【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于将转基因插入安全港座位的内切核酸酶的用途
本专利技术涉及能切割位干“安全港座位”，即允许转基因的安全的表达的座位的靶序列的内切核酸酶。本专利技术还涉及该内切核酸酶用于将转基因插入细胞，组织或生物的用途。背景技木大范围核酸酶大范围核酸酶，也称之为寻靶内切核酸酶，是在活细胞内诱导双-链断裂和重组中使用的第 I 内切核酸酶(Rouet et al.PNAS 1994 91:6064-6068; Rouet et al.Mol CellBiol.199414:8096-8106;Choulika et al.Mol Cell Biol.199515:1968-1973;Puchta etal.PNAS 1996 93:5055-5060)。但是，它们的使用长期被它们的窄特异性限制。尽管已在过去数年鉴定几百种天然的大范围核酸酶，此多祥性仍大大地不足以解释基因组复杂性，其在目标基因之内发 现大范围核酸酶切割位点的概率仍极其低。这些发现凸显了对以与天然的内切核酸酶相同的选择性切割选择的序列的具有剪裁的特异性的人工内切核酸酶的需求。大范围核酸酶作为衍生切割期望的靶序列的基...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.02.26 EP 10305202.3;2010.02.26 US 61/308,5091.切割用于将转基因插入个体的基因组的靶序列的变体内切核酸酶，其中 (i )所述基因组含有包含所述靶序列的座位；以及 (ii)所述靶序列位于离反转录病毒插入位点(RIS)至多200kb的距离处，其中所述RIS既不与癌关联也不与异常细胞増殖关联。2.利要求1的内切核酸酶，其中所述转基因的插入基本上不修饰位于靶序列附近的基因的表达。3.利要求1或2的内切核酸酶，其中所述靶序列位于离最近基因至少IOOkb的距离处。4.利要求1 3之任一项的内切核酸酶，其中所述内切核酸酶是寻靶内切核酸酶。5.利要求1 4之任一项的内切核酸酶，其中所述内切核酸酶能切割位于选自下列的座位之内的靶序列:人染色体21q21.1上的SH6座位，人染色体6p25.1上的SH3座位，人染色体7q31.2上的SH4座位，人染色体13q34上的SHl2座位，人染色体3pl2.2上的SHl3座位，人第22染色体上的SH19座位，人染色体12q21.2上的SH20座位，人染色体3p24.1上的SH21座位，人染色体6pl2.2上的SH33座位，人染色体2pl6.1上的SH7座位，人第5染色体上的SH8座位，SH18座位，SH31座位，SH38座位，SH39座位，SH41座位，SH42座位，SH43座位，SH44座位，SH45座位，SH46座位，SH47座位，SH48座位，SH49座位，SH50座位，SH51座位，SH52座位，SH70座位，SH71座位，SH72座位，SH73座位，SH74座位，SH75座位，SHlOl座位，SH106座位，SH107座位，SH102座位，SH105座位，SH103座位，SH104座位，SHl 13座位，SH109座位，SHl12座位，SH108座位，SHllO座位，SHl 14座位，SHl 16座位，SHlll座位，SHl 15 座位，SHl21 座位，SHl20 座位，SHl22 座位，SHl 17 座位，SHl 18 座位，SHl 19 座位，SHl23座位，SHl26座位，SHl28座位，SHl29座位，SHl24座位，SHl31座位，SHl25座位，SHl27座位，SHl30座位，SHll座位，SHl7座位，SH23座位，SH34座位，SH40座位，SH53座位，SH54座位，SH55座位，SH56座位，SH57座位，SH58座位，SH59座位，SH60座位，SH61座位，SH62座位，SH65座位，SH67座位，SH68座位和SH69座位。6.体ニ聚1-CreI蛋白，其包含各包含与SEQID NO:1或SEQ ID NO:42具有至少80%同一性的序列的2个单体，其中: (i)所述ニ聚1-CreI蛋白能切割位于个体的座位之内的靶序列，所述靶序列位于离反转录病毒插入位点(RIS)至多200kb的距离处，及所述RIS既不与癌关联也不与异常细胞增殖关联；以及 (ii)所述靶序列不包含SEQID N0:4的序列。7.利要求6的ニ聚1-CreI蛋白，其中所述ニ聚1-CreI蛋白能切割位于选自下列的座位之内的靶序列:人染色体21q21.1上的SH6座位，人染色体6p25.1上的SH3座位，人染色体7q31.2上的SH4座位，人染色体13q34上的SHl2座位，人染色体3pl2.2上的SHl3座位，人第22染色体上的SH19座位，人染色体12q21.2上的SH20座位，人染色体3p24.1上的SH21座位，人染色体6pl2.2上的SH33座位，人染色体...
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