禽流感病毒N9型RT-PCR检测试剂盒及检测方法技术

技术编号:9079129 阅读:169 留言:0更新日期:2013-08-22 20:04
本发明专利技术涉及禽流感病毒N9型RT-PCR检测试剂盒及检测方法。目的是提供的检测试剂盒应具有使用方便、检测准确的特点,提供的方法应具有检测准确性高、检测简单方便的特点。技术方案是:一种禽流感病毒N9型的荧光定量RT-PCR检测试剂盒,包括脱氧三磷酸核苷、MgCl2、RT-PCR缓冲液、流感病毒N9基因标准品、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及DNA聚合酶;其特征在于荧光定量RT-PCR检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针;一种禽流感病毒N9型的荧光定量RT-PCR检测方法,按以下步骤进行:(1)提取RNA;(2)进行RT-PCR反应;(3)对RT-PCR反应产物进行荧光检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及流感病毒N9型核酸荧光定量RT-PCR检测试剂盒及检测方法,可应用于流感病毒N9型引起暴发疫情的实验室应急检测。
技术介绍
禽流感病毒属正粘病毒科甲型流感病毒属。禽甲型流感病毒颗粒呈多形性,其中球形直径80 120nm,有囊膜。基因组为分节段单股负链RNA。依据其外膜血凝素(H)和神经氨酸酶(N)蛋白抗原性不同,目前可分为16个H亚型(Hl H16)和9个N亚型(NI N9)。禽甲型流感病毒除感染禽外,还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。以往研究发现可感染人的禽流感病毒亚型为H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3。目前,全球首次发现人感染H7N9禽流感病毒。人感染H7N9禽流感是由H7N9亚型禽流感病毒引起的急性呼吸道传染病。据报道,自2013年2月以来,我国上海市、安徽省、江苏省先后发生不明原因重症肺炎病例,其中确诊人感染H7N9禽流感3例,2例死亡。3例均为散发病例,目前尚未发现3例病例间有流行病学关联。此次报道的为人感染H7N9禽流感病毒。该病毒为新型重配病毒,其内部基因来自于H9N2禽流感病毒。流行病学调查显示H9N2禽流感病毒的传染源目前尚不明本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种禽流感病毒N9型的荧光定量RT?PCR检测试剂盒,包括脱氧三磷酸核苷、MgCl2、RT?PCR缓冲液、禽流感病毒N9基因标准品、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及DNA聚合酶;其特征在于所述荧光定量RT?PCR检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针,所述上游引物、下游引物和特异性探针序列如下:?上游引物N9?FP:5’?ACAATACACGATAGRTCCCAGTA?3’;?下游引物N9?RP:5’?CTAGTACTTGACCACCCAATGC?3’;?特异性探针N9?P:5’?FAM?CTRTCATCACCRCCCACAGTGTA?BHQ1?3’,其中FAM?为荧光报告基团,B...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈直平张严峻李辉
申请(专利权)人:浙江省疾病预防控制中心
类型:发明
国别省市:

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