一种稀碱浓盐法提取猪鼻骨中的硫酸软骨素的方法技术

一种能够从猪鼻骨中提取硫酸软骨素的方法，它采用稀碱浓盐法，经过盐解、吸附、沉淀、纯化、脱水五个步骤从猪鼻骨中提取硫酸软骨素。结果稀碱浓盐法与传统提取方法相比较，乙醇用量减少86%左右，纯度提高19％左右，产率提高32%左右。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体的属于从猪鼻骨中提取硫酸软骨素的方法。
技术介绍
硫酸软骨素 (Chondroitin sulfate)是一种酸性粘多糖，广泛存在于哺乳动物的 软骨、喉骨、鼻骨和气管中。硫酸软骨素是由葡萄糖醛酸和氨基己糖交替连结而成的双糖聚 合物，它含有50~70个双糖基本结构，分子量为10000~50000。按其化学组成和结构，可分 为05六、(：、04^、!1等多种同分异构体，药用硫酸软骨素是从动物软骨中提取的，主要是八、〇 及各种硫酸软骨素的混合物。CSA和CSC均由D2氨基葡萄糖醛和N2乙酰2D2氨基半乳糖组 成，只是硫酸基团位置不同。 硫酸软骨素通常与蛋白质结合成糖蛋白的形式存在，当其水解时发生消去反应， 连接硫酸软骨素与蛋白质中丝氨酸羟基的苷键断裂，可以得到游离态的硫酸软骨素。硫酸 软骨素为白色或微黄色粉末，具有吸湿性，易溶于水而成粘度较大的溶液，难溶于甲醇、乙 醇、乙醚、丙醇、丙酮和冰醋酸等有机溶剂，并且遇热不稳定，乙酰基易发生水解脱落，在酸 性条件下更易水解成不同聚合度的低聚糖。硫酸软骨素具有降血脂、抗凝血、抗炎症及抗肿 瘤等生理活性，临床上可用于预防动脉粥状硬化、提高机体免疫力、治疗风湿病和肾炎及由 链霉素引起的听觉障碍。硫酸软骨素与铜等金属离子结合可用于治疗皮肤病，与硝酸铋或 氢氧化铝反应得到的络合物可用于治疗消化性溃疡，与苯甲酸酯、利多卡因或布比卡因作 用生成的衍生物可用作麻醉剂。作为食品添加剂，硫酸软骨素可用于食品的乳化、保湿和祛 除异味。在化妆品中添加硫酸软骨素，可调节皮肤的细胞代谢，促进营养的吸收，保持皮肤 的水分和改善发质。 随着硫酸软骨素生物活性不断被揭示和其应用领域的不断扩展，有关硫酸软骨素 的提取、纯化和分离技术已取得了一定的研究成果，但应用于生产实际还有许多需要改进 和完善之处。目前，硫酸软骨素生产厂家主要采用的方法成本高，产率和纯度低。所以，本公 司开发了稀碱浓盐法从猪鼻骨中提取硫酸软骨素，以降低成本，提高效益。
技术实现思路
本专利技术提供了一种全新的方法(稀碱浓盐法)从猪鼻骨中提取硫酸软骨素，能够有 效地降低成本，并提高产品的产率和纯度。为此，本专利技术通过以下技术方案予以实现： 1.盐解 将猪鼻骨粉碎，放入80°C水中浸泡4~6小时，然后加入骨质量5倍的0.4%氢氧化钠和 20%的氯化钠混合溶液(pH为13)，于40°C下提取3小时，然后用盐酸调pH到6.5~7.5，双层纱 布过滤；留下滤液，再向滤渣中加入骨质量5倍的0.4%氢氧化钠和20%的氯化钠混合溶液(pH 为13)，于40°C下提取2小时，再用双层滤布过滤;弃滤渣，取滤液。合并2次滤液。用0.4%的氢 氧化钠溶液将滤液调节pH到8.0~9.0，升温到80~90°C，加入少量滑石粉，用盐酸将盐解液 调节pH到2~3，再用双层滤布过滤，向滤液中加入1.5倍体积的水进行稀释，同时用Ο . 4%的 氢氧化钠溶液调节pH到6.5。 2.吸附 过滤后加入高岭土和活性炭吸附。用氯仿反萃取法萃取滤液，留水层。 3.沉淀 调节水层pH至6.8~7.2，再加入2.5倍体积的95%以上乙醇，充分搅拌后，静置12小时以 上，虹吸上层乙醇，即得硫酸软骨索。 4.纯化 将硫酸软骨素溶于浓度为3%(m/v)的氯化钠溶液中，加入少量乙醇，于低温下静置后离 心，将其上清液中再加入少量乙醇，重复以上步骤，可依次得到较高纯度的硫酸软骨素。 5.脱水 最后，用95%以上的丙酮对产品进行脱水，再真空干燥，即可。 本专利技术的有益效果是：用稀碱浓盐法分离猪鼻骨中的硫酸软骨素，并且增加了纯 化过程，有效地降低了生产成本，并且提高了产品的产率和纯度。【具体实施方式】 下面结合实施例对本专利技术作进一步说明。 1 盐解 称取100千克猪鼻骨粉碎，放入80°C水中浸泡5小时，然后加入骨质量5倍的0.4%氢氧化 钠和20%的氯化钠混合溶液(pH为13)，于40°C下提取3小时，然后用盐酸调pH到7.3,双层纱 布过滤；留下滤液，再向滤渣中加入骨质量5倍的0.4%氢氧化钠和20%的氯化钠混合溶液(pH 为13)，于40°C下提取2小时，再用双层滤布过滤;弃滤渣，取滤液。合并2次滤液。用0.4%的氢 氧化钠溶液将滤液调节pH到8.6，升温到84°C，加入少量滑石粉，用盐酸将盐解液调节pH到 2.7，再用双层滤布过滤，向滤液中加入953升水进行稀释，同时用0.4%的氢氧化钠溶液调节 pH到6.5。 2.吸附 过滤后加入高岭土和活性炭吸附。用氯仿反萃取法萃取滤液，留水层。 3.沉淀 调节水层pH至6.8~7.2，再加入2.5倍体积的95%以上乙醇，充分搅拌后，静置12小时以 上，虹吸上层乙醇，即得硫酸软骨索。 4.纯化 将硫酸软骨素溶于浓度为3%(m/v)的氯化钠溶液中，加入少量乙醇，于低温下静置后离 心，将其上清液中再加入少量乙醇，重复以上步骤，可依次得到较高纯度的硫酸软骨素。 5.脱水 最后，用95%以上的丙酮对产品进行脱水，再真空干燥，即可。 6 ·对照 称取100千克同一批次的猪鼻骨，采用传统工艺提取其中的硫酸软骨素。通过对照发 现:传统工艺明显地成本高，效益低。 表1两种工艺产出效果对照表 以上所述，仅是本专利技术的较佳实施例而已，并非是对本专利技术作其它形式的限制，任何熟 悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的
技术实现思路
加以变更或改型为等同变化的等效实 施例。但是凡是未脱离本专利技术技术方案内容，依据本专利技术的技术实质对以上实施例所作的 任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本专利技术技术方案的保护范围。【主权项】1. ，其特征在于步骤如下： (1) 盐解 将猪鼻骨粉碎，放入80°c水中浸泡4~6小时，然后加入骨质量5倍的0.4%氢氧化钠和 20%的氯化钠混合溶液(pH为13)，于40°C下提取3小时，然后用盐酸调pH到6.5~7.5，双层纱 布过滤；留下滤液，再向滤渣中加入骨质量5倍的0.4%氢氧化钠和20%的氯化钠混合溶液(pH 为13)，于40°C下提取2小时，再用双层滤布过滤;弃滤渣，取滤液;合并2次滤液；用0.4%的氢 氧化钠溶液将滤液调节pH到8.0~9.0，升温到80~90°C，加入少量滑石粉，用盐酸将盐解液 调节pH到2~3，再用双层滤布过滤，向滤液中加入1.5倍体积的水进行稀释，同时用0.4%的 氢氧化钠溶液调节pH到6.5; (2) 吸附 过滤后加入高岭土和活性炭吸附，用氯仿反萃取法萃取滤液，留水层； (3) 沉淀 调节水层pH至6.8~7.2，再加入2.5倍体积的95%以上乙醇，充分搅拌后，静置12小时以 上，虹吸上层乙醇，即得硫酸软骨索； (4) 纯化 将硫酸软骨素溶于浓度为3%(m/v)的氯化钠溶液中，加入少量乙醇，于低温下静置后离 心，将其上清液中再加入少量乙醇，重复以上步骤，可依次得到较高纯度的硫酸软骨素； (5) 脱水 最后，用95%以上的丙酮对产品进行脱水，再真空干燥，即可。【专利摘要】一种能够从猪鼻骨中提取硫酸软骨素的方法，它采用稀碱浓盐法，经过盐解、吸附、沉淀、纯化、脱水五个步骤从猪鼻骨中提取硫酸软骨素。结果稀碱浓盐法与传统提取方法相比较，乙醇用量减少86%左右，纯度提高19％左右，产率本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种稀碱浓盐法提取猪鼻骨中的硫酸软骨素的方法,其特征在于步骤如下：（1）盐解将猪鼻骨粉碎，放入80℃水中浸泡4～6小时，然后加入骨质量5倍的0.4%氢氧化钠和20%的氯化钠混合溶液（pH为13），于40℃下提取3小时，然后用盐酸调pH到6.5～7.5，双层纱布过滤；留下滤液，再向滤渣中加入骨质量5倍的0.4%氢氧化钠和20%的氯化钠混合溶液（pH为13），于40℃下提取2小时，再用双层滤布过滤；弃滤渣，取滤液;合并2次滤液;用0.4%的氢氧化钠溶液将滤液调节pH到8.0～9.0，升温到80～90℃，加入少量滑石粉，用盐酸将盐解液调节pH到2～3，再用双层滤布过滤，向滤液中加入1.5倍体积的水进行稀释，同时用0.4%的氢氧化钠溶液调节pH到6.5；（2）吸附过滤后加入高岭土和活性炭吸附,用氯仿反萃取法萃取滤液，留水层;（3）沉淀调节水层pH至6.8～7.2，再加入2.5倍体积的95%以上乙醇，充分搅拌后，静置12小时以上，虹吸上层乙醇，即得硫酸软骨索;（4）纯化将硫酸软骨素溶于浓度为3%(m/v)的氯化钠溶液中，加入少量乙醇，于低温下静置后离心，将其上清液中再加入少量乙醇，重复以上步骤，可依次得到较高纯度的硫酸软骨素;（5）脱水最后，用95%以上的丙酮对产品进行脱水，再真空干燥，即可。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘冠男，姜德志，迟培升，
申请(专利权)人：青岛九龙生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37