用于蛋白药物纯化的亲和层析介质制造技术

本案涉及用于蛋白药物纯化的亲和层析介质，其包括载体和配基，在载体和配基之间还连接有以下片段：‑OCH(R)CH(OH)CH

Affinity chromatography medium for protein drug purification

The case involved affinity chromatography for purification of protein drugs, including carrier and ligand, the following fragment is connected between the carrier and the ligand: OCH (R) CH (OH) CH

【技术实现步骤摘要】
用于蛋白药物纯化的亲和层析介质
本专利技术涉及一种层析介质，具体涉及一种用于蛋白药物纯化的亲和层析介质。
技术介绍
目前，在制药领域，如何提高药物的纯度和生物安全性，是重组蛋白、抗体等生物药研发和生产过程中的关键性步骤。我国药企对于分离介质的获得主要依赖进口，因此，国内亟需摆脱对进口分离介质的依赖，降低药物的生产成本。对蛋白药物纯化分离用的亲和层析介质主要是琼脂糖产品，但这类产品机械强度较低，从而导致其在装填层析柱后，耐受压力较低，限制了其分离效率的提升空间，同时也抑制了琼脂糖的重复使用次数。
技术实现思路
针对现有技术的不足之处，本专利技术的目的在于提供一种用于蛋白药物纯化的亲和层析介质。本专利技术的技术方案概述如下：一种用于蛋白药物纯化的亲和层析介质，其包括载体和配基，在载体和配基之间还连接有以下片段：-OCH(R)CH(OH)CH2-；其中，R选自CH2CH＝CH2、CH2COOEt和CH2Ph中的一种。优选的是，所述的用于蛋白药物纯化的亲和层析介质，其中，所述载体为琼脂糖凝胶或表面键合有琼脂糖分子的聚丙烯酸酯微球。优选的是，所述的用于蛋白药物纯化的亲和层析介质，其中，所述R为CH2CH＝CH2。优选的是，所述的用于蛋白药物纯化的亲和层析介质，其中，所述R为CH2COOEt。优选的是，所述的用于蛋白药物纯化的亲和层析介质，其中，所述R为CH2Ph。优选的是，所述的用于蛋白药物纯化的亲和层析介质，其中，所述载体的粒径为30-100μm。本专利技术的有益效果是：本案通过对亲和层析介质表面修饰基团的设计改进，在支链上引入大位阻基团，来提高亲和层析介质的机械强度，从而改善了层析介质在高压力下的分离效率和循环使用次数；同时，这种改进使得生产步骤简单，生产成本低，利于大规模推广应用。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。本案提供一实施例的用于抗体药物纯化的层析介质，其包括载体和配基，在载体和配基之间还连接有以下片段：-OCH(R)CH(OH)CH2-；其中，R选自CH2CH＝CH2、CH2COOEt和CH2Ph中的一种。在现有技术中，R为H原子，但这种分子结构的机械强度低，耐压性较差。其中，载体优选为琼脂糖凝胶或表面键合有琼脂糖分子的聚丙烯酸酯微球。载体的合成方法属于现有技术，载体本身也是一种常规市售商品，可以购买。当R为H原子时，琼脂糖凝胶载体的层析柱耐压值一般为0.3-0.5MPa，表面键合有琼脂糖分子的聚丙烯酸酯微球的层析柱耐压值一般为10-12MPa。其中，载体的粒径优选为30-100μm。层析介质的合成步骤如下(载体表面含有多个羟基，以下仅列出一个羟基以示范例)：配基(L：Ligand)的种类不受限定，可根据待吸附物质的种类而定。例如当需要制备蛋白A亲和层析介质时，配基就选择ProA；当需要制备蛋白G亲和层析介质时，配基就选择ProG。实施例1制备过程如下：1)向1mol载体中加入3-4mol丙酮、1.1-1.2mol环氧氯丙烷和1.5-2molNaOH，在30-40℃下搅拌1-2h，反应结束后洗涤干燥；载体为琼脂糖凝胶；2)加入3-5mol的THF、和1.1-1.3mol的NBS溴化试剂，在25-35℃下搅拌10-12h，随后以氯仿萃取3次，以丙酮洗涤干燥；3)加入1.1mol的RCl或RBr、1.3-1.4mol的5％Pd/C、2-3mol的K2CO3，10mol的乙醇，在40-50℃下搅拌12h，过滤，洗涤干燥；其中，R为CH2CH＝CH2；4)加入1.2mol的配基、5-7mol的乙醇和2-3mol的NaOH，在55-60℃下搅拌反应12-15h，反应结束后真空抽去溶剂，重复三次，即得层析介质。实施例2制备过程如下：1)向1mol载体中加入3-4mol丙酮、1.1-1.2mol环氧氯丙烷和1.5-2molNaOH，在30-40℃下搅拌1-2h，反应结束后洗涤干燥；载体为琼脂糖凝胶；2)加入3-5mol的THF、和1.1-1.3mol的NBS溴化试剂，在25-35℃下搅拌10-12h，随后以氯仿萃取3次，以丙酮洗涤干燥；3)加入1.2mol的RCl或RBr、1.3-1.4mol的5％Pd/C、2-3mol的K2CO3、10mol的乙醇，在35-40℃下搅拌24h，过滤，洗涤干燥；其中，R为CH2COOEt；4)加入1.2mol的配基、5-7mol的乙醇和2-3mol的NaOH，在55-60℃下搅拌反应12-15h，反应结束后真空抽去溶剂，重复三次，即得层析介质。实施例3制备过程如下：1)向1mol载体中加入3-4mol丙酮、1.1-1.2mol环氧氯丙烷和1.5-2molNaOH，在30-40℃下搅拌1-2h，反应结束后洗涤干燥；载体为表面键合有琼脂糖分子的聚丙烯酸酯微球；2)加入3-5mol的THF、和1.1-1.3mol的NBS溴化试剂，在25-35℃下搅拌10-12h，随后以氯仿萃取3次，以丙酮洗涤干燥；3)加入1.1mol的RCl或RBr、1.3-1.4mol的5％Pd/C、2-3mol的K2CO3、10mol的乙醇，在50-55℃下搅拌12h，过滤，洗涤干燥；其中，R为CH2Ph；4)加入1.2mol的配基、5-7mol的乙醇和2-3mol的NaOH，在55-60℃下搅拌反应12-15h，反应结束后真空抽去溶剂，重复三次，即得层析介质。实施例4载体为表面键合有琼脂糖分子的聚丙烯酸酯微球；其余与实施例1相同。实施例5载体为表面键合有琼脂糖分子的聚丙烯酸酯微球；其余与实施例2相同。下表列出实施例1-5的测试结果：实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5层析柱耐压值2.7MPa2.8MPa3.0MPa20MPa20MPa重复使用次数140次140次140次200次200次尽管本专利技术的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本专利技术的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本专利技术并不限于特定的细节。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于蛋白药物纯化的亲和层析介质，其包括载体和配基，其特征在于，在载体和配基之间还连接有以下片段：‑OCH(R)CH(OH)CH

【技术特征摘要】
1.一种用于蛋白药物纯化的亲和层析介质，其包括载体和配基，其特征在于，在载体和配基之间还连接有以下片段：-OCH(R)CH(OH)CH2-；其中，R选自CH2CH＝CH2、CH2COOEt和CH2Ph中的一种。2.根据权利要求1所述的用于蛋白药物纯化的亲和层析介质，其特征在于，所述载体为琼脂糖凝胶或表面键合有琼脂糖分子的聚丙烯酸酯微球。3.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：瞿欢欢，朱至放，
申请(专利权)人：苏州楚博生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32