【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种表达铁纳米颗粒以及温度敏感通道的病毒AAVTF,其特征在于,其特征在于,它包括表达温度敏感通道的病毒AAVTF1和表达铁纳米颗粒的病毒AAVTF2,其中,所述病毒AAVTF1通过以下方法制备得到:首先进行目的片段构建设计:TRPV1构建在CMV启动子下游,mCherry报告基因克隆于TRPV1通道下游,在mCherry和TRPV1之间有一个2A自身裂解片段,从而实现TRPV1和mCherry的非融合共表达;然后进行病毒的包装:腺相关病毒AAVTF1经过表达、包装和包埋带有目的片段的质粒后,转染到HEK293T细胞系中,使其充分表达并形成病毒颗粒;48小时后将培养基收集,用多步离心法进行病毒颗粒的纯化和浓缩,最后将病毒溶解在灭菌的PBS中,分装并储存于?80℃备用从而得到病毒AAVTF1;该病毒AAVTF1具有SEQ?ID?NO.1所示的基因序列;所述病毒AAVTF2通过以下方法制备得到:首先进行目的片段构建设计:小鼠铁蛋白重链与小鼠铁蛋白轻链之间用一个可变链接区进行克隆,形成铁蛋白轻链?连接体?重链融合蛋白,铁蛋白轻链?连接体?重链融合蛋白构建位于TRPV1基因下游,EGFP报告基 ...
【技术特征摘要】
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。