利用凝胶渗透色谱处理生物检材的安眠镇静类药物检验方法技术

本发明专利技术公开利用凝胶渗透色谱处理生物检材的安眠镇静类药物检验方法，包括如下步骤：(1)在含有安眠镇静类药物的生物检材中加入有机溶剂A，离心，分离有机相，将得到的有机相浓缩至干，再用有机溶剂A溶解，过有机微孔滤膜后得提取液；(2)提取液进凝胶渗透色谱净化柱，用有机溶剂B淋洗，收集淋洗液，在浓缩仪上吹干，用有机溶剂C溶解后得到待测液；凝胶渗透色谱净化柱的填充相为苯乙烯-二乙烯苯共聚物；(3)利用气相色谱仪对待测液进行检测。本发明专利技术将凝胶渗透色谱技术应用到毒物分析领域，针对安眠镇静类药物，建立生物检材中简单、快速、灵敏度和回收率高的前处理技术，缩短前处理时间、减少分析成本、提高检测结果的可靠，以解决毒物分析中检材种类繁多、成分复杂的问题，为提高公安行业毒物分析检验工作的效率提供保障。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开，包括如下步骤：(1)在含有安眠镇静类药物的生物检材中加入有机溶剂A，离心，分离有机相，将得到的有机相浓缩至干，再用有机溶剂A溶解，过有机微孔滤膜后得提取液；(2)提取液进凝胶渗透色谱净化柱，用有机溶剂B淋洗，收集淋洗液，在浓缩仪上吹干，用有机溶剂C溶解后得到待测液；凝胶渗透色谱净化柱的填充相为苯乙烯-二乙烯苯共聚物；(3)利用气相色谱仪对待测液进行检测。本专利技术将凝胶渗透色谱技术应用到毒物分析领域，针对安眠镇静类药物，建立生物检材中简单、快速、灵敏度和回收率高的前处理技术，缩短前处理时间、减少分析成本、提高检测结果的可靠，以解决毒物分析中检材种类繁多、成分复杂的问题，为提高公安行业毒物分析检验工作的效率提供保障。【专利说明】
本专利技术涉及刑事侦查领域的药物、毒物检测方法，特别涉及一种。
技术介绍
随着技术的进步，对药物、毒物分析检验的要求越来越高，包括高重现性、高回收率、低检出限和操作简单易行等，因而急需建立一种简单、快速、灵敏度和回收率高的前处理方法。目前现有的前处理技术主要有液液萃取、固相萃取、固相微萃取等，这几种前处理技术都是根据不同化合物的性质对其进行分离提取，存在操作步骤繁琐、容易出现漏检情况。在样品前处理技术中，凝胶渗透色谱技术作为一种新型的分析技术，仪器再生能力强，无可逆吸附，对所有样品都能够完全洗脱等优点已显现了其潜在的应用前景。凝胶渗透色谱的理论、试验技术、仪器性能尤其是高效填充柱等方面的快速发展，其应用范围逐渐从生物化学和高分子化学扩展到工业、农业、医药、卫生等领域。目前国内外的凝胶渗透色谱研究多集中于对植物性产品如蔬菜、水果、谷物等的处理。由于血液、尿液和肝组织等生物检材中含有的蛋白质及油脂等大分子杂质难以去除，因此还没有针对血液、尿液和肝组织等生物检材中某类毒物的系统检验方法。在国内公安系统的毒物分析检测中，凝胶渗透色谱的应用还处于起步阶段，尚缺少有效可行的方法。因而建立液、尿液和肝组织等生物检材中常见药物、毒物的凝胶渗透色谱处理技术，并应用于实际办案中是当前的一项关键任务。
技术实现思路
针对现有技术中存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种，提高对生物检材中蛋白以及油脂等大分子杂质的去除效率，使得对生物检材中的拟除虫菊酯类农药进行检测时分离效果好、灵敏度高。本专利技术的技术方案是这样实现的:，包括如下步骤:(I)在含有安眠镇静类药物的生物检材中加入有机溶剂A，离心，分离有机相，将得到的有机相浓缩至干，再用有机溶剂A溶解，过有机微孔滤膜后得提取液；(2)提取液进凝胶渗透色谱净化柱，用有机溶剂B淋洗，收集淋洗液，在浓缩仪上吹干，用有机溶剂C溶解后得到待测液；凝胶渗透色谱净化柱的填充相为苯乙烯-二乙烯苯共聚物；(3)利用气相色谱仪对待测液进行检测。本专利技术的有益效果是:本专利技术将凝胶渗透色谱技术应用到毒物分析领域，选择有代表性的6种安眠镇静类药物，建立血液、尿液和肝组织中简单、快速、灵敏度和回收率高的前处理技术，缩短前处理时间、减少分析成本、提高检测结果的可靠，以解决毒物分析中检材种类繁多、成分复杂的问题，为提高公安行业毒物分析检验工作的效率提供保障。 本专利技术优选了提取剂，采用凝胶渗透色谱净化，气相色谱检测，建立了一种快速、准确、灵敏地测定血液、尿液、肝组织中6种安眠镇静类药物的较理想的方法，具有以下几个优点:I简单、高效、自动化的样品前处理方法。利用乙酸乙酯和环己烷的混合溶液、乙酸乙酯、二氯甲烷、环己烷或环己醇和丁酸丙酯的混合物作为血液、尿液和肝组织中6种安眠镇静类药物的提取溶剂，采用体积比为I: I的环己烷和乙酸乙酯混合溶液作为流动相，使用凝胶渗透色谱能够有效地净化血液、尿液、肝组织提取液中的蛋白、油脂、色素等大分子杂质，实现分离并富集安眠镇静类药物。2毛细管气相色谱电子捕获检测器和氮磷检测器测定生物检材中6种安眠镇静类药物。该法检测生物样品中6种安眠镇静类药物的最小检出质量比范围30~80ng/mL，精密度1.7%~9.3%，不同添加浓度的平均回收率64.9~96.4%。通过GC/MS对6种安眠镇静类药物进行确证，空白样品中未检出6种安眠镇静类药物。3对凝胶渗透色谱净化条件进行了优化、对外标法定量、添加回收率以及GC-ECD、GC-NPD检测进行了研究，建立了一种快速有效的检测血液、尿液和肝组织中6种安眠镇静类药物的较为理想的方法。优选使用环己醇和丁酸丙酯的混合物、异戊醚和环庚烷的混合溶液、以及环己酮和乙二醇二乙醚的混合溶液作为提取溶剂，并且使用凝胶渗透色谱净化技术，能够提高对血液、尿液和肝组织中蛋白以及油脂等大分子杂质的去除效率，并且采用GC-ECD和GC-NPD检测6种安眠镇静类药物农药，使得本专利技术具有分离效果好、灵敏度高等优点。【专利附图】【附图说明】图1A为地西泮、艾司唑仑、阿普唑仑和三唑仑的标准品色谱图；图1B为氯丙嗪和异丙嗪的标准品色谱图；图2A空白血液中添加地西泮、艾司唑仑、阿普唑仑和三唑仑标准品色谱图；图2B空白血液中添加氯丙嗪和异丙嗪标准品色谱图；图3A空白尿液中添加地西泮、艾司唑仑、阿普唑仑和三唑仑标准品色谱图；图3B空白尿液中添加氯丙嗪和异丙嗪标准品色谱图；图4A空白肝组织中添加地西泮、艾司唑仑、阿普唑仑和三唑仑标准品色谱图；图4B空白肝组织中添加氯丙嗪和异丙嗪标准品色谱图；图5A~图5X为空白血液、空白尿液、空白肝组织中添加安眠镇静类药物标准品在不同常温下放置一定时间的GPC净化效果比较(黑色:GPC净化前；紫色:GPC净化后)；其中:图5A为空白血液中添加苯二氮卓类(在本专利技术中，苯二氮卓类包括:地西泮、艾司唑仑、阿普唑仑和三唑仑)标准品并在4°C放置I星期；图5B为空白血液中添加苯二氮卓类标准品并在4°C放置2星期；图5C为空白血液中添加苯二氮卓类标准品并在常温放置I星期；图为空白血液中添加苯二氮卓类标准品并在常温放置2星期；图5￡为空白尿液中添加苯二氮卓类标准品并在4°C放置I星期；图5F为空白尿液中添加苯二氮卓类标准品并在4°C放置2星期；图5G为空白尿液中添加苯二氮卓类标准品并在常温放置I星期；图5H为空白尿液中添加苯二氮卓类标准品并在常温放置2星期；图51为空白肝组织中添加苯二氮卓类标准品并在4°C放置I星期；图5J为空白肝组织中添加苯二氮卓类标准品并在4°C放置2星期；图5K为空白肝组织中添加苯二氮卓类标准品并在常温放置I星期；图5L为空白肝组织中添加苯二氮卓类标准品并在常温放置2星期；图511为空白血液中添加噻吩嗪类标准品(在本专利技术中，噻吩嗪类包括:氯丙嗪和异丙嗪)标准品并在4°C放置I星期；图5N为空白血液中添加噻吩嗪类标准品并在4°C放置2星期；图50为空白血液中添加噻吩嗪类标准品并在常温放置I星期；图5P为空白血液中添加噻吩嗪类标准品并在常温放置2星期；图5Q为空白尿液中添加噻吩嗪类标准品并在4°C放置I星期；图5R为空白尿液中添加噻吩嗪类标准品并在4°C放置2星期；图5S为空白尿液中添加噻吩嗪类标准品并在常温放置I星期；图5T为空白尿液中添加噻吩嗪类标准品并在常温放置2星期；图5U为空白肝组织中添加噻吩嗪类标准品并在4°C放置I星期；图5V为空白肝组织中添加噻吩嗪类标准品并在4°C放置2星期；图5W本文档来自技高网...

【技术保护点】
利用凝胶渗透色谱处理生物检材的安眠镇静类药物检验方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)在含有安眠镇静类药物的生物检材中加入有机溶剂A，离心，分离有机相，将得到的有机相浓缩至干，再用有机溶剂A溶解，过有机微孔滤膜后得提取液；(2)提取液进凝胶渗透色谱净化柱，用有机溶剂B淋洗，收集淋洗液，在浓缩仪上吹干，用有机溶剂C溶解后得到待测液；凝胶渗透色谱净化柱的填充相为苯乙烯?二乙烯苯共聚物；(3)利用气相色谱仪对待测液进行检测。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：栾玉静，王瑞花，董颖，张蕾萍，杜鸿雁，常靖，王芳琳，王炯，张云峰，侯小平，于忠山，何毅，崔冠峰，
申请(专利权)人：公安部物证鉴定中心，
类型：发明
国别省市：