本发明专利技术公开了一种提取纯化构树黄酮醇A的方法，包括以下步骤：（1）以构树根皮为原料，进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质；（2）残渣加丙酮溶液进行超声循环提取；（3）提取液浓缩后上大孔树脂柱，先用水和40-60%乙醇溶液洗脱，再用85-95%乙醇溶液洗脱，收集85-95%乙醇洗脱液；（4）洗脱液浓缩，上硅胶短粗柱，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，放置结晶；（5）分出结晶，丙酮-正己烷混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得构树黄酮醇A。本发明专利技术方法操作简单，可实现规模化生产。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种提取纯化构树黄酮醇A的方法，包括以下步骤：（1）以构树根皮为原料，进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质；（2）残渣加丙酮溶液进行超声循环提取；（3）提取液浓缩后上大孔树脂柱，先用水和40-60%乙醇溶液洗脱，再用85-95%乙醇溶液洗脱，收集85-95%乙醇洗脱液；（4）洗脱液浓缩，上硅胶短粗柱，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，放置结晶；（5）分出结晶，丙酮-正己烷混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得构树黄酮醇A。本专利技术方法操作简单，可实现规模化生产。【专利说明】一种提取纯化构树黄酮醇A的方法
本专利技术属于天然药物领域，具体而言，本专利技术涉及一种提取纯化构树黄酮醇A的方法。
技术介绍
构树黄酮醇A (Broussoflavonol A),是一种黄酮醇类化合物,分子式:C25H3tlO6,分子量:426.51,黄色无定形粉末(丙酮-己烧)，mp238_240°C。主要存在于桑科(Moraceae)构树的根皮中。现代药理研究表明，构树黄酮醇A能抑制脂质氧化，在鼠脑匀浆中，抑制由Fe2+引起的硫巴比妥酸反应物生成，其IC5tl为2.ΙμΜ;抑制大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖，使由下列三物刺激-胸苷与DNA掺合百分率降为:胎牛血清(FCS，10%), 39.5% ；ADP (IO μ Μ)，67% ；5-ΗΤ (10 μ Μ)，19% ;抗血小板聚集，抑制花生四烯酸诱导的血小板聚集，其 IC50 为 86.7 μ M0经文献检索，尚无适用于高纯度构树黄酮醇A的提取纯化方法报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种适用于规模化生产、产品纯度高的提取纯化构树黄酮醇A的方法。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下: (1)以构树根皮为原料，进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质； (2)残渣加5-10倍(V/W)75-95%丙酮溶液进行超声循环提取1_3次，每次l_2h，合并提取液； (3)提取液浓缩后上大孔树脂柱，先用水和40-60%乙醇溶液洗脱，再用85-95%乙醇溶液洗脱，收集85-95%乙醇洗脱液； (4)洗脱液浓缩，上硅胶短粗柱，柱径高比为1:4-5，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，放置结晶；(5)分出结晶，丙酮-正己烷混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得构树黄酮醇A。所述步骤(I)中超临界二氧化碳萃取温度为35_50°C，压力为20_32MPa，萃取时间为 0.5-lh。所述步骤(3)中大孔树脂可选HPD100、ADS-17、D101或HZ801型。所述步骤(4)中乙酸乙酯-丙酮混合溶液体积比为1:5-15。所述步骤(5)中丙酮-正己烷混合溶剂体积比为1-1.5:1。综上所述，本专利技术存在以下优点: (I)采用超临界二氧化碳萃取技术脱除油脂类物质，快速、高效。(2)采用超声循环提取的方法，提取效率高。(3)采用大孔树脂和硅胶短粗柱层析后进行结晶，，从而获得含量98%以上的构树黄酮醇A，成本低，分离效果好。(4)本专利技术所用试剂乙酸乙酯、丙酮等，可替代通常柱层析采用的氯仿、甲醇，降低毒性和污染。下面将结合【具体实施方式】对本专利技术做进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施例。【具体实施方式】实施例1: 取构树根皮粗粉500g，采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质，萃取温度为35°C，压力为20MPa，萃取时间为lh，残渣加10倍(V/W) 90%丙酮溶液进行超声循环提取I次，每次lh，合并提取液，浓缩后上HPD100型大孔树脂柱，先用水和40%乙醇溶液洗脱，再用85%乙醇溶液洗脱，收集85%乙醇洗脱液，浓缩，与100-200目的硅胶按重量比I: I拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为1: 5，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，依次按1: 5、1:10、1:15体积比进行洗脱，收集含构树黄酮醇A的洗脱液，回收试剂，将所得构树黄酮醇A浓缩液置于结晶罐中静置20小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮-正己烷(1.5:1)混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得构树黄酮醇Al.1A，纯度为97.4%。 实施例2: 取构树根皮粗粉500g，采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质，萃取温度为40°C，压力为25MPa，萃取时间为0.5h，残渣加7倍(V/W) 80%丙酮溶液进行超声循环提取2次，每次lh，合并提取液，浓缩后上HZ801型大孔树脂柱，先用水和45%乙醇溶液洗脱，再用90%乙醇溶液洗脱，收集90%乙醇洗脱液，浓缩，与100-200目的硅胶按重量比1:1拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为1: 4，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，依次按1: 5、1: 9、1:13体积比进行洗脱，收集含构树黄酮醇A的洗脱液，回收试剂，将所得构树黄酮醇A浓缩液置于结晶罐中静置24小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮-正己烷(1:1)混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得构树黄酮醇Al.3A，纯度为98.2%。实施例3: 取构树根皮粗粉500A，采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质，萃取温度为45°C，压力为28MPa，萃取时间为0.5h，残渣加10倍(V/W) 90%丙酮溶液进行超声循环提取I次，每次2h，合并提取液，浓缩后上DlOl型大孔树脂柱，先用水和60%乙醇溶液洗脱，再用85%乙醇溶液洗脱，收集85%乙醇洗脱液，浓缩，与100-200目的硅胶按重量比I: I拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为1: 5，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，依次按1: 5、1:10、1:15体积比进行洗脱，收集含构树黄酮醇A的洗脱液，回收试剂，将所得构树黄酮醇A浓缩液置于结晶罐中静置12小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮-正己烷(1.5:1)混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得构树黄酮醇Al.0A，纯度为98.6%。实施例4: 取构树根皮粗粉lkA，采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质，萃取温度为50°C，压力为32MPa，萃取时间为0.5h，残渣加6倍(V/W) 70%丙酮溶液进行超声循环提取3次，每次lh，合并提取液，浓缩后上ADS-17型大孔树脂柱，先用水和55%乙醇溶液洗脱，再用95%乙醇溶液洗脱，收集95%乙醇洗脱液，浓缩，与100-200目的硅胶按重量比I: I拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为1: 3，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，依次按1: 6、1: 11、1:14体积比进行洗脱，收集含构树黄酮醇A的洗脱液，回收试剂，将所得构树黄酮醇A浓缩液置于结晶罐中静置18小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮-正己烷(1:1)混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得构树黄酮醇A2.0A,纯度为98.9%。实施例5: 取构树根皮粗粉5kA，采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质，萃取温度为38°C，压力为30MPa，萃取时间为0.5h，残渣加10倍(V/W) 80%丙酮溶液进行超声循环提取3次，每次2h，合并提取液，浓缩后上HPD100型大孔树脂柱，先用水和50%乙醇溶液洗脱，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种提取纯化构树黄酮醇A的方法，其特征在于按如下工艺步骤进行：（1）以构树根皮为原料，进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取构树根皮中的油脂类物质；（2）残渣加5?10倍（V/W）75?95%丙酮溶液进行超声循环提取1?3次，每次1?2h，合并提取液；（3）提取液浓缩后上大孔树脂柱，先用水和40?60%乙醇溶液洗脱，再用85?95%乙醇溶液洗脱，收集85?95%乙醇洗脱液；（4）洗脱液浓缩，上硅胶短粗柱，柱径高比为1:4?5，以乙酸乙酯?丙酮混合溶液为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，放置结晶；（5）分出结晶，丙酮?正己烷混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得构树黄酮醇A。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张金芳，万冬梅，
申请(专利权)人：南京标科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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