本发明专利技术公开了一种从忍冬叶中提取酚酸类化合物的方法。其步骤为：取忍冬叶原料适量，加水浸泡后煮提2-3次，合并滤液并浓缩，盐酸调pH值1-4，离心，取上清液过14-90目聚酰胺，分别用水和30%-95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，干燥，得到含量在50%以上的酚酸类提取物。本发明专利技术的方法，具有良好的可重复性，提取物中酚酸类化合物含量稳定，并且操作简便、成本低廉、适合工业化生产。本发明专利技术所得到的产品可按常规方法制成临床常用的胶囊剂、片剂、冲剂、丸剂、颗粒剂、注射剂、滴丸剂、口服液体制剂、皮下给药制剂或栓剂等剂型或它们的缓释形式。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种提取酚酸类化合物的方法，更具体地说是一种采用聚酰胺吸附技术，提高忍冬叶提取物中酚酸类化合物含量的方法，属于医药
技术介绍
忍冬叶为常用中药 金银花同一植物忍冬(Zoflicera japonica Thunb.)的传统废弃部分。金银花为38种常用中药之一，具有较强的抗菌、抗病毒作用，广泛应用于传统和现代中成药名方和大量临床处方中。在忍冬种植过程中，为保证花蕾的生长，需多次修剪整形而废弃大量的忍冬叶(为同一植物金银花产量的10倍)，资源浪费巨大。忍冬叶与金银花的主要有效成份均为酚酸类化合物，相同单位重量忍冬叶有机酸含量为金银花的70%，具有相当高的应用开发研究价值，但至目前国内外尚未发现以忍冬叶为药材制成中成药制剂的先例。研究证实，忍冬叶提取成分的抗病毒和抗菌药效优于金银花提取物。研究结果也表明，忍冬叶纯化产物对金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、乙型溶血性链球菌、大肠埃希菌和肺炎链球菌的抗菌活性高于金银花纯化产物，MBC值相差1-2个倍比稀释度，其可能原因是忍冬叶与金银花酚酸类化学成分的含量组成存在的差异。根据资料，金银花主要含绿原酸(Chlorogenicacid),忍冬叶的主要有效成分为异绿原酸(二咖啡酰基奎宁酸，Dicaffeoylquinic acids),其中 4，5_ 二咖啡酸基奎宁酸(4，5 — Dicaffeoyl quinicacid)含量较高。近年来，国内多家单位曾对忍冬叶成分进行了提取方法的研究，包括水提法、醇提法、微波辅助提取法、酶法和大孔树脂吸附法等(中国林副特产，2002，1:38-39 ;四川食品与发酵，2006，130:52-57 ;陕西中医，2008，6:734-735 ;江西农业大学学报，2008，1:137);根据资料和重复验证试验，以上资料提供方法提取忍冬叶有效成分(主要是酚酸类成分)纯度较低，多在20-30%以下。公开号为101269107A的中国专利申请和《中成药》2007年第7期(附6-7)公开了采用DlOl大孔树脂提取忍冬叶绿原酸成分的研究结果；根据报告，采用本方法制备的忍冬叶提取物中绿原酸含量可达50%以上；但该方法存在实验条件较难控制、重复性较差的缺欠。公开号为CN1398845A的中国专利公开了大孔树脂吸附提高绿原酸含量的工艺方法；该工艺方法针对从金银花中提取绿原酸的工艺落后情况，对金银花中绿原酸成分的提取工艺方法进行了优化，提取金银花成分中绿原酸含量达到了 80%以上；但是，由于金银花(主要含绿原酸)和忍冬叶中(主要有效成分为异绿原酸)酚酸类化合物的组成和含量存在明显差异，采用公开号为CN1398845A的中国专利提供的方法在忍冬叶酚酸类成分的提取中达不到类似效果；并且，该专利工艺方法中采用甲醇为大孔吸附树脂中异绿原酸的洗脱液，由于其可能导致的提取物中的甲醇残留及其环境污染，该工艺不适合在工业化生产中使用
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，以提高忍冬叶提取物中酚酸类化合物含量，克服了现有技术的缺点。本专利技术的方法包括以下步骤: (1)忍冬叶切段或粉碎后加水浸泡0.5-1.5h，煮提2-3次，每次加入忍冬叶原料质量的10-20倍的水，在80-100°C条件下提取50-100min，合并提取液，50-70°C减压或常压浓缩至4-6倍药材质量，离心分离，得上清液备用； (2)在所得上清液中加入盐酸调整PH值为1-4，离心分离，上清液用聚酰胺吸附后，用纯化水洗至中性，再用质量浓度为30%-95%的乙醇解吸附，收集解析液，回收乙醇并浓缩，最后减压或常压干燥，即得所需产品。本专利技术中，步骤(1)所述的提取方法还可以采用水温浸法或乙醇回流法或乙醇温浸法或超声提取法等方法提取忍冬叶中酚酸类化合物。其中，水温浸提取方法为:忍冬叶切段或粉碎后加水加入忍冬叶原料质量的10-20倍的水，在40-80°C条件下浸泡2-3次，每次0.5-1.5h，合并上述几次提取液，50-70°C减压或常压浓缩至4-6倍药材质量，离心分离，得上清液备用。其中，乙醇回流提取方法为:忍冬叶切段或粉碎后加入忍冬叶原料质量的10-20倍的60%-80%乙醇回流提取2-3次，每次0.5-1.5h，合并上述几次提取液，50_70°C减压或常压浓缩至4-6倍药材质量，离心分离，得上清液备用。其中，乙醇温浸提取方法为:忍冬叶切段或粉碎后加入忍冬叶原料质量的10-20倍的70%-95%乙醇，于50-70°C浸泡2_3次，每次0.5-1.5h，合并上述几次提取液，50-70°C减压或常压浓缩至4-6倍药材质量，离心分离，得清液备用。其中，超声提取方法为:忍冬叶切段或粉碎后加入忍冬叶原料质量的10-20倍的水超声提取3次，每次0.5-1.5h，合并上述几次提取液，50-70°C减压或常压浓缩至4-6倍药材质量，离心分离，得上清液备用。本专利技术的方法，步骤(2)中，吸附忍冬叶提取物中酚酸类化合物所用聚酰胺的粒度为14-90目，用量与药材质量比值为0.5-1:1。本专利技术的方法，步骤(2)中，吸附忍冬叶提取物的聚酰胺吸附后以1.0-3.0BV(BV-柱床体积，全文同)的水冲洗，然后加5.0BV (柱床体积)的质量浓度为30%-95%的乙醇洗脱。本专利技术所得到的忍冬叶提取物中酚酸类化合物的含量在50%以上。本专利技术所得到的产品可按常规方法制成临床常用的胶囊剂、片剂、冲剂、丸齐U、颗粒剂、注射剂、滴丸剂、口服液体制剂、皮下给药制剂或栓剂等剂型或它们的缓释形式。本专利技术取得的有益效果在于: 1、本专利技术方法提取的忍冬叶提取物中物中酚酸类化合物含量较高，在50%以上。2、本专利技术工艺方法简便、条件可控，具有良好的可重复性。3、本专利技术适合忍冬叶中酚酸类化合物的提取，工艺方法无环境污染和提取物甲醇残留缺点，有利于环境保护和用药安全。4、按本专利技术的方法从忍冬叶中提取的酚酸类化合物的主要药效学试验结论为 忍冬叶提取的酚酸类化合物对金黄色葡萄球菌、福氏志贺菌、乙型溶血性链球菌、大肠埃希菌和肺炎链球菌的抗菌活性优于相同方法提取以及酚酸类化合物含量相同或相近的金银花提取物，最小杀菌浓度(MBC值)相差1-2个倍比稀释度。详见实施例5。具体实施例方式以下实施例仅代表本专利技术的说明性实施方案，但本专利技术不受这些实施例的限制。实施例1 忍冬叶干燥药材切段或粉碎后加水浸泡0.5h，煮提2次，每次加入忍冬叶原料质量的15倍的水，在100°C条件下提取75min，合并上述2次提取液，60°C减压或常压浓缩至4倍药材量，离心分离，得上清液，加入盐酸调整PH值为I，离心分离，上清液上聚酰胺柱，以2.0BV/h吸附，用IBV纯化水以3.0BV/h流速洗至中性，再用浓度为30%的乙醇以2.0BV/h流速解吸附，收集解析液，回收乙醇并浓缩，最后减压或常压干燥至干，即得。产品经检验，总酚酸含量为51.92%，收率1.61%。总酚酸含量的检测方法:采用HPLC方法，Discovery C18分析色谱柱，水-甲酸(100: 0.5)和乙腈为流动相，流量1.0 ml/min，采用梯度程序，328 nm波长检测峰面积。25min之前的峰以绿原酸为对照，25min之后的峰以4，5-0- 二咖啡酰基奎宁酸为对照，计算酚酸类化合物的含量。收率(％)=出膏率X本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从忍冬叶中提取酚酸类化合物的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）忍冬叶切段或粉碎后加水浸泡0.5?1.5h，煮提2?3次，每次加入忍冬叶原料质量的10?20倍的水，在80?100℃条件下提取50?100min，合并提取液，50?70℃减压或常压浓缩至4?6倍药材质量，离心分离，得上清液备用；（2）在所得上清液中加入盐酸调整PH值为1?4，离心分离，上清液用聚酰胺吸附后，用纯化水洗至中性，再用质量浓度为30%?95%的乙醇解吸附，收集解析液，回收乙醇并浓缩，最后减压或常压干燥，即得所需产品。
【技术特征摘要】
1.一种从忍冬叶中提取酚酸类化合物的方法，其特征在于包括以下步骤: (1)忍冬叶切段或粉碎后加水浸泡0.5-1.5h，煮提2-3次，每次加入忍冬叶原料质量的10-20倍的水，在80-100°C条件下提取50-100min，合并提取液，50-70°C减压或常压浓缩至4-6倍药材质量，离心分离，得上清液备用； (2)在所得上清液中加入盐酸调整PH值为1-4，离心分离，上清液用聚酰胺吸附后，用纯化水洗至中性，再用质量浓度为30%-95%的乙醇解吸附，收集解析液，回收乙醇并浓缩，最后减压或常压干燥，即得所需产品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:步骤(I)提取时采用水温浸法或乙醇回流法或乙醇温浸法或超声提取法； 其中，水温浸提取方法为:忍冬叶切段或粉碎后加水加入忍冬叶原料质量的10-20倍的水，在40-80°C条件下浸泡2-3次，每次0.5-1.5h，合并上述几次提取液，50_7(TC减压或常压浓缩至4-6倍药材质量，离心分离，得上清液备用； 乙醇回流提取方法为:忍冬叶切段或粉碎后加入忍冬叶原料质...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵铁华，陈四平，李哲，
申请(专利权)人：河北师范大学，
类型：发明
国别省市：
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