含有一个或几个点突变的青霉素G酰化酶制造技术

本发明专利技术涉及新的青霉素G酰化酶突变体，编码所述突变体的核酸，相关表达载体和宿主细胞以及所述突变体合成阿莫西林的用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物生产领域，具体涉及β-内酰胺类抗生素生产及其生产用酶，更具体涉及青霉素G酰化酶及其在β-内酰胺类抗生素生产中的应用。
技术介绍
β -内酰胺类抗生素是临床应用中最重要的一大类抗生素(包括青霉素和头孢菌素等)，其分子中所含的青霉烷或头孢烯能够破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。天然存在的β_内酰胺类抗生素具有抗菌谱窄、不耐酸、容易产生抗药性和容易引起过敏反应等缺点，这些缺点促使了半合成青霉素和半合成头孢菌素的研发。青霉素G 酰化酶(penicillin G acylase, PGA, EC 3.5.1.11))可以水解青霉素G(penicillinG，PenG)获得β -内酰胺抗生素工业中的重要中间体6-氨基青霉烷酸(6-amino-penicillanic acid, 6-ΑΡΑ),同时又可以6-ΑΡΑ为原料合成其他多种合成或半合成β -内酰胺类抗生素。因此，PGA是β -内酰胺类抗生素工业中一种具有重要意义的生物催化剂。由于PGA的开发具有诱人前景，许多科研院所及制药企业投入大量的研究，并有大量研究文献与专利相继报道。目前已经从许多细菌中克隆并表达出本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种青霉素G酰化酶突变体，其特征在于，所述突变体在SEQ?ID?NO.1的埃希氏大肠杆菌（Escherichia?coli）ATCC11105野生型青霉素G酰化酶氨基酸序列基础上包含选自αN110Q、αD154E、αN176Q、αQ204N、βE85D、βK95R、βQ233N、βD334E中的任意一至八个氨基酸突变。

【技术特征摘要】
1.一种青霉素G酰化酶突变体，其特征在于，所述突变体在SEQ ID N0.1的埃希氏大肠杆菌(Mscherichia coli )ATCC11105野生型青霉素G酰化酶氨基酸序列基础上包含选自aNllOQ、aD154E、a N176Q、a Q204N、β E85D、β K95R、β Q233N、β D334E 中的任意一至八个氨基酸突变。2.根据权利要求1的青霉素G酰化酶突变体，其特征在于,所述突变体包含aQ204N氨基酸突变，以及选自 aNllOQ、aD154E、a N176Q、β E85D、β K95R、β Q233N、β D334E 中的任意一至七个氨基酸突变。3.根据权利要求1的青霉素G酰化酶突变体，其特征在于,所述突变体包含aQ204N、β E85D 氨基酸突变，以及选自 a NI 10Q、a D154E、a N176Q、β K95R、β Q233N、β D334E 中的任意一至六个氨基酸突变。4.根据权利要求1的青霉素G酰化酶突变体，其特征在于,所述突变体包含aQ204N、β K95R 氨基酸突变，以及选自 a NI 10Q、a D154E、a N176Q、β E85D、β Q233N、β D334E 中的任意一至六个氨基酸突变。5.根据权利要求1的青霉素G酰化酶突变体，其特征在于，所述突变体包含aNllOQ、a Q204N、β E85D 氨基酸突变，以及选自 a D154E、a N176Q、β K95R、β Q233N、β D334E 中的任意一至五个氨基酸突变。6.根据权利要求1的青霉素G酰化酶突变体，其特征在于,所述突变体包含aD154E、a Q204N、β E85D 氨基酸突变，以及选自 a NI 10Q、a N176Q、β K95R、β Q233N、β D334E 中的任意一至五个氨基酸突变。7.根据权利要求1的青霉素G酰化酶突变体，其特征在于,所述突变体包含aQ204N、3E85D、PQ233N 氨基酸突 变，以及选自 aNllOQ、a D154E、a N176Q、β K95R、β D334E 中的任意一至五个氨基酸突变。8.根据权利要求1的青霉素G酰化酶突变体，其特征在于,所述突变体包含aQ204N、β E85D、β D334E 氨基酸突变，以及选自 a NI 10Q、a D154E、a N176Q、β K95R、β Q233N 中的任意一至五个氨基酸突变。9.根据权利要求1的青霉素G酰化酶突变体，其特征在于，所述突变体包含aNllOQ、a Q204N、β K95R 氨基酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：余允东，王晓霞，祝俊，杨晓鹏，吴清云，吴会广，马春艳，
申请(专利权)人：石药集团中奇制药技术石家庄有限公司，
类型：发明
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