磁性固相萃取-毛细管区带电泳测定生物样本中吡咯并喹呤醌含量的方法技术

技术编号:8906029 阅读:254 留言:0更新日期:2013-07-11 03:37
磁性固相萃取-毛细管区带电泳测定生物样本中吡咯并喹呤醌含量的方法,属于生命分析技术领域。本发明专利技术采用SiO2与不同极性的吸附剂混合组成,这些吸附剂对疏水性能不同的化合物具有不同的选择性,从而能够有效的进行分离。本方法采用的毛细管电泳法加入了修饰剂β-环糊精,首次在毛细管电泳缓冲体系中加入三氟乙酸,解决了毛细管电泳图中峰的拖尾问题,峰的对称性明显好于文献报道。本方法快速、简便,首次应用磁固相萃取技术结合毛细管电泳测定牛奶中PQQ的含量。与文献方法对比,分离效率提高了6倍。

【技术实现步骤摘要】

,属于生物分析

技术介绍
卩比咯并喹呤醌(pyrroloquinolinequinine PQQ)是一种新的氧化还原酶辅基,主要分布于原核生物以及部分植物和哺乳动物之中,在牛奶尤其母乳中含量较高,被认为是体内必需的维生素之一。生物样本中PQQ的分析方法有气相色谱-质谱法、高效液相色谱、毛细管电泳法等 毛细管电泳是二十世纪 80 年代发展起来的一种快速分析方法,具有分析速度快、分离效率高、样品和试剂消耗量少的优点。与高效液相色谱法相比,毛细管柱容易清洗、使用寿命长。文献报道的PQQ毛细管电泳检测法是在缓冲体系加入β -丙氨酸,采用反相C18小柱固相萃取分离富集细胞培养基中的PQQ,检出限为0.1 0.2 μ M,PQQ峰型存在拖尾现象,固相萃取所用的C18小柱价格昂贵,而且步骤繁琐,工作量大。近年来,磁纳米固相萃取技术在生物样品制备领域受到广泛关注。由于磁性萃取介质直接分散于样品溶液中,接触面大,对生物样品和液体中含固体悬浮物的样品尤其适合,样品处理简单。本专利技术采用SiO2与不同极性的吸附剂混合组成,这些吸附剂对疏水性能不同的化合物具有不同的选择性,从而能够有效的进本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种磁性固相萃取?毛细管区带电泳测定生物样本中吡咯并喹呤醌含量的方法,其特征在于:(1)毛细管选择及预处理:选用未涂层的41.5cm×50μm石英毛细管柱;新毛细管柱先依次用甲醇冲洗10min,蒸馏水冲洗5min,1mol/L?NaOH溶液冲洗30min,蒸馏水冲洗5min,最后再用运行缓冲液冲洗10?15min;每次进样前,用蒸馏水及运行缓冲液冲洗2min;运行缓冲液及样品溶液均用0.22μm微孔针头过滤器过滤;(2)毛细管电泳分析条件:检测波长为249nm,进样方式为0.5psi压力进样,进样时间10.0秒,分离电压为25kV,毛细管柱温25℃;运行缓冲液为:pH=8.8、10mmol/L...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:周杏琴毛师师张建康曹国宪钦晓峰
申请(专利权)人:江苏省原子医学研究所
类型:发明
国别省市:

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