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一种快速诱导及繁殖棉花胚性愈伤的方法技术

技术编号:8741083 阅读:222 留言:0更新日期:2013-05-29 18:14
本发明专利技术公开了一种快速诱导及繁殖棉花胚性愈伤的方法,其包括如下步骤:1)将培养5-8d的棉花无菌苗的下胚轴切割成长度为0.4-0.8cm的片段,然后置于培养基A或B中于25-28℃培养25-30d,获得愈伤组织;2)将培养基A中获得的愈伤组织依次置于培养基B和C中分别于25-28℃继续培养25-30d;将培养基B中获得的愈伤组织置于培养基C中于25-28℃继续培养25-50d,获得胚性愈伤。该方法能够快速获得棉花的愈伤组织和胚性愈伤组织;快速繁殖胚性愈伤,并能保持棉花胚性愈伤的良好状态,可为棉花转基因提供优良、高效的实验材料。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物组织诱导和培养
,具体涉及。
技术介绍
棉花是是重要的经济作物之一,长期以来,常规育种技术在作物新品种选育工作中发挥了重大作用。但是常规育种是通过对育种材料表型性状的选择来实现对目标基因型的选择,人们无法直接考察个体的基因型,只能从表现型推测基因型。而且常规育种具有很大的盲目性和不可预测性,随着生物技术的发展,常规育种的效率低等问题也更加明显。随着转基因技术的发展,棉花的新资源创制和新品质选育也获得显著的成就,t匕如:抗旱,抗盐,抗虫棉花。目前,常用的棉花遗传方法有农杆菌介导法,基因枪法等。由于基因枪等其它转基因方法都有一定的局限性,且不能在短时间获得大量的转基因棉花。而通过农杆菌介导法可以获得大批量的转基因植株。通过农杆菌侵染胚性愈伤可以快速获得转基因植株,然而由于棉花的外植体分化能力比较难,一直是农杆菌侵染介导法的瓶颈。在棉花组织培养中,棉花的再生体系主要经历以下几个过程:外植体诱导成愈伤组织,愈伤组织分化为胚性愈伤组织,胚性愈伤组织分化成体细胞胚,最后分化成棉花幼苗。由于棉花从愈伤组织到胚性愈伤组织是棉花再生体系的主要环节,也是棉花再生体系的最艰难的一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速诱导及繁殖棉花胚性愈伤的方法,其特征在于,包括如下步骤:1)将培养5-8d的棉花无菌苗的下胚轴切割成长度为0.4-0.8cm的片段,然后置于培养基A或培养基B中于25-28℃培养25-30d,每天光照12-16h,光强1500-1800?Lux,获得愈伤组织;2)将步骤1)中从培养基A中获得的愈伤组织依次置于培养基B和C中于25-28℃分别继续培养25-30d,每天光照12-16h,光强1500-1800?Lux,获得胚性愈伤;将步骤1)中从培养基B中获得的愈伤组织直接置于培养基C中于25-28℃继续培养25-50d,每天光照12-16h,光强1500-1800?Lux,获得胚性愈伤。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:宋纯鹏王道杰郑军王宏亮
申请(专利权)人:河南大学
类型:发明
国别省市:

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