白色念珠菌核酸层析检测试剂盒及其检测方法和应用技术

本发明专利技术公开了白色念珠菌核酸层析检测试剂盒及其检测方法和应用，属于分子生物学和免疫学领域。本发明专利技术是将分子生物学的聚合酶链式反应技术和免疫层析技术进行结合，实现对白色念珠菌的快速检测。本发明专利技术试剂盒包括PCR扩增及试纸条检测共二部分。其中通过对引物进行特定修饰，并在试纸条制备中选择相应的包被物和标记物，反应过程中形成一个特异的复合物，实现分子生物学技术和免疫层析技术的结合，达到对白色念珠菌特异扩增产物的检测，与传统生化方法相比大大节省了检测时间，简化操作步骤，以达到快速、高效、准确的检测和筛选目的。在临床检测和筛选白色念珠菌的过程中发挥重要作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学和免疫学领域，涉及快速检测白色念珠菌的试剂盒及方法和应用。
技术介绍
白色念珠菌(Candida albicans)是念珠菌属(假丝酵母属)中最为常见的种。也是临床上浅部/深部真菌病中发病率最高的念珠菌病的重要病原菌。由于该菌多侵犯已患有严重疾病机体免疫力低下的病人，以及接受器官移植，实施心脏、胃肠道手术需行插管、尿管、导管的外科病人，对生命威胁极大，为及早发现与诊断念珠菌感染，快速、简便、特异及准确达到临床分离和鉴定念珠菌的方法一直受到国内外的广泛关注。随着免疫受损或低下人群的不断扩大，机会性念珠菌病继续增多，迄今仍是医学真菌领域研究的热点。目前国内外白色念珠菌主要的检测方法有传统的微生物检测方法和分子生物学检测方法。微生物方法检测白色念珠菌主要用到科玛嘉显色培养基进行分离鉴别，要求检测人员有较丰富的经验，进口的培养基检测成本也高。分子生物学检测主要使用PCR及RT-PCR等方法，普通的PCR技术其扩增产物大多通过凝胶电泳判断扩增结果，该方法中的致癌物质不仅对环境和操作人员有很大的危害，而且要求检测人员具备熟练的操作技巧，点样时操作误差会使样品漂移造成结果本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种白色念珠菌核酸层析检测试剂盒，包括PCR反应液和试纸条，所述试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫顺次搭接黏贴在底衬上组成；其特征在于试剂盒还包括PCR反应液，PCR反应液中含有上游引物F和下游引物R，上游引物F为5’TTGGTGGTGGTAGACATAGA3“，下游引物R为5“TCAGAACACTGAATCGAAAG3“；所述上游引物F5’端标记生物素，下游引物R5’端标记地高辛；所述结合垫上包被胶体金颗粒标记的鼠抗地高辛抗体，硝酸纤维素膜上有包被亲和素的检测线和包被羊抗鼠抗体的控制线。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：何艳玲，王丽丽，刘沛，于重楠，
申请(专利权)人：北京陆桥技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：