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微生物及其用途制造技术

技术编号:8903466 阅读:310 留言:0更新日期:2013-07-11 00:17
本发明专利技术提供了微生物及用途,该微生物用于制备脂肪酸酯。该微生物包括第一、第二、第三和第四核酸序列,其中,第一核酸序列编码酰基转移酶AT基因或其功能等同体,第二核酸序列编码2-酮酸脱羧酶ARO10基因或其功能等同体;乙醇脱氢酶ADH2基因或其功能等同体;以及脂酰辅酶A还原酶FAR基因或其功能等同体,第三核酸序列编码内切葡聚糖酶基因EGII或其功能等同体;以及β-葡糖苷酶基因B-GL或其功能等同体,第四核酸序列编码脂酰基辅酶A还原酶FAR基因或其功能等同体。利用该微生物可以有效地提高制备脂肪酸酯的效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
,本专利技术涉及微生物及其用途。更具体的,本专利技术涉及微生物,用于转化为生物的系统,用于生产脂肪酸酯的方法,脂肪酸酯产品以及用于生产脂肪酸酯的系统。
技术介绍
为缓解能源危机的压力,各国正积极地寻代可再生的替代能源。并先后开发出水能、风能、潮汐能、太阳能和生物质能等诸多的可再生能源。但由于受环境、气候、地理因素以及前期开发投入巨大等因素的限制,水能、风能、潮汐能、太阳能等均只能在特定的区域内利用,难以推广普及。生物质能是一类以生物质为原料,通过相应生物技术加工而成的一类清洁、环保、可再生的能源的总称。主要包括生物乙醇、生物柴油、生物制氢以及沼气等形式。开发生物质能不受环境、地理因素等条件是的限制,适于工厂化生产、易于普及等特点。因此对生物能的开发正成为能源研究的热点领域,竞争日趋激烈。然而,目前对于生物质能的研究仍有待深入。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商业选择。为此,本专利技术的目的在于提出一种能够有效用于生产脂肪酸酯的微生物及其用途。在本专利技术的第一方面,本专利技术提出了一种微生物。根据本专利技术的实施例,该微生物包括第一核酸序列,其中,所述第一核酸序列编码下列:酰基转移酶Jr基因或其功能等同体。本专利技术的专利技术人发现,当采用该微生物时,通过表达该微生物的基因组中所包含的外源基因,可以使该微生物过表达酰基转移酶xr,从而可以利用所表达的酶催化脂酰辅酶a和外加醇类化合物两个底物合成脂肪酸酯,例如脂肪酸甲酯或脂肪酸乙酯。根据本专利技术的实施例,该微生物还可以具有下列附加技术特征: 在本专利技术的一个实施例,进一步包括第二核酸序列,其中,所述第二核酸序列编码下列的至少之一:2_酮酸脱羧酶基因或其功能等同体;乙醇脱氢酶或其功能等同体;以及脂酰基辅酶A还原酶/ / 基因。由此,可以有效地将在相应基因表达产物的作用下,将单糖转化为醇类化合物,从而可以实现将单糖例如葡萄糖作为碳源,微生物依靠自身产生的醇类化合物和脂肪酰辅酶A合成脂肪酸酯,例如脂肪酸乙酯、脂肪酸丁酯、脂肪酸异戍酷和腊酷。 在本专利技术的一个实施 例,进一步包括第三核酸序列以及任选的第四核酸序列,其中,所述第三核酸序列编码下列:内切葡聚糖酶基因万67/或其功能等同体;以及β-葡糖苷酶基因或其功能等同体,所述第四核酸序列编码脂酰基辅酶A还原酶/ / 基因或其功能等同体。由此,可以能够有效地利用基因所编码的产物,将多糖转化为醇类化合物,从而可以实现将多糖例如纤维素作为碳源,微生物依靠自身产生的醇类化合物可以合成脂肪酸酯,例如脂肪酸甲酯、脂肪酸乙酯、脂肪酸丁酯、脂肪酸异戊酯和蜡酯。在本专利技术的一个实施例,所述酰基转移酶基因编码SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列。由此,可以进一步提闻酸基转移酶J/1基因表达广物的酶活性,从而进一步提闻利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述酰基转移酶基因具有SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列。由此,可以进一步提闻酸基转移酶J/1基因编码表达广物的效率,从而进一步提闻利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述2-酮酸脱羧酶基因编码SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。由此,可以进一步提高2-酮酸脱羧酶基因表达产物的酶活性,从而进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述2-酮酸脱羧酶基因具有SEQ ID N0:2所示的核苷酸序列。由此,可以进一步提高2-酮酸脱羧酶基因编码表达产物的效率,从而进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述乙醇脱氢酶4/ 编码SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。由此,可以进一步提高乙醇脱氢酶4^/£ 基因编码产物的酶活性,从而进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述乙醇脱氢酶4/ 具有SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列。由此,可以进一步提闻乙醇脱氣酶基因编码表达广物的效率,从而进一步提闻利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述内切葡聚糖酶基因從编码SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列。由此,可以进一步提闻内切匍聚糖酶基因编码广物的酶活性,从而进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述内切葡聚糖酶基因從具有SEQ ID NO:10所示的核昔酸序列。由此,可以进一步提闻内切匍聚糖酶基因EGII表达广物的效率,从而进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述β -葡糖苷酶基因沒-ffi编码SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列。由此,可以进一步提高葡糖苷酶基因编码产物的酶活性,从而进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述β -葡糖苷酶基因B-GL具有SEQ ID NO:12所示的核苷酸序列。由此,可以进一步提高葡糖苷酶基因编码产物的效率,从而进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。 在本专利技术的一个实施例,所述脂酰基辅酶A还原酶/ / 基因编码SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列。由此,可以进一步提高脂酰基辅酶A还原酶/ / 基因编码产物的酶活性,从而进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。 在本专利技术的一个实施例,所述脂酰基辅酶A还原酶/ / 基因具有SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列。由此,可以进一步提高脂酰基辅酶A还原酶/ / 基因编码产物的效率从而进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述微生物为选自真核微生物和原核微生物的至少一种。由此,可以进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述微生物为选自细菌、真菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体、病毒和酵母的至少一种。由此,可以进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个实施例,所述微生物为酵母。由此,可以进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率,降低生产成本。在本专利技术的一个实施例,所述微生物为毕赤酵母。由此,可以进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率。在本专利技术的一个 实施例,所述微生物为大肠杆菌。由此,可以进一步提高利用该微生物制备脂肪酸酯的效率,降低生产成本。在本专利技术的第二方面,本专利技术提出了一种适于转化微生物的系统。根据本专利技术的实施例,该适于转化微生物的系统包括第一核酸序列,其中,所述第一核酸序列编码下列:酰基转移酶Jr基因或其功能等同体。由此,利用该系统可以有效地将外源基因酰基转移酶Jr基因或其功能等同体引入微生物细胞中,从而获得前面所述的微生物,进而可以利用该系统获得的微生物,通过表达该微生物的基因组中所包含的外源基因,可以使该微生物过表达酰基转移酶Jr基因,利用所表达的酶催化脂酰辅酶A和外加醇类化合物两个底物合成脂肪酸酯,例如脂肪酸甲酯或脂肪酸乙酯。根据本专利技术的实施例,该系统还可以具有下列附加技术特征: 在本专利技术的一个实施例,进一步包括第二核酸序列,其中,所述第二核酸序列编码下列的至少之一:2_酮酸脱羧酶基因或其功能等同体;乙醇脱氢酶或其功能等同体;以及脂酰基辅酶A还原酶/ / 基因。由此,可以有效地将在相应基因表达产物的作用下,将单糖转化为醇类化合物,从而可以实现将单糖例如葡本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微生物,其特征在于,包括第一核酸序列,其中,所述第一核酸序列编码选自下列基因的至少一种:酰基转移酶AT基因、或其功能等同体,任选地,所述AT基因的功能等同体为来自Marinobacter?hydrocarbonoclasticus?DSM?8798、Rhodococcus?opacus?PD630?、Mus?musculus?C57BL/6、以及Psychrobacter?arcticus?273?4的至少一种。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘天罡郭道义
申请(专利权)人:武汉大学
类型:发明
国别省市:

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