本发明专利技术涉及太子参总苷的制备方法及其在制备预防和治疗心肌缺氧、缺血药物中的用途。所说的总苷可以是太子参粗总苷或太子参精制总苷，主要含有皂苷和黄酮苷。将太子参药材粉碎过筛后，采用水提醇沉和大孔吸附树脂层析的方法制备太子参粗总苷，采用MCI和Sephadex?LH-20柱层析的方法除去太子参粗总苷中的环肽类成分后制备太子参精制总苷。安全性和药效学实验表明，所得的总苷安全性高，在预防和治疗心肌缺氧中效果突出，可望用于制备预防和治疗心肌缺氧、缺血药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于太子参总苷的制备方法及其用途，具体地说，太子参总苷的制备及其在制备预防和治疗心肌缺氧、缺血药物中的用途。
技术介绍
缺血性心脏病(IHD)常常表现为急性心肌梗死，是全球范围内导致死亡和心脏衰竭的主要原因。心脏缺氧是产生缺血性心脏病的直接原因之一。使用抗心绞痛药物进行抗心肌缺血治疗以增加心肌供氧或者降低心肌耗氧量已被证明是一个非常重要的治疗心肌缺血的手段(Al_Nimer,M.S.M., 2012.Evaluation ofAnt1-1schemic Therapy in CoronaryArtery Disease:A Review.1n:Chaikovsky, 1.(Ed.), CoronaryArtery Diseases.1nTechChina, Shanghai, China, pp.151-196)。太子参(Pseudostellariaheterophylla)为石竹科孩儿参属植物孩儿参的干燥块根，具有益气生津、补益脾肺、增强体质、提高机体免疫力、心脑血管活性等功效，是常用的补虚补气药，其主要化学成分包括糖类、氨基酸、苷类、环肽类、磷脂类等，已有文献报道“太子参皂苷”具有抗应激、抗疲劳的作用、SOD样作用并能延长寿命。文献用水(①太子参皂苷提取工艺研究.食品工业科技，2005，26 (7) =135-137.,②太子参皂苷提取工艺优选.中草药，2001，32 (9) =799-800.)或乙醇(大孔吸附树脂提取太子参总皂苷工艺研究.中国实验方剂学杂志，2007，13(10):15-17)对太子参总皂苷的制备方法进行了研究，CN1957967公开了太子参的粗提取物在制备治疗心血管疾病药物中的应用，CN102512438A公开了太子参多糖提取物在预防、治疗糖尿病和保健食品中的应用。然而，在前期药理研究中，我们发现太子参总苷具有较强的抗心肌缺氧作用，而我们的化学成分研究表明，太子参总苷中除了皂苷类成分外还有黄酮苷以及其他苷类，而已有的文献只是针对太子参粗提取物或皂苷组分进行了研究或应用，缺乏对太子参总苷的制备方法和应用。因此，进行总苷的制备和应用尤其重要。本专利技术正是依据太子参总苷各类成分与其它非苷类成分的结构特点及 理化性质上的差异，利用合理的提取、分离和检测手段，最终提供一种有效提取、分离富集太子参总苷的方法，并将该类组分运用于抗心肌缺氧、缺血药物的制备。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从太子参中制备含皂苷和黄酮苷等各类苷的太子参总苷提取物。所述的太子参总苷可以是太子参粗总苷或太子参精制总苷。本专利技术的另一个目的是提供该提取物太子参总苷的制备方法。本专利技术的再一个目的是提供该提取物的精制方法。本专利技术还有一个目的是提供该提取物在制备预防和治疗心肌缺氧、缺血相关药物中的用途。本专利技术的目的可通过下列措施来实现:本专利技术所述的太子参总苷可以是太子参粗总苷或太子参精制总苷，采用水提醇沉和大孔树脂层析的方法制备太子参粗总苷，再利用MC1、SephadexLH-20柱层析的方法制备太子参精制总苷。具体步骤如下:(I)将太子参粉碎过筛后用热水提取1-3次，提取液合并减压浓缩后，加高浓度乙醇至含乙醇量60 %以上以沉淀多糖，滤液回收乙醇,浓缩至无醇味。(2)将浓缩液上非极性或弱极性大孔吸附树脂柱层析DlOl大孔树脂柱，用水洗脱至流出液无还原糖后，柱上残留部分用55-70%乙醇洗脱至苯酚-硫酸法检测显示无苷为止。收集所有经苯酚-硫酸法检测显示含苷的部分，合并后回收乙醇，干燥得太子参粗总苷。(3)所得太子参粗总苷用25-35%乙醇溶解后上MCI柱，用25_35%乙醇洗脱5_12倍柱体积后，再用80-90%乙醇洗脱至苯酚-硫酸法检测显示无苷为止。分别收集25-35%乙醇与80-90%乙醇两部分洗脱液，回收溶剂并浓缩至浸膏，得浸膏I和浸膏II。浸膏II用无水乙醇溶解后上S^hadex LH-20柱，用无水乙醇洗脱，以苯酚-硫酸法检测，将所有经检测显示含苷的部分收集合并，回收乙醇，浓缩所得的浸膏与浸膏I合并，干燥得太子参精制总苷。所述的太子参总苷在制备预防和治疗心肌缺氧、缺血相关药物中的用途。本专利技术的太子参总苷提·取物中含有皂苷、黄酮苷和其它苷类物质。太子参粗总苷还含有环肽类成分，太子参精制总苷则已基本去除了环肽。本专利技术的有益效果:本专利技术的太子参总苷提取物制备工艺可行性高，在安全浓度范围内治疗心肌缺氧缺血方面疗效好、用量低。附图说明图1为不同作用浓度的太子参粗总苷对H9c2细胞的毒性(以细胞存活率表示)。(与空白组相比 < 0.001，**P < 0.01)。图2为不同作用浓度的太子参精制总苷对H9c2细胞的毒性(以细胞存活率表示)。(与空白组相比 < 0.001，**P < 0.01)。图3为不同作用浓度的太子参粗总苷对二氯化钴诱导的H9c2细胞缺氧的保护作用(以细胞存活率表示)。(与空白对照组相比-P < 0.001，与CoCl2组相比< 0.001，*P < 0.05)。图4为不同作用浓度的太子参精制总苷对二氯化钴诱导的H9c2细胞缺氧的保护作用(以细胞存活率表示)。(与空白对照组相比.ρ < 0.001，与CoCl2组相比<0.001,*Ρ < 0.05)。图5为太子参精制总苷对二氯化钴(CoCl2)所致H9c2细胞缺氧状态下超氧化物歧化酶(SOD)的影响(以空白组的百分率表示)。(与空白对照组相比.Ρ < 0.001，flP< 0.05 ;与 CoCl2 组相比 ***P < 0.001，**P < 0.01，*P < 0.05)。图6为太子参精制总苷对二氯化钴(CoCl2)所致H9c2细胞缺氧状态下脂质过氧化物(MDA)的影响(以空白组的百分率表示)。(与空白对照组相比.Ρ <0.001，flP < 0.05 ；与 CoCl2 组相比 ***Ρ < 0.001, **Ρ < 0.01, *Ρ < 0.05)。图7为太子参精制总苷对二氯化钴(CoCl2)所致H9c2细胞缺氧状态下乳酸脱氢酶(LDH)的影响(以空白组的百分率表示)。(与空白对照组相比.Ρ < 0.001，flP < 0.05 ；与 CoCl2 组相比 ***P < 0.001, **P < 0.01, *P < 0.05)。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术做进一步说明。实施例一、太子参总苷的制备方法1、太子参粗总苷的制备方法(1)将Ikg太子参粉碎后用热水提取3次，提取液合并减压浓缩后，加95%乙醇至含乙醇量60%以沉淀多糖，以沉淀多糖，滤液回收乙醇，浓缩至无醇味。(2)浓缩液上DlOl大孔树脂柱，用2.5倍柱体积水洗脱至流出液无还原糖后，用10倍柱体积60%乙醇洗脱至苯酚-硫酸法检测显示无苷为止。收集所有经苯酚-硫酸法检测显示含苷的部分，合并后回收乙醇，干燥得太子参粗总苷。2、太子参精制总苷的制备方法 (1)所得粗总苷用30%乙醇溶解后上MCI柱，用10倍柱体积的30%乙醇洗脱后，再用2.5倍柱体积的85%乙醇洗脱至苯酚-硫酸法检测显示无苷为止。分别收集30%乙醇与8本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种太子参总苷，其特征在于，所说的总苷是由石竹科孩儿参属植物孩儿参的干燥块根(即太子参)提取分离制备的太子参粗总苷或太子参精制总苷，主要含有皂苷和黄酮苷。
【技术特征摘要】
1.一种太子参总苷，其特征在于，所说的总苷是由石竹科孩儿参属植物孩儿参的干燥块根(即太子参)提取分离制备的太子参粗总苷或太子参精制总苷，主要含有皂苷和黄酮苷。2.根据权利要求1所说太子参总苷的制备方法，其特征在于所说的方法是将太子参药材粉碎过筛后，采用水提醇沉和大孔吸附树脂层析的方法制备太子参粗总苷，采用MCI和Sephadex LH-20柱层析的方法除去太子参粗总苷中的环肽类成分后制备太子参精制总苷。3.根据权利要求2所说太子参总苷的制备方法，其特征在于在水提醇沉中醇沉时的溶液为60-95%的乙醇溶液。4.根据权利要求2所说太子参总苷的制备方法，其特征在于所用的大孔吸附树脂为非极性或弱极性大孔吸附树脂，型号是HPD-100，HPD-400, AB-8, D-101，D-301，NKA-9。5.根据权利要求2所说太子参总苷的制备方法，其特征在于在大孔吸附树脂层析中，先用用水洗脱至流出...
【专利技术属性】
技术研发人员：廖尚高，王永林，王珍，兰燕宇，王爱民，李勇军，李靖，肖婷婷，
申请(专利权)人：贵阳医学院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。