本发明专利技术公开了一种N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-顺丁烯二酰亚胺在抗真菌感染中的应用；N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-顺丁烯二酰亚胺可有效抑制白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、隐球酵母菌、须癣毛癣菌、红色毛癣菌或烟曲霉，为其提供了抗真菌感染方面的新应用；N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-顺丁烯二酰亚胺的Vero、PK11和Hepg2细胞毒性低，都>10μg/mL。
【技术实现步骤摘要】
N- (3, 5- 二氯苯基)-3, 4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺在抗真菌感染中的应用(-)
本专利技术涉及顺丁烯二酰亚胺化合物的应用，特别涉及一种N-(3，5-二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺在抗真菌感染中的应用。(二)
技术介绍
含顺丁烯二酸酐或顺丁烯二酰亚胺结构的天然化合物均具有良好的生物活性，尤其是抗真菌活性。在上世纪60年代末 ，原上海农药所中国工程院院士沈寅初课题组在筛选抗油菜菌核病(Sclerotinia sclerotiorum)抗生素时发现的含顺丁烯二酸酐结构的天然化合物(图1) 一变构霉素和变构菌素，两者对真菌都有良好的活性。含马来酸酐的Zopfiellin被日本尼桑公司开发为新一代防治灰霉病生物农药，它对菌核病菌的MIC为1.56 u g/mLo Scytalidin、Viburspiran、Heveadride 和 Dihydroepiheveadride 都具有很广的抗真菌谱，后两个化合物已被列为抗真菌候选药物。而含顺丁烯二酰亚胺结构的天然化合物-焦土霉素、Aqabamycins以及Arcyruarubins对许多细菌、真菌均具有较好的抗菌效果，其中焦土霉素作为抗菌药已在临床上使用数十年之久。以顺丁烯二酸酐或顺丁烯二酰亚胺为核心结构衍生得到的该类化合物对油菜菌核病菌和灰霉病菌同样具有较好的抑菌效果，而且毒性低。更重要的是，Sortino等人报道了顺丁烯二酰亚胺类化合物对人体易感染真菌有很好的抑制作用，他们声称该类化合物是有潜力的抗真菌感染候选药物。但只描述了部分化合物。真菌感染包括浅部真菌病和深部真菌病，凡具有杀灭或抑制真菌生长或繁殖的药物称为抗真菌药(antifungal agents),其研究已有近百年的历史。第一代以灰黄霉素为代表，20世纪30年代末从微生物发酵代谢产物中分离得到的，第一个应用于临床，对皮肤癣菌有较强的抑制作用，但对深部真菌无效，现已停止生产和使用；另外还包括制霉菌素及两性霉素B，均属多烯大环内酯类，主要用于深部真菌的治疗。第二代为咪唑类，主要有酮康唑、克霉唑、咪康唑、益康唑等。第三代为三唑类，包括伊曲康唑、氟康唑以及丙烯胺类的特比萘芬等。目前，抗真菌感染药物具有品种少、毒性大等的特点。寻找新的抗真菌感染药物是永恒的课题。新化合物N-(3，5- 二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺的合成制备我们已在国家专利技术专利201310047509.7中加以描述。但有关该化合物的抗真菌感染中应用研究还未见报道。(三)
技术实现思路
本专利技术目的是提供N-(3，5- 二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺在抗真菌感染方面的应用，为新抗真菌感染药物筛选提供依据。本专利技术采用的技术方案是:本专利技术提供N-(3，5- 二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺在抗真菌感染中的应用。进一步,所述真菌为白色念珠菌(Canidia albicans)、光滑念珠菌(C.glabrata)、克柔念珠菌(C.krusei)、隐球酵母菌(Cryptococcus neoformans)、须癖毛癖菌(Trichophyton mentagrophytes)、红色毛癖菌(T.rubrum)或烟曲霉(Aspergillusfumigatus),优选所述真菌为克柔念珠菌(C.krusei)或隐球酵母菌(Cryptococcusneoformans)。进一步，所述N-(3，5- 二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺的最小抑菌浓度(MIC)为0.3~5.0 ii g/mL,通常所述N- (3，5- 二氯苯基)_3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺的MIC都在5.0 ii g/mL以下，特别是对隐球酵母菌的MIC为0.3 y g/mL。本专利技术所述N-(3，5- 二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺在抗真菌感染中的应用方法为:在96孔板中加入ro培养基和测试药物，在特定的培养条件下培养真菌，检测其OD值,并与对照相比计算抑制率及MIC等,具体操作见文献Li, et al.Potent in vitroantifungal activities of naturally occurring acetylenic acids.ANTIMICROBIALAGENTS AND CHEMOTHERAPY, 2008，52:2442-2448。本专利技术的创新性主要体现在:(l)N-(3，5-二氯苯基)-3，4-二氯-顺丁烯二酰亚胺可有效抑制白色念珠菌(Canidia albicans)、光滑念珠菌(C.glabrata)、克柔念珠菌 C.krusei)、隐球酵母菌(Cryptococcus neoformans)> 须癖毛癖菌(Trichophytonmentagrophytes)、红色毛癖菌(T.rubrum)或烟曲霉(Aspergillus fumigatus),为其提供了抗真菌感染方面的新应用；(2 )N- (3，5- 二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺的Vero、PKll和Hepg2细胞毒性低，都>10 ii g/mL。(四)【附图说明】图1为含顺丁烯二酸 酐或顺丁烯二酰亚胺结构的化合物。(五)【具体实施方式】下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于此:实施例1:N-(3，5- 二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺的制备称取2，3-二氯顺丁烯二酸酐2.505g (0.015mol)，量取4_甲苯苯胺2.415g(0.015mol)，直接加入到装有磁力搅拌子的干燥三口烧瓶中，再加入25mL冰醋酸作溶剂；加热120°C回流反应3h，待反应结束后冷却至室温，减压蒸馏除去溶剂，得到晶体粗产物，再用丙酮作溶剂加热105°C进行重结晶，过滤，滤饼干燥，得到黄色固体产物3.92g，产率84.5%。所得产物经1H NMR, MS光谱分析，确证为N- (4-甲苯基)-3，4- 二氯基顺丁烯二酰亚胺。1H MMR(500MHz，CDCl3)S7.43(t，J=1.8Hz，lH)，7.36(d，J=1.8Hz，2H).EIMS m/z (%): 309.0 (100) [M]+, 229.9 (27)，186.9 (14)，124.0 (28)，87.0 (34)。实施例2分别精确称取实施例1方法制备的N-(3，5- 二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺2.0mg、两性霉素B (购自Sigma)2.0mg、特比萘芬(购自Sigma)2.0mg及化合物B-J各2.0mg，分别用ImL DMSO溶解，然后分别用20%DMS0的生理盐水(V/V)稀释至0.1-20 u g/mL不同梯度浓度，制成药物两性霉素B、药物特比萘芬及药物A-J。菌株:白色念珠菌(Candidaalbicans) ATCC90028、光滑念珠菌(Candidaglabrata)ATCC90030、克柔念珠菌(Candida krusei)ATCC6258、隐球酵母菌(Cryptococcusneoformans) ATCC90113、烟曲霉(Aspergillus fumigatus) ATCC90906、须癖毛癖菌(Trichophyton mentagrophyte本文档来自技高网...
【技术保护点】
N?(3,5?二氯苯基)?3,4?二氯?顺丁烯二酰亚胺在抗真菌感染中的应用。
【技术特征摘要】
1.N-(3, 5- 二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺在抗真菌感染中的应用。2.如权利要求1所述N-(3，5- 二氯苯基)-3，4- 二氯-顺丁烯二酰亚胺在抗真菌感染中的应用，其特征在于所述真菌为白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、隐球酵母菌、须癣毛癣菌、红色毛癣菌或烟曲霉。3.如权利要求2所述N-(3，5- 二氯...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈小龙，范永仙，陆跃乐，李福革，沈寅初，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：
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