一种抗潮霉素磷酸转移酶的单克隆抗体杂交瘤的制备方法、编码序列及其应用技术

技术编号：9401703 阅读：176 留言：0更新日期：2013-12-05 04:08

本发明专利技术旨在制备针对转基因产品中潮霉素磷酸转移酶(Hygromycin?phosphortransferase，HPT)的特异性单克隆抗体，并建立与之相应的检测方法。具体地说，在转基因植物的研发中，为便于筛选出阳性的转化植株，在转化系统中通常要包含选择标记基因。潮霉素磷酸转移酶(HPT)就是一种常用的编码抗生素抗性基因的标记性基因，它会连同目的基因一同表达，其表达产物也会存留在成熟的转基因植物中。利用HPT单克隆抗体可以检测天然转基因植物中是否表达HPT蛋白，从而判定该植物是否为转基因植物。制备HPT单克隆抗体的专用抗原，是根据HPT氨基酸序列设计的多肽与载体蛋白偶联得到的。该单克隆抗体的亚型为IgG1，亲和常数为1.20×109。本发明专利技术提供了分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞系71379?S-5，保藏号为CGMCC5777，以及该抗体的轻链和重链可变区编码序列。