香蜂草苷和异樱花素的制备方法及其在抗糖尿病药物中的应用技术

本发明专利技术属于制药技术领域。本发明专利技术公开了香蜂草苷和异樱花素在制备糖尿病药物中的应用和制备方法。香蜂草苷和异樱花素是从风轮菜(Clinopodium.chinense(Benth.)O.Kuntze)全草中分离得到。风轮菜全草干燥粉碎、醇提取、减压回收后得到浓缩的提取物，经碱溶酸沉、乙酸乙酯萃取后得到乙酸乙酯提取物，经大孔树脂、聚酰胺、硅胶、凝胶柱层析和重结晶，得到香蜂草苷和异樱花素。异樱花素和香蜂草苷具有显著地降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖，降低血清总胆固醇含量，改善游离脂肪酸所致的血管内皮细胞胰岛素抵抗和高糖对血管内皮细胞的损伤的作用。可用于制备预防和治疗糖尿病、糖尿病引起的脂代谢紊乱、冠心病、动脉粥样硬化等心脑血管面疾病以及糖尿病周围血管病变。

The application of the preparation method of Monarda glycoside and isosakuranetin and in antidiabetic agents

The invention belongs to the field of pharmaceutical technology. The present invention discloses Melissa officinalis glycosides and isosakuranetin preparation and application for diabetes drugs in preparation method. Monarda glycoside and isosakuranetin from calamint (Clinopodium.chinense (Benth.) O.Kuntze) isolated from the whole plant. Clinopodium herb drying and crushing, alcohol extraction, decompression recovering concentrated extract by alkali solution and acid, ethyl acetate extraction by ethyl acetate extract, macroporous resin, polyamide, silica gel, gel column chromatography and recrystallization, and obtained Monarda glycoside isosakuranetin. Isosakuranetin and Monarda glycoside has significantly reduced four in alloxan diabetic mice blood glucose, reduce serum total cholesterol content, improve the damage caused by free fatty acids in vascular endothelial insulin resistance and glucose on vascular endothelial cell function. It can be used to prepare and prevent diabetes mellitus, diabetes mellitus, diabetes mellitus, diabetes mellitus, diabetes mellitus, diabetes mellitus, diabetes mellitus, diabetes mellitus, diabetes mellitus, diabetes mellitus, diabetes mellitus, diabetes mellitus and diabetes mellitus.

【技术实现步骤摘要】
香蜂草苷和异樱花素的制备方法及其在抗糖尿病药物中的应用一、
本专利技术属于制药
，涉及黄酮类化合物香蜂草苷及其苷元异樱花素的制备方法，并涉及香蜂草苷和异樱花素在制备预防和治疗糖尿病、糖尿病引起的脂代谢紊乱、冠心病、动脉粥样硬化等心脑血管疾病以及糖尿病周围血管病变的药物中的应用。二、
技术介绍
糖尿病是由遗传和环境因素相互作用而引起的一组代谢异常综合征，以高血糖为特征，代谢紊乱为表现，与胰岛素分泌密切相关。糖尿病可分为胰岛素依赖型糖尿病(Insulin Dependent Diabetes Mellitus, IDDM又称I型)和非膜岛素依赖型糖尿病(Noinsulin Dependent Diabetes Mellitus, NIDDM 又称 II 型)，后者约占患者总数的95% -99%。糖尿病目前已成为严重的世界公共卫生问题，发病率急速增长，成为继心脑血管疾病、恶性肿瘤之后第三位严重危害人类健康的慢性疾病。据《2007年版中国2型糖尿病防治指南》的数据表明，2007年全球有2.33亿糖尿病患者，预计到2025年全球将有3.80亿，增长72%，其中亚洲增长尤为迅速达91%。目前资料显示，我国20岁以上成人糖尿病的患病率已达到9.7%，位居世界第一。糖尿病病人致死、致残率高的主要原因是糖尿病并发症，包括急性和慢性并发症两种。其中慢性并发症包括大血管病变(主要是动脉粥样硬化)和微血管病变，严重影响糖尿病患者生命和生活质量。其中心血管病变是糖尿病的主要死亡原因,约占糖尿病患者的80%。糖尿病的慢性高血糖、胰岛素抵抗和血脂代谢异常通过影响内皮细胞功能，最终导致血管损伤,使之易患动脉硬化和冠心病等心血管疾病。其中，内皮细胞损伤或内皮功能失调是糖尿病血管并发症的始动因素。因此，保护内皮细胞免受有害因素的损伤，维护其正常功能对预防糖尿病慢性血管并发症具有重要的意义。血管内皮细胞在糖尿病血管并发症的生理病理过程中行使着重要的调节功能。研究证明血管内皮功能障碍是血管并发症的重要发生因素。高血糖可通过多种途径引起血管内皮细胞凋亡，导致血管内皮功能障碍。研究表明，长期的高血糖可能通过以下途径引起血管内皮细胞凋亡:(I)高糖引起的氧化应激和硝化应激；(2)线粒体依赖性和非依赖性凋亡；(3)MAPK介导的细胞凋亡；(4)p53介导的细胞凋亡；(5)高糖通过影响细胞周期进程导致细胞凋亡。高血糖环境诱导内皮细胞凋亡显著增加，最终导致血管内皮细胞受损。血管内皮细胞是胰岛素的靶器官之一，胰岛素介导的血管舒张主要是通过增加内皮细胞产生和释放一氧化氮(NO)而起作用的。游离脂肪酸(FFA)通过抑制葡萄糖氧化、抑制肌糖原合成、促进糖异生、引起高胰岛素血症以及激活氧化应激过程导致胰岛素抵抗。循环血中游离脂肪酸升高后，内皮细胞胰岛素受体底物(IRS)-1酪氨酸磷酸化水平以及蛋白激酶B(Akt) (Ser473)磷酸化水平明显降低，同时，血清NO水平降低，血管内皮细胞中eNOSmRNA表达亦下降，eNOS活性降低。故认为高FFA血症通过抑制内皮细胞eNOS磷酸化水平及基因表达使内皮源性NO生成减少，从而导致代谢综合征内皮依赖性血管舒张功能受损，引起血管收缩痉挛、血小板被激活、白细胞附壁、平滑肌细胞增生和血管重塑等病理过程，最终导致动脉粥样硬化和冠心病等心血管疾病以及糖尿病周围血管病变。目前，临床使用的抗糖尿病药物主要有胰岛素、二甲双胍、磺酰脲类、噻唑烷二酮类药物、α-葡糖苷酶抑制剂等。这些药物具有良好的疗效，但仍存在一些局限性。中药治疗糖尿病已经有了几千年的经验积累，且有着自己独特的优势:采用中药治疗糖尿病不仅仅是降低血糖，重在调理人体全面机能，整体恢复血管弹性，增加心、肝、肾、视网膜等组织营养性血流量，特别是中药能够克服化学合成药在降血糖的同时产生的副作用或诱发加重并发症的事实。因此，开发中药及天然药物作为预防和治疗糖尿病的药物具有广阔的发展前景。近年来众多中外学者从天然药物中提取、分离出多种具有降低血糖作用的化合物，主要有黄酮类、多糖、皂苷、生物碱等，其中关于黄酮类化合物抗糖尿病的研究受到了极大的关注。黄酮类化合物抗糖尿病机制主要表现在以下几个方面:(I)保护胰岛β细胞免受损伤并促进胰岛β细胞再生，研究表明，黄酮类成分可通过抗氧化作用或抗炎作用保护胰岛β细胞免受损伤，促进破坏的胰岛β细胞再生而促进胰岛素的分泌；(2)类胰岛素作用；(3) α -葡萄糖苷酶抑制剂；(4)改善胰岛素抵抗，有些黄酮类物质可通过抗炎，抗氧化，调节脂肪因子，促进外周靶细胞、靶器官对葡萄糖的利用改善胰岛素抵抗。风轮菜为唇形科风轮菜属植物风轮菜(Clinopodium.chinense (Benth.) 0.Kuntze)的全草。风轮菜微苦、涩，凉，归肝经。传统药学用于治疗子宫肌瘤出血、牙眼出血、尿血、创伤出血、感冒、中暑、急性胆囊炎、肝炎、肠炎、痢疾、乳腺炎、疔疮肿毒、过敏性皮炎等症状，在民间，风轮菜广泛用于治疗糖尿病。风轮菜含有黄酮类、有机酸类、芳香族类、三萜及其皂苷类、留体类等多种类型的化学成分，其中黄酮类和三萜皂苷类成分为该属植物的主要活性成分。香蜂草苷是风轮菜黄酮的主要成分之一，属于二氢黄酮苷类。现代药理研究表明，香蜂草苷具有抗氧化，引起神经肿瘤细胞凋亡的作用，也可用于出血症的防治。但是，尚未有香蜂草苷和异樱花素(香蜂草苷的苷元)在降血糖、降血脂、改善游离脂肪酸所致的血管内皮细胞胰岛素抵抗和高糖所致的血管内皮细胞损伤的报道。三、
技术实现思路
本专利技术包括了两部分内容，第一部分:异樱花素和香蜂草苷的制备方法；第二部分:异樱花素和香蜂草苷在降血糖、降血脂、改善血管内皮细胞胰岛素抵抗和保护高糖对血管内皮细胞损伤的作用，及其在防治糖尿病、糖尿病引起的脂代谢紊乱、冠心病、动脉粥样硬化等心脑血管方面疾病以及糖尿病周围血管病变的应用。本专利技术之所以用碱溶酸沉，乙酸乙酯萃取，再用大孔吸附树脂的方法富集香蜂草苷，是因为传统的乙酸乙酯萃取富集香蜂草苷的效果不理想，总浸膏直接用大孔树脂富集，柱填料用量太大，大大延长了生产时间。之后用聚酰胺柱层析分离得到香蜂草苷，是因为硅胶和凝胶S^hadex LH-20的分离效果不明显，且香蜂草苷属于二氢黄酮类，聚酰胺对它的死吸附量少，目标产物损失少。整个专利技术中，所用到的柱填料都可再生利用，而且再生方法简单，所用到的洗脱剂为乙醇水溶液，低成本，回收率高。此方法可适用于工业生产。香蜂草苷和异樱花素的制备方法如下:(I)将风轮菜全草干燥粉碎；用8_10倍量80%乙醇回流提取，或浸溃提取，提取液减压浓缩；(2)将浓缩的提取物用I % NaOH水溶液溶解，后用5% HCl调pH为5，再用乙酸乙酯萃取8-10次，得到乙酸乙酯浸膏。(3)乙酸乙酯提取物进行大孔树脂柱层析，先用30%乙醇除去部分杂质，再用50%乙醇和95%乙醇洗脱。收集50%乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥得到香蜂草苷粗品。(4)香蜂草苷粗品进行聚酰胺柱层析，收集15%乙醇洗脱液，减压浓缩，重结晶得香蜂草苷。(5)将步骤(3)中的95%的乙醇洗脱液减压浓缩，干燥，进行硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯(5:1)洗脱，浓缩，干燥得到异樱花素粗品。(6)异樱花素粗品进行凝胶柱层析，二氯甲本文档来自技高网...

【技术保护点】
香蜂草苷和异樱花素在制备预防和治疗糖尿病、糖尿病引起的脂代谢紊乱、冠心病、动脉粥样硬化等心脑血管疾病以及糖尿病周围血管病变的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.香蜂草苷和异樱花素在制备预防和治疗糖尿病、糖尿病引起的脂代谢紊乱、冠心病、动脉粥样硬化等心脑血管疾病以及糖尿病周围血管病变的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述应用中香蜂草苷和异樱花素通过降低血糖、降血脂，改善游离脂肪酸所致的胰岛素抵抗和高糖所致的血管内皮细胞损伤来发挥作用。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于其中的香蜂草苷和异樱花素的制备方法是: (1)将风轮菜全草干燥粉碎；用8-10倍量80%乙醇回流提取，或浸溃提取，提取液减压浓缩； (2)将浓缩的提取物用I% NaOH溶解，后用5% HCl调pH为5，再用乙酸乙酯萃取8-10次，得到乙酸乙酯浸膏； (3)乙酸乙酯提取物进行大孔树脂柱层析，先用30%乙醇除去部分杂质，再用50%、95%乙醇洗脱，收集50%乙醇洗脱液，减压浓缩，干...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴斐华，梁敬钰，曾彪，薛世姣，任蓓，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：