种。本专利技术的猪链球菌抗原还可以包含以下组合物的任一种抗原:如武汉科前动物生物制品有限责任公司的猪链球菌病灭活疫苗(马链球菌兽疫亚种+猪链球菌2型+猪链球菌7型)；上海海利生物技术股份有限公司的猪链球菌病灭活疫苗(马链球菌兽疫亚种+猪链球菌2型)；广东永顺生物制药有限公司的猪链球菌2型灭活疫苗；山东滨州华宏生物制品有限责任公司的猪链球菌病灭活疫苗(马链球菌兽疫亚种+猪链球菌2型)。还包括在16S rRNA具有同源性的前提下，本专利技术所使用的猪链球菌抗原并不限定于本专利技术所使用的野外分离株。本专利技术还包括与猪链球菌两株菌株(SC株和马链球菌兽疫亚种)16S rRNA的同源性在80%上以上的菌株，更优选与SC株或马链球菌兽疫亚种16SrRNA同源性在至少90%以上，优选地至少95%以上，更优选地至少95%~99%以上的猪链球菌菌株，即不改变猪链球菌两株菌株(SC株和马链球菌兽疫亚种)16S rRNA的前提下，本领域技术人员可以通过简单的筛选或诱变本专利技术的猪链球菌，获得与本专利技术猪链球菌16SrRNA高度同源的菌株，并获得相应地具有相同或相似免疫原性的抗原组合物。专利技术人通过长期的研究和大量的试验，发现目前猪传染性胸膜肺炎、猪链球菌病缺少合适治疗措施，特别是缺少合适的二联疫苗的原因在于，猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的血清型众多，和猪链球菌亚型和/或亚种众多，制备针对猪传染性胸膜肺炎或猪链球菌病的单苗中多价抗原之间就会相互干扰，从而影响其疫苗的总体免疫效果。但专利技术人在长期的研究和大量的试验中，意外地发现了将猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的至少三种血清型，和猪链球菌至少两种亚型或亚型联用时，会减少抗原之间的相互影响；特别是当使用猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的三种血清型1、5、7型时，会显著地减少抗原之间的影响，在减少抗原用量的同时，获得良好的免疫原性，可以用于同时预防和治疗猪传染性胸膜肺炎和猪链球菌病。更出乎意料地，专利技术人还获得了 3株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和I株猪链球菌本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种猪传染性胸膜肺炎、猪链球菌病的二联灭活疫苗，其特征在于，含有至少一种猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原和至少一种猪链球菌抗原。
【技术特征摘要】
1.一种猪传染性胸膜肺炎、猪链球菌病的二联灭活疫苗，其特征在于，含有至少一种猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原和至少一种猪链球菌抗原。2.根据权利要求1所述的二联灭活疫苗，其特征在于，含有三种猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型抗原和两种猪链球菌亚型或亚种抗原。3.根据权利要求1所述的二联灭活疫苗，其特征在于，所述二联灭活疫苗含有猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型、血清5型和血清7型的抗原；以及猪链球菌2型和猪链球菌C群马链球菌兽疫亚种的抗原。4.根据权利要求3所述的二联灭活疫苗，其特征在于，所述二联灭活疫苗含有猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型LC株、血清5型YC株、血清7型YS株、猪链球菌2型SC株和猪链球菌C群马链球菌兽疫亚种的抗原。5.根据权利要求4所述的二联灭活疫苗，其特征在于，所述二联灭活疫苗中抗原比例为:猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型LC株:血清5型YC株:血清7型YS株:猪链球菌2型SC株:猪链球菌C群马链球菌兽疫亚种=2:2:2:1:1。6.根据权利要求4所述的二联灭活疫苗，其特征在于，所述二联灭活疫苗中抗原的含量为:灭活前的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型、血清5型、血清7型活菌数各自均不少于5.0X IO7CFU / mL，猪链球菌2型和马链球菌兽疫亚种活菌数各自均不少于5 X IO9CFU / mL ;或上述抗原总体积为所述疫苗总体积的75%~90%。7.根据权利要求1~6任意一项所述的二联灭活疫苗，其特征在于，所述二联灭活疫苗中含有佐剂。8.根据权利要求7所述的二联灭活疫苗，其特征在于，所述佐剂为水性佐剂。9.根据权利要求8所述的二联灭活疫苗,其特征在于,所述水性佐剂选自MontanideGEL PR聚合物及其同系物的一种或几种。10.一种猪传染性胸膜肺炎放线杆菌，其特征在于，所述猪传染性胸膜肺炎放线杆菌分别为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清I型LC株，保藏号为CCTCC M2011458 ;猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清5型YC株，保藏号为:C...
【专利技术属性】
技术研发人员：张许科，孙进忠，白朝勇，
申请(专利权)人：普莱柯生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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