一种吸附柱层析纯化乌司他丁的方法技术

本发明专利技术公开了一种吸附柱层析纯化乌司他丁的方法。具体的说，就是以健康成年男性新鲜尿液为原料，经过甲壳质吸附、氨水洗脱、硫酸铵盐析以及吸附柱层析等现代蛋白质高端生化分离技术来制备高纯度的乌司他丁，可以将总收率提高到60％以上，总效价不低于4000iu/mg。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体地说涉及一种应用吸附柱层析法来制备收率高、效价稳定的乌司他丁的方法。
技术介绍
乌司他丁(Ulinastatin)系从健康成年男性新鲜尿液中分离纯化出来的一种酸性糖蛋白，是一种广谱的蛋白酶抑制剂，主要在肝脏中合成，由肾脏代谢随尿液排出，且其分解形成的低分子量成分也具有很强的抑制水解酶的作用。乌司他丁由143个氨基酸组成，相对分子质量约37000 43000，属于蛋白酶抑制剂，对胰蛋白酶、α-糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶及粒细胞弹性蛋白酶、透明质酸酶、巯基酶、纤溶酶等多种酶有抑制作用，还具有稳定溶酶体膜、抑制溶酶体酶的释放、抑制心肌抑制因子(MDF)产生、清除氧自由基及抑制炎症介质释放的作用。乌司他丁还可改善手术刺激引起的免疫功能下降、蛋白代谢异常和肾功能降低，防止手术刺激引起的对内脏器官与细胞的损伤以及改善休克时的循环状态坐寸ο1909年欧洲首先报道人体尿液存在着胰蛋白酶抑制剂，随后人们发现，当人体受到感染、发热、肿瘤、妊娠、休克、手术、给予糖皮质激素等刺激时，人体尿液中UTI活性升高。1985年由日本首先开发上市，在日本已作为急性胰腺炎、急性循环衰竭的治本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纯化乌司他丁的方法，该方法包括：将乌司他丁粗品通过吸附柱层析、超滤液沉淀、沉淀物冻干步骤进行纯化，所得纯化后的乌司他丁的总收率提高到60％以上，总效价不低于4000iu/mg。

【技术特征摘要】
1.一种纯化乌司他丁的方法，该方法包括:将乌司他丁粗品通过吸附柱层析、超滤液沉淀、沉淀物冻干步骤进行纯化，所得纯化后的乌司他丁的总收率提高到60%以上，总效价不低于 4000iu/mg。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于:所述乌司他丁粗品是通过以男性尿液为原料，将原料依次经过甲壳质吸附、氨水洗脱、硫酸铵盐析制备得到的。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于:所述吸附柱层析包括如下步骤:(1)用洗脱液A溶解乌司他丁粗品，搅拌、离心，留取离心液，所述洗脱液A为.0.01-0.3mol/L的醋酸盐缓冲液；(2)用洗脱液B平衡吸附柱，将上述离心液上柱，洗脱液B为，0.01-0.5mol/L醋酸钠和.0.l-5mol/L NaCl 的缓冲液；(3)用洗脱液B洗脱吸附柱，收集洗脱液；(4)将洗脱液经超滤膜，...

【专利技术属性】
技术研发人员：林晓磊，孙建，刘翠珍，孙延年，
申请(专利权)人：青岛九龙生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：