避孕微针的制备方法技术

技术编号:9657036 阅读:94 留言:0更新日期:2014-02-12 23:53
本发明专利技术属于免疫学领域,特别涉及避孕疫苗的研制技术,具体为避孕微针的制备方法,具体包括以下步骤:将筛选的人Eppin蛋白优势抗原表位序列和/或具有自组装形成纳米纤维结构的多肽序列串联,得表位肽;将步骤A所得的表位肽充分溶解于超纯水中,并与PBS混合,得自组装系统工作液;将微针浸泡至自组装系统工作液中不少于5分钟,取出后,晾干,得避孕微针。避孕疫苗经皮微针给药与皮下注射相比能提高疫苗保护效率和生物利用度,E-Q11自组装纳米疫苗具有良好的安全性和有效性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫学领域,特别涉及避孕疫苗的研制技术。
技术介绍
世界人口的持续增长和非意愿性妊娠的高发生率是困扰人类生存健康和社会经济,发展的严峻问题。免疫性避孕被广大研究者认为能够满足上述新一代避孕措施的需求,因而成为生殖与避孕领域研究的焦点和极具研究前景的避孕途径。避孕疫苗(contraceptive vaccine, CV)起源于免疫性不孕患者体内存在生育抑制相关的特异性抗体,免疫性避孕的作用原理是选择与生殖过程密切相关关键抗原成分制成疫苗,诱导受者产生特异性免疫应答,通过高效、特异地抑制精或卵子发生、影响精子活力、顶体反应或获能、干扰精卵相互作用、结合或融合,及阻断胚胎种植或发育的一个或多个环节,从而达到控制生育的目的。目前,避疫苗的研究主要集中在靶抗原的筛选,而在疫苗设计和免疫策略的研究方面落后于他治疗性和预防性疫苗。截至目前,已有数量众多的免疫避孕靶抗原被筛选出来,是仅有人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)嵌合肽疫苗进入临试验,因而,有必要在现有免疫避孕靶抗原的基础上,结合在其他治疗性和预性疫苗中成功应用的疫苗设计和免疫策略,深入挖掘现有免疫避孕靶抗原的潜力,使得更多的避孕疫苗有望进入临床。近年来,基于Eppin的避孕疫苗研究取得了一定的进展,但仍存在以下问题:(1)采用Eppin优势表位疫苗进行免疫能减少不良反应,但免疫原性差;(2)表位交联载体蛋白的方法可以增强免疫原性,但所产生的抗体特异性差;(3)基于Eppin的避孕疫苗实验研究中通常联合使用免疫佐剂如弗氏佐剂,其在人体中的应用存在安全性问题;因此,解决这一问题的关键在于构建更加安全、有效的避孕疫苗运载体系。微针透皮给药是一种集合注射给药和经皮贴剂为一体的新型透皮给药平台技术。在很小的面积上,以数百根微针刺穿皮肤角质层,使药物进入表皮层而被表皮中朗格汉斯细胞(LC)直接摄取。既允许药物通过角质层这个重要的屏障,又避开真皮层的神经不会引起痛觉。可以减少注射器使用带来的副作用,避免口服免疫引起的肝脏首过效应和消化道酶、胃酸对抗原的破坏,避免滴鼻免疫造成的大部分抗原流入食道的缺点。微针作为疫苗免疫途径,可诱导系统免疫和黏膜免疫的双重功效,具有精确、无痛、安全、高效、便利等优点。微针给药对药物的极性、渗透系数、熔点等都没有限制,大大拓宽候选药物的范围。而与其他致孔促渗给药比较,微针显 示对皮肤较小的损伤性。目前,微针结合免疫性避孕的研究还比较少。本专利技术是针对上述不足之处提出改进的。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术的目的之一在于提供,其操作简单,适用于规模生产。其制备的避孕微针避孕效果明显。,具体包括以下步骤:A附睾蛋白酶抑制蛋白的表位肽的合成将筛选的人Eppin蛋白的优势抗原表位的序列(详见表1)和具有自组装形成纳米纤维结构的多肽的序列串联,得表位肽;本文档来自技高网
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【技术保护点】
避孕微针的制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤:A附睾蛋白酶抑制蛋白的表位肽的合成将筛选的人Eppin蛋白的优势抗原表位的序列和具有自组装形成纳米纤维结构的多肽的序列串联,得融合表位肽;B自组装系统的构建或将步骤A所得的融合表位肽充分溶解于超纯水中,并与PBS混合,得自组装系统工作液;C微针的包被将微针浸泡至自组装系统工作液中至抗原充分包被所述微针,得避孕微针。

【技术特征摘要】
1.避孕微针的制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤: A附睾蛋白酶抑制蛋白的表位肽的合成 将筛选的人Eppin蛋白的优势抗原表位的序列和具有自组装形成纳米纤维结构的多肽的序列串联,得融合表位肽; B自组装系统的构建 或将步骤A所得的融合表位肽充分溶解于超纯水中,并与PBS混合,得自组装系统工作液; C微针的包被 将微针浸泡至自组装系统工作液中至抗原充分包被所述微针,得避孕微针。2.根据权利要求1所述的避孕微针的制备方法,其特征在于:所述人Eppin蛋白的优势抗原表位序列如SEQ ID NO:1所示,通过人工合成肽技术固相合成。3.根据权利要求2所述的避孕微针的制备方法,其特征在于:所述自组装形成纳米纤维结构的多肽的序列如SEQ ID NO:2所示,通过人工合成肽技术固相合成。4.根据权利要求3所述的避孕微针的制备方法,其特征在于:所述人Eppin蛋白的优势抗原表位的序列和所述自组装形成纳米纤维结构的多肽的序列组成的所述表位肽的氨基酸序列如SEQ I...

【专利技术属性】
技术研发人员:梁志清唐帅何畏王延洲孙黎黎徐萍萍
申请(专利权)人:中国人民解放军第三军医大学第一附属医院
类型:发明
国别省市:

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