一种利用蓝藻生产咖啡酸的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用蓝藻生产咖啡酸的方法，步骤如下：（1）将相关基因片段插入质粒pBluescript?II?SK+内，制得重组空白质粒；（2）将核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所述的基因片段插入步骤（1）制得的重组空白质粒的EcoRI-PstI内切酶酶切位点之间，制得重组质粒；（3）将重组质粒转化集胞藻Synechocystis?sp.PCC6803，制得转基因集胞藻；（4）将步骤（3）制得的转基因集胞藻扩大培养后，经提取，制得咖啡酸。本发明专利技术通过构建转集胞藻PCC6803同源重组载体，转化集胞藻获得了在添加前体物质对香豆酸的条件下能够生产咖啡酸的藻株，为咖啡酸的生产提供了新的途径。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用蓝藻生产咖啡酸的方法，其特征在于，步骤如下：（1）将核苷酸序列如SEQ?ID?NO.13所示的上臂基因插入质粒pBluescript?II?SK+的KpnI?XhoI内切酶酶切位点之间，将核苷酸序列如SEQ?ID?NO.14所示的下臂基因插入质粒pBluescript?II?SK+的SpeI?SacII内切酶酶切位点之间，将核苷酸序列如SEQ?ID?NO.15所示的卡纳抗性片段插入质粒pBluescript?II?SK+的BamHI?PstI内切酶酶切位点之间，将核苷酸序列如SEQ?ID?NO.16所示的PsbA2启动子插入质粒pBluescript?II?SK+的SalI?EcoRI内切酶酶切位点之间，将核苷酸序列如SEQ?ID?NO.17所示的5ST1T2PCR转录终止子插入质粒pBluescript?II?SK+的PstI?SmaI内切酶酶切位点之间，制得重组空白质粒；（2）将核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所述的基因片段插入步骤（1）制得的重组空白质粒的EcoRI?PstI内切酶酶切位点之间，制得重组质粒；（3）将步骤（2）制得的重组质粒转化集胞藻Synechocystis?sp.PCC6803，制得转基因集胞藻；（4）将步骤（3）制得的转基因集胞藻扩大培养后，经提取，制得咖啡酸。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：何庆芳，张燕，薛勇，毕玉平，陈高，葛海涛，杨连群，范仲学，王俊燕，于金慧，董学卫，彭振英，边斐，
申请(专利权)人：山东省农业科学院高新技术研究中心，
类型：发明
国别省市：