【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种检测朊病毒蛋白(PrPSC)的方法,包括以下步骤:步骤一:将待测样本经10μM蛋白酶K消化,使样本中正常的PrP被水解,而PrPSC因其蛋白酶抗性不被水解,以消除正常PrP的影响;步骤二:将步骤一处理后的待测样本流经饱和偶联能与朊病毒蛋白(PrPSC)特异识别并结合的重组G5P蛋白的Ni+?NTA树脂,利用重组G5P蛋白捕获待测样本中的朊病毒蛋白(PrPSC),所述的能与朊病毒蛋白(PrPSC)特异识别并结合的重组G5P蛋白是由序列表中序列1基因编码表达的;步骤三:用洗脱缓冲液对经过步骤二后的饱和偶联能与朊病毒蛋白(PrPSC)特异识别并结合的重组G5P蛋白的Ni+?NTA树脂进行洗脱,收集洗脱液,所述的洗脱缓冲液体系的组成及浓度为:20mmol/L?Tris?Cl,150mmol/LNaCl,500mmol/L咪唑,该洗脱缓冲液的pH为7.0;步骤四:用以下方法检测步骤三收集到的洗脱液中的朊病毒蛋白(PrPSC):(a)洗脱的PrPSC的为不溶性蛋白,量多则可见白色沉淀;或(b)洗脱后凝胶电泳经考马斯亮蓝染色出现明显条带即为PrPSC;或(c)利用PrPSC单克隆抗体进行PrPS ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:刘志国,李琦,张大川,房国梁,翟莹,
申请(专利权)人:武汉工业学院,
类型:发明
国别省市:
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